實驗概要
從海馬體中分離到神經元細胞，然后進行培養細胞以便進行其他的實驗研究。
主要試劑
解剖液
MEM
HBSS
主要設備
L-多聚賴氨酸包被的平皿或蓋玻片
實驗材料
出生24h內的乳鼠
實驗步驟
1. 用冷卻的解剖液（0℃，最高2-3℃）沖洗海馬兩次。
2. 在冷卻解剖液（2-3℃）中解剖無腦膜的海馬。
3. 加入胰蛋白酶（調整終濃度為0.25%），在15毫升Falcon管中37°處理15分鐘。一般10至20個海馬用溶液5毫升。
4. HBSS或MEM溶液洗兩次，停止消化。
5. 用1至3毫升含10%胎牛血清的MEM溶液重懸。
6. 用1000mL的微量移液器吹打混勻（10次左右）。
7. 等待1-2分鐘，待未消化的海馬組織沉至底部后，吸取已消化的細胞轉移到新的管中。向未消化的組織中加入2毫升的HBSS，并通過巴斯德管的處理直到組織完全分離，并將消化的細胞轉至同一管中。
8. 計數細胞的數量。
9. 用培養基將神經元細胞稀釋到所需濃度。將細胞移至多聚賴氨酸處理過的平皿或蓋玻片上。并依照平皿或蓋玻片的大小優化細胞數量。例如，2mL密度為300 000-400 000每毫升的細胞液，可以培養在35毫米平皿上。
10. 在沒有膠質細胞飼養層的情況下，細胞在37℃，5%二氧化碳和含10% Nu-血清的組織培養基中培養。
注意事項
1. L-多聚賴氨酸（0.1mg/ml）包被培養板后，因為對神經元有毒性，要待其干后才能接種。可以回收再利用。
2. 取腦組織時動作要盡量快，保持低溫操作。
3. 分離皮層和海馬時，盡量少殘余血管和腦膜，否則會培養大量的成纖維細胞。
4. 接種細胞后24h內勿移動，以防影響貼壁。
血清采集完成后，通過冷凍的方式運輸到加工工廠。到達工廠后，先進行解凍，隨后對血清進行一系列檢測，包括細菌、病毒、內毒素以及血紅蛋白含量等多項指標的檢測。在檢測過程中，會篩選出最優質的血清，并將其置于無......
建議將血清儲存于-20°C，這一溫度條件下，血清在凍存狀態時最為穩定。不推薦將血清存放在無霜冰箱中，因為無霜冰箱的溫度循環可能會導致瓶體破裂，進而使產品受到污染或發生變質。......
胎牛血清與小牛血清的來源存在差異，胎牛血清是通過從尚未出生的胎牛心臟穿刺采血而獲得的，而小牛血清則是從出生后1年內的小牛體內通過靜脈采血得到的。由于它們的供體牛齡不同，因此兩者所含的促細胞生長因子、促......
為什么細胞培養中需要添加血清呢？血清通常以2-10%的濃度添加到培養基中，為細胞提供全面的營養成分、激素、生長因子以及附著因子。此外，血清還能夠作為細胞培養系統的緩沖成分，防止pH值變化、蛋白水解活性......
在細胞培養實驗中，血清的使用是關鍵環節之一，其保存、解凍和滅活操作的正確性直接影響細胞的生長狀態和實驗結果的可靠性。以下是血清保存、解凍與滅活的操作流程，供實驗人員參考：一、血清保存方法1、長期保存溫......
在細胞培養里，血清為細胞的生長、增殖和維持生理功能提供了不可或缺的支持。然而，血清種類繁多，各有特點，適用于不同的細胞培養需求。本文將為您詳細介紹血清的各類成員，幫助您在細胞培養中做出更合適的選擇。一......
在細胞培養的世界里，血清的選擇絕對是個關鍵環節。它就像是給細胞準備的“營養套餐”，直接影響細胞的生長、繁殖和健康。今天，我們就以牛源血清為例來好好聊聊，如何在眾多血清中挑出最適合的那一款。一、牛源血清......
細胞培養是現代生物學研究中一項重要的技術，廣泛應用于基礎研究、藥物開發、疾病模型構建等領域。在細胞培養過程中，血清是不可或缺的關鍵成分之一。血清是一種復雜的生物液體，含有多種生物活性物質，能夠為細胞提......
近日，中國工程院院士、中國海洋大學教授薛長湖團隊首次成功制備了厘米級細胞培養魚肉，相關研究性論文發表在國際食品Top期刊《農業與食品化學雜志》。隨著環境污染、糧食短缺、人畜共患疾病、動物福利和可持續發......
科學家們已經成功地大規模生產了實驗室培養的脂肪組織，這反映了自然衍生的動物脂肪的紋理和組成。最近發表在《eLife》雜志上的這一發現可用于制造細胞培養的肉類，增強其質地和味道，使之與傳統肉類非常相似。......