紫外分光光度法測定胡椒堿

摘要：本文研究了胡椒堿的乙醇溶液在紫外光譜區有一個靈敏的吸收峰，其最大吸收波長為342mm，據此建立了一個簡單、快速、選擇性好的測定胡椒中胡椒堿含量的新的紫外分析法。本法胡椒堿濃度在0～70μg/ml范圍內服從比耳定律。

目前，市售胡椒粉摻雜使假者較多，其測定方法多為定性方法 。關于胡椒中胡椒堿的定量分析曾經有薄層紫外掃描法和比色法，前者受儀器條件的限制，一些基層單位尚難普及，后者較前者繁雜。本文介紹一種容易推廣的直接紫外光度法，該方法簡單、快速、準確。

1 試劑與儀器

1.1 試劑無水乙醇、活性炭、胡椒堿標準儲備溶液。精密稱取胡椒堿0.1000g用無水乙醇溶解于容量瓶中，并定容為100ml;胡椒堿標準使用溶液臨用時吸取儲備液10.0ml于100ml容量瓶中，以無水乙醇定容至刻度。

1.2 儀器724-1型分光光度計

2 實驗方法

2.1 標準曲線制作

分別吸取0.00、0.05、0.10、0.30、0.50、0.70ml胡椒堿標準使用溶液于10.0ml比色管中，用無水乙醇稀釋至刻度，混勻。用1cm比色杯，以無水乙醇作參比，于波長342nm處測吸光度，繪制標準曲線。

2.2 樣品中胡椒堿的提取與測定

準確稱取經粉碎并全部通過100目篩過篩的樣品約0.1g于50ml燒杯中，加人0.1g活性炭后加人少量無水乙醇，在電爐上小心熱至沸騰。分次過濾于100ml容量瓶中，以無水乙醇少量多次淋洗，定容至刻度，混勻。然后吸取5ml于10ml比色管中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻。以下操作與標準曲線制備相同，進行分光光度測定。

3 結果與討論

3.1 吸收光譜

實驗表明：胡椒堿在無水乙醇介質中的吸收光譜，其最大吸收波長λmax為342nm，本文選擇該波長下進行測定。

3.2 活性炭用量的選擇

樣品的色澤對吸光度有一定影響，選用活性炭脫色，過濾后比色，效果較好。取五份胡椒堿含量一致的有色樣品，分別加入活性炭0.0、0.1、0.2、0.3、0.4g。實驗表明：加入0.1g活性炭脫色效果好;少于0.1g脫色不完全;大于0.2g吸光度偏低。故本文試驗選用活性炭用量為0.1g。

3.3 溶劑的選擇

分別用無水乙醇與1.2～～二氯乙烷作為溶劑，實驗表明：兩種溶劑吸收光譜相近，無顯著性差異。由于1.2～ ～二氯乙烷對人體有一定的毒害作用，故選用無水乙醇作為溶劑。

3.4 乙醇濃度的選擇

乙醇濃度對吸光度影響較大，在提取胡椒中胡椒堿時，本文分別選用lO%、30%、50%、80%的無水乙醇作為溶劑，對同量樣品進行實驗。實驗表明：lO%、30%提取液混濁，影響比色;50%、80%及無水乙醇的提取液呈透明狀態，但以無水乙醇提取液在342nm處吸收峰為最大，故本文選用無水乙醇作為溶劑。

3.5 標準曲線

實驗表明：在0～70μg/ml范圍內遵守比耳定律。以回歸分析法處理相關系數r=0.9998，最低檢出限為5μg/ml。

3.6 精密度

取2份樣品，在不同時間內按操作方法進行7次平行測定，其相對標準偏差為2.1～4.3%

3.7 方法的準確度試驗

樣品中加入不同量的胡椒堿標準使用液按本法操作，回收率為94.2～96.9% ，平均94.5%

3.8 干擾

在已知胡椒堿含量的三份溶液中，分別加入辣椒粉、桂皮粉、茴香粉各0.1g，按本法操作，測得結果比原來降低1.5～1.7% ，說明基本無干擾。

參考文獻

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