腸道菌群糞便直接涂片染色檢查

一、糞便直接涂片的優缺點：
1、優點：①設備簡單②操作簡單③時間短④形象直觀，直接了解糞便菌群的“像”，熟練者對診斷菌群失調有較高的準確性。
2、缺點：①檢驗者必須有一定的經驗，否則易判斷錯誤②主要是定性檢查，確定分度較困難。
二、操作技術：
1、涂片  將新鮮大便直接涂抹在潔凈的玻片上，糞便不可稀釋以防細菌變形。標本務求新鮮，涂片厚薄適宜。
2、外觀  肉眼檢查外觀顏色、形狀（若含有膜狀物的大便應補做艱難梭菌培養）。
3、鏡檢  染色技術是診斷準確成功的關鍵，革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌要對比鮮明。鏡檢時應將涂片視野全面觀覽，切不可看幾個視野就計數或報告。
三、檢查方法：
1、細菌總數：觀察菌群涂片首先要總覽細菌總數。了解涂片上細菌的數量是增多還是減少，有無優勢菌或真菌。細菌總數過多的情況較少見或不易引起重視。菌群失調時細菌總數多在正常、減少或消失。
細菌總數評定標準
每油鏡視野細菌數評價
＜10顯著減少
11—100明顯減少
101—500略微減少
501—5000正常
＞5000增多
2、觀察革蘭氏陽性、陰性桿菌及球菌的比率改變
革蘭氏陽性桿菌：革蘭氏陰性桿菌：革蘭氏陽性球菌：革蘭氏陰性球菌（包括球菌/桿菌）比率反映了糞便菌群的質素，它一般不受糞便稀釋或濃縮的影響，所以較細菌總數有更大的意義，更能反映菌群的本質和預后。
選定有代表性視野中的部分區域作細菌分類計數，需要數100—200個細菌以求得比例。不同年齡的人的比例都不一樣，一般桿菌與球菌比例約為75：25。
各年齡組細菌比率平均值的正常參考值（%）
年齡   革蘭氏陽性桿菌  革蘭氏陰性桿菌   革蘭氏陽性球菌   革蘭氏陰性球菌
1d：     30.7—61.5     38.5—6.9           0—2.2          0—0.01
2d：     60.0—71.6     34.8—36.9         3.0—3.5         0—0.01
3d：     66.9—82.7     16.0—31.4         1.3—1.6         0—0.05
4d：     79.2—86.2     12.4—19.2         1.4—1.7         0—0.1
5d：     85.5—87.51    1.0—12.8          1.4—1.7         0.08—0.4
6d—7d：  75.4—90.1    7.2—20.8          1.3—2.9         0.1—0.6
8d—15d： 72.4—93.3    5.3—18.9          0.8—1.9         0.1—0.8
1個月：   76.1—95.2    3.3—21.8          0.9—2.6         0.2—1.1
3個月：   80.7—95.9    3.2—17.0          0.9—2.8         0.3—1.5
半年：    82.1—96.4    2.3—15.8          0.5—2.6         0.2—1.1
1歲：     78.4—94.5    3.5—16.6          1.5—2.6         0.3—1.7
2歲：     68.3—90.6    7.5—26.6          1.8—12.2        0.2—2.1
5歲：     51.7—86.3    10.6—37.7         2.0—13.2        1.1—5.4
10歲：    56.7—88.5    7.6—30.7           2.5—12.2       2.0—6.7