食品基質中403種農藥殘留的測定

復雜食品基質（如谷物、蜂蜜、蘋果、肉類）中痕量農殘的分離檢測非常復雜，本文建立了使用Agilent 快速高分離度液相色譜 （RRLC）與三重串聯四級桿質譜 (QQQ)聯用的方法，實驗得到了良好的線性關系和重復性。與常規HPLC相比，顯著改善了復雜樣品的分離度，極大地提高了檢測靈敏度和分析通量，在復雜食品基質中痕量組分中有著廣闊的應用前景。

儀器和主要試劑

Agilent 1200 RRLC快速高分離度液相色譜；Agilent 6410 QQQ（三重串聯四極桿質譜）；振蕩儀；氮氣吹干儀。
所有試劑均為色譜純，購自Sigma公司；C18 SPE柱（Supelclean LC-18，3ml Tubes，Supelco）；微孔濾膜過濾：0.45μm（Supelco）；所有農藥標準品購自Sigma Inc.。

標準溶液的制備

標準儲備溶液：分別精確稱取5.0mg分別置于10ml容量瓶中，根據標準物質的溶解度選甲醇、乙腈等溶劑溶解并定溶至刻度。
混合標準溶液（混合標準溶液A、B、C、D、E和F）：按照農藥及相關化學品的性質和保留時間，將403種農藥及相關化學品分成A、B、C、D、E、F六個組。

依據每種農藥的分組，移取一定量的單個農藥的標準儲備液于100ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，所有被分析物的線形濃度范圍0.5~500ng/ml。混合標準溶液避光4℃保存，可使用一個月。

樣品的提取與凈化

稱取10g樣品至300ml三角瓶中，加入100ml乙腈并震搖30min，過濾乙腈提取液至100ml梨形瓶中，于40℃水浴濃縮至5ml左右。100ml 4%氯化鈉水溶液分三次溶解濃縮液，并將其全部轉移至分液漏斗中，加入50ml二氯甲烷震蕩提取10min（重復二次）。下層有機相過裝有無水硫酸鈉的漏斗于100ml梨形瓶中，40℃水浴旋轉濃縮蒸干后用5ml甲醇溶解，上C18 SPE柱（Supelclean LC-18，3ml Tubes，Supelco；SPE柱預先用5ml甲醇洗脫，然后用5ml洗脫進行預處理），用5ml甲醇洗脫，全部甲醇洗脫液在氮氣下吹干，殘留物用甲醇：水（15：85）定容至1ml，0.45μm微孔濾膜過濾后供LC-QQQ分析。

操作條件

色譜條件

譜柱：Agilent SB-C18，2.1×100mm，1.8μm；柱溫：50℃；進樣量：20μl；流動相及流速見表1；后運行時間：8min。

質譜條件

電離源模式：電噴霧離子化；電離源極性：正模式；霧化氣：氮氣；霧化氣壓力：40psi；離子噴霧電壓：4000V；干燥氣溫度：350℃；干燥氣流速：10L/min；分辨率：Q1（unit）Q3（unit）。

樣品分析

定性測定：在相同實驗條件下進行樣品測定時，如果樣品中檢出色譜峰的保留時間與基質標準中某種農藥及相關化學品色譜峰的保留時間一致，并且在扣除背景后所選擇的二對離子及豐度比也一致，則可判定為樣品中存在這種農藥殘留。

定量測定：本方法中LC-QQQ采用外標校準曲線法定量測定。為減少基質對定量測定的影響，定量用標準溶液采用基質混合標準工作溶液繪制，并且所測樣品中農藥殘留的響應值均在線性范圍內。

平行試驗：按以上步驟對同一試樣進行平行試驗。

空白試驗：除不稱取試樣外，均按上述步驟進行。

結果計算：LC-QQQ測定采用標準曲線法定量，標準曲線法定量結果由Mass Hunter定量軟件Quantitative Analysis計算生成。

結果

403種農藥的線形濃度范圍0.5~500ng/ml，線形關系良好，R值均大于0.99。谷物樣品中農藥殘留的總離子流圖（TIC）見圖1、圖2。

結論

本文所建立的方法具有出色的檢測靈敏度、良好的線性關系和重復性，非常適用于復雜食品基質中痕量農殘的分離檢測。Agilent快速高分離度液相色譜（RRLC）與三重串聯四級桿質譜（QQQ）的聯用，不僅顯著改善了復雜樣品的分離度、而且極大提高了檢測靈敏度和分析通量。