NatureMethods發布CRISPR新技術：CRISPRX
斯坦福大學遺傳學系，藥理學系的幾位學者合作，開發出了一種為原位蛋白質工程重利用體細胞超突變的新技術—— CRISPR-X ，這將能幫助科學家們創建復雜的原始遺傳突變文庫，分析完善蛋白質工程。 這一研究成果在線公布在10月31日的Nature Methods雜志上，文章的通訊作者是斯坦福大學Michael C Bassik副教授，他曾參與研發多項CRISPR新技術，比如前年研發的SunTag，這是一套分子掛鉤，其能夠將多個拷貝的生物活性分子掛到可用來靶向一些基因或其他的分子的蛋白質支架上，利用SunTag能增加CRISPR的變化。 目前通過定向進化法分析蛋白功能，進行蛋白質工程研究受限于整體誘變，或DNA文庫構建方面的技術問題。這篇文章針對于此，研發出了一種為原位蛋白質工程重利用體細胞超突變的新技術：CRISPR-X。 研究人員催化激活休眠的 dCas9，令其召集攜帶MS2修飾sgRNAs的胞嘧啶脫氨酶(cytidine......閱讀全文
Nature－Methods發布CRISPR新技術：CRISPRX
斯坦福大學遺傳學系，藥理學系的幾位學者合作，開發出了一種為原位蛋白質工程重利用體細胞超突變的新技術—— CRISPR-X ，這將能幫助科學家們創建復雜的原始遺傳突變文庫，分析完善蛋白質工程。 這一研究成果在線公布在10月31日的Nature Methods雜志上，文章的通訊作者是斯坦福大學Mi
NatureMethods發布CRISPR新技術：CRISPRX
斯坦福大學遺傳學系，藥理學系的幾位學者合作，開發出了一種為原位蛋白質工程重利用體細胞超突變的新技術――? CRISPR-X ，這將能幫助科學家們創建復雜的原始遺傳突變文庫，分析完善蛋白質工程。這一研究成果在線公布在10月31日的Nature Methods雜志上，文章的通訊作者是斯坦福大學Micha
“化學脫籠”：實現蛋白質高時間分辨的原位激活
在活細胞等生理環境下開展蛋白質功能的原位研究具有重要的科學意義。北京大學化學與分子工程學院陳鵬課題組長期致力于發展蛋白質的原位激活技術，希望為活細胞內的每一個蛋白質安裝“調控開關”。 近日這一研究組與王初課題組合作發表了題為“Time-resolved protein activation b
原位PCR和原位RT
（一）、儀器設備?英國Thermo Hybaid原位PCR儀?。（二）、操作流程1、原位PCR?步驟1）預處理：（1）切片常規脫蠟；（2）0.2mol/L HCl處理10min；（3）5μg/ml蛋白酶K消化組織37℃10min；（4）Nase消化組織37℃ 30min；（5）梯度酒精脫水，室溫干燥
科學家開發蛋白質復合物原位解析新技術
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/5/500192.shtm作為生命活動的執行者，蛋白質通過相互作用形成復合物等形式行使其特定的生物學功能。近日，中國科學院大連化學物理研究所研究員張麗華、研究員趙群等研制了一種基于糖苷鍵的質譜可碎裂型交聯劑，顯
原位化學交聯可以解碼細胞中蛋白質動態結構策略
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/8/505975.shtm
德國應用化學：蛋白質復合物原位解析新技術
作為生命活動的執行者，蛋白質通過相互作用形成復合物等形式行使其特定的生物學功能。近日，中國科學院大連化學物理研究所研究員張麗華、研究員趙群等研制了一種基于糖苷鍵的質譜可碎裂型交聯劑，顯著地提高了交聯信息的檢索通量和鑒定準確度，同時具有良好的兩親性和生物兼容性，實現了活細胞內蛋白質復合物原位交聯和
我國研究人員開發了蛋白質瞬時原位激活新技術
近日，北京大學陳鵬課題組與王初課題組發展了一種在活體細胞或動物內瞬時激活蛋白質的普適性新技術，具體成果發表在Nature上，題為Time-resolved protein activation by proximal decaging in living systems。 在復雜的生命體系中原
間接原位PCR（原位雜交PCR）
與直接原位PCR所不同的是，靶基因在擴增時不進行標記基團的摻入，而是標記一段與擴增片段互補的探針，在擴增結束后，應用此探針進行原位雜交。因此，此處主要介紹原位雜交，其余方法同原位PCR。實驗材料組織或細胞樣品試劑、試劑盒SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脫脂奶粉Denhardt’s 液SDS變性的鮭魚精DNAR
間接原位PCR（原位雜交PCR）
間接原位PCR（原位雜交PCR） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 組織或細胞樣品 試劑、試劑盒
間接原位PCR（原位雜交PCR）
與直接原位PCR所不同的是，靶基因在擴增時不進行標記基團的摻入，而是標記一段與擴增片段互補的探針，在擴增結束后，應用此探針進行原位雜交。因此，此處主要介紹原位雜交，其余方法同原位PCR。一、預雜交1. 試劑與配制2×SSC50%去離子甲酰胺：用4×SSC配制（v/v）預雜交液：2×SSC，5%硫酸葡
原位PCR
About in situ PCR?(Applied Biosystems)Basic information about in situ PCR and its applications.The?In Situ?PCR: Amplification and Detection in a Cellu
原位PCR
實驗概要原位PCR技術自上世紀90年代初建立至今，科學家就一直對原位PCR的技術和應用進行研究，目前該項技術已日臻完善。原位PCR既能分辨帶有靶序列的細胞又能標出靶序列在細胞內的位置，在分子和細胞水平上研究疾病的發病機理、臨床過程以及病理的轉歸，其特異性和敏感性均高于一般PCR技術。在病毒學、病理學
間接原位PCR（原位雜交PCR）實驗
實驗材料 組織或細胞樣品試劑、試劑盒 SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脫脂奶粉Denhardt’s 液SDS變性的鮭魚精DNARnaseDTT乙醇儀器、耗材 玻片石蠟膜橡皮泥濕盒實驗步驟 一、預雜交?1. ? 試劑與配制?2×SSC?50%去離子甲酰胺：用4×SSC配制（v/v）?預雜交液：2×SSC，5%硫
原位雜交與熒光原位雜交
?一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH)?是用標記的核酸探針，使用非放射檢測系統或放射自顯影系統，在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法，具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一，廣泛
原位雜交與熒光原位雜交
?一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH)?是用標記的核酸探針，使用非放射檢測系統或放射自顯影系統，在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法，具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一，廣泛
原位雜交與熒光原位雜交
一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH) 是用標記的核酸探針，使用非放射檢測系統或放射自顯影系統，在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法，具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一，廣泛應
中科院大連化物所開發蛋白質復合物原位解析新技術
近日，中科院大連化物所生物技術研究部生物分子高效分離與表征研究組（1810組）張麗華研究員團隊研制了一種基于糖苷鍵的質譜可碎裂型交聯劑，顯著地提高了交聯信息的檢索通量和鑒定準確度，同時具有良好的兩親性和生物兼容性，實現了活細胞內蛋白質復合物原位交聯和規模化精準解析。作為生命活動的執行者，蛋白質通
熒光原位雜交的熒光原位雜交
熒光原位雜交（fluorescence in situ hybridization，FISH）是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術，以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。探針首先與某種介導分子（reporter molecule）結
原位雜交儀原位雜交的意義
原位雜交：在研究DNA分子復制原理的基礎上發展起來的一種技術。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段，在適宜的條件下，能過氫鍵結合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點，應用帶有標記的（有放射性同位素，如3H、35S、32P、熒光素生物素、地高辛等非放射性物質）DNA或R
原位雜交儀—原位雜交試驗（一）
收集斑馬魚的胚胎，在Holfretor水中培養，到達所需要的發育時期時，用蛋白酶去除卵膜，用4%多聚甲醛固定，在4℃保存，二十四小時后用50%甲醇2%多聚甲醛溶液洗，然后換成甲醇，在-20C 保存，待用（兩天和兩天以上的胚胎需要用雙氧水處理，去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培養，可阻斷色素的形成）
原位雜交儀—原位雜交實驗（三）
原位雜交第三天 1） 用1ml含10%熱滅活血清的MABT溶液置換抗體溶液，放置搖床上25分鐘，然后用1mlMABT置換，25分鐘，再用1mlMABT溶液置換，一小時以上，最后用1mlMABT溶液置換，25分鐘。 2） 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置
原位雜交儀—原位雜交實驗（二）
原位雜交第二天 1. 1）將探針回收，放于－20C保存（通常探針可重復使用十次左右）。 2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分鐘，重復一次。 3）置換2XSSCT1ml，60℃，放置15分鐘。 4）置換0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分鐘，重復一次。
我國科學家研發出活體內蛋白質瞬時原位激活新技術
在活細胞等復雜的生命體系中原位研究蛋白質功能具有重要的科學意義。以往在活細胞內開展的蛋白質原位研究只能在某些特定蛋白家族中應用，如何進一步發展廣泛適用于不同類型蛋白家族的原位研究方法一直是困擾眾多生物學家的科學難題。 在國家重點研發計劃“蛋白質機器與生命過程調控”重點專項“信號轉導過程中蛋白質
原位PCR儀
用于從細胞內靶DNA的定位分析的細胞內基因擴增儀，如病源基因在細胞的位置或目的基因在細胞內的作用位置等。是保持細胞或組織的完整性，使PCR反應體系滲透到組織和細胞中，在細胞的靶DNA所在的位置上進行基因擴增，不但可以檢測到靶DNA，又能標出靶序列在細胞內的位置，于分子和細胞水平上研究疾病的發病機
原位PCR儀
用于從細胞內靶DNA的定位分析的細胞內基因擴增儀，如病源基因在細胞的位置或目的基因在細胞內的作用位置等。是保持細胞或組織的完整性，使PCR反應體系滲透到組織和細胞中，在細胞的靶DNA所在的位置上進行基因擴增，不但可以檢測到靶DNA，又能標出靶序列在細胞內的位置，于分子和細胞水平上研究疾病的發病機理和
直接原位PCR
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術，使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞（爬片、甩片或涂片）或組織（石蠟、冰凍切片）上直接對靶基因片段進行擴增，通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法
原位PCR配置
主機一臺，個人存儲卡一張，原位PCR適配器 1.適用于96×0.2ml PCR管或77×0.5ml PCR管或8×12PCR板不需要更換模塊； 2.反應槽溫控范圍：4-99℃； 3.控溫精度：±0.2℃； 4.模塊均一性：≤±0.5℃； 5.溫控速率：升3℃/秒,降2℃/秒，速率可調；
原位PCR定義
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技術，就是在組織細胞里進行PCR反應，它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點，是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。原位PCR既能分辨鑒定帶有靶序列的細胞，又能標出靶序列在細胞內的位置，于分子和細胞水平上研究疾
直接原位PCR
實驗方法原理 原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術，使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞（爬片、甩片或涂片）或組織（石蠟、冰凍切片）上直接對靶基因片段進行擴增，通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。實驗材料 細胞或組織樣品試劑、試劑盒 福爾馬林二甲苯PB