大連化物所代謝酶特異性探針底物研發取得新進展
近日,中國科學院大連化學物理研究所藥用資源開發研究組楊凌研究團隊采用計算機輔助篩選及酶催化位點局部改造的策略成功設計研發了首個細胞色素P450 1A1亞酶的高特異性熒光探針底物,相關研究成果發表在《化學科學》(Chemical Science,DOI:10.1039/C6SC03970G)上。 酶是生物體內分布的具有催化活性的一類蛋白質。人體內分布了數千種代謝酶,其可催化6000余種生化反應并在內源性代謝和外源物代謝處置中發揮著至關重要的作用。長期以來,設計開發亞型特異性的探針底物一直是生物醫藥領域的一大挑戰。該研究中,研發人員以細胞色素P450 1A(CYP1A)家族為研究對象,基于CYP1A1與CYP1A2在催化活性空腔上的微小差別,采用酶催化位點局部改造的策略,并借助計算機輔助篩選及代謝表型篩選設計合成了首個CYP1A1亞型選擇性的熒光探針底物。該探針對目標酶具有極高的特異性,不僅可實現CYP1A1與CYP1A2等相......閱讀全文
檢測酶活性的熒光探針
檢測酶活性的熒光探針?共聚焦激光掃描顯微鏡除了具備熒光顯微鏡檢測熒光酶細胞化學的作用以外,在檢測活細胞酶活性動態變化方面有著無可比擬的優勢。通過對細胞施予不同的處理因素可檢測細胞內相應的酶被激活或滅活的動態變化過程。有的酶熒光探針是自身就可發出熒光、有的是與酶結合后發出熒光、有的則是被酶分解后發出熒
鈣離子熒光探針:比值型熒光探針
前面我們介紹了熒光指示劑法可以將Ca2+檢測的實驗與其他技術結合使用,如可以與流式細胞儀、熒光分光光度計、或者熒光顯微鏡進行聯合檢測 。紫外光型主要包括Quin-2、Indo-1、Fura-2等,數量較少,可見光型數目較多,包括Fluo-3、鈣黃綠素、Rhod-2等。熒光指示劑根據測光原理和數據
Chemical-Science:-酶特異性探針底物研發新策略
近日,中科院大連化學物理研究所楊凌團隊探索出酶特異性探針底物的研發新策略,該團隊采用計算機輔助篩選及酶催化位點局部改造的策略成功設計研發了首個細胞色素P450 1A1亞酶的高特異性熒光探針底物。相關研究成果以“A practical strategy to design and develop
大化所代謝酶特異性探針底物研發取得新進展
近日,我所藥用資源開發研究組(1806組)楊凌研究團隊采用計算機輔助篩選及酶催化位點局部改造的策略成功設計研發了首個細胞色素P450 1A1亞酶的高特異性熒光探針底物,相關研究成果發表在Chemical Science上(DOI:10.1039/C6SC03970G)。 酶是生物體內分布的具有
熒光探針有毒嗎
有毒的。在紫外-可見-近紅外區有特征熒光,并且其熒光性質可隨所處環境的性質,如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。
熒光原位雜交探針和熒光探針有什么區別
熒光原位雜交探針和熒光探針有什么區別 熒光原位雜交技術問世于70年代后期,其曾多用于染色體異常的研究,近年來隨著FISH所應用的探針鐘類的不斷增多,特別是全Cosmid探針及染色體原位抑制雜交技術的出現,使FISH技術不僅在細胞遺傳學方面,而且還廣泛應用于腫瘤學研究,如基因診斷基因定位等 。原
大連化物所代謝酶特異性探針底物研發取得新進展
近日,中國科學院大連化學物理研究所藥用資源開發研究組楊凌研究團隊采用計算機輔助篩選及酶催化位點局部改造的策略成功設計研發了首個細胞色素P450 1A1亞酶的高特異性熒光探針底物,相關研究成果發表在《化學科學》(Chemical Science,DOI:10.1039/C6SC03970G)上。
熒光探針的相關介紹
在紫外-可見-近紅外區有特征熒光,并且其熒光性質(激發和發射波長、強度、壽命、偏振等)可隨所處環境的性質,如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。 與核酸(DNA或RNA)、蛋白質或其他大分子結構非共價相互作用而使一種或幾種熒光性質發生改變的小分子物質。可用于研究大分子物質的性
溶酶體熒光探針原理介紹
溶酶體熒光探針溶酶體為單層膜蛋白包圍的內含一系列酸性水解酶的小體。溶酶體中含有多種酶,如糖苷酶、酸性磷酸酶、彈性蛋白酶、組織蛋白酶等等,是物質代謝的場所。弱堿性胺選擇性聚集在胞內低pH值的小室中,可用于研究溶酶體的生物合成和發病機理。其中最常用的就是DAMP,它不發熒光,需要和抗DNP的抗體共同使用
熒光探針技術的概念
受到激發光激發后,從激發態單重態回到基態,在紫外-可見-近紅外區有特征發光,稱之為熒光。熒光性質(激發和發射波長、強度、壽命、偏振等)可隨所處環境的性質,如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子,被稱為熒光探針。熒光探針分類很多,可以根據材料屬性分為有機和無機探針,可以根據探針尺寸分為
搖核酸的熒光探針
DNA和RNA?搖核酸的熒光探針 用于共聚焦激光掃描顯微鏡的主要有Acridine Orange(吖啶橙,AO)、Propidium Iodide(碘化丙啶,PI)。兩種染料既可標記DNA又可標記RNA,如為獲得單獨的DNA或RNA分布,染色前可用RNA酶或DNA酶處理細胞。PI不能進入完整的細胞膜
熒光探針的功能介紹
在紫外-可見-近紅外區有特征熒光,并且其?熒光性質(激發和發射波長、?強度、壽命、?偏振等)可隨所處環境的性質,如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。
熒光探針的分類檢測
常用的熒光探針有熒光素類探針、無機離子熒光探針、熒光量子點、分子信標等。熒光探針除應用于核酸和蛋白質的定量分析外,在核酸染色、DNA電泳、核酸分子雜交、定量PCR技術以及DNA測序上都有著廣泛的應用。 檢測熒光探針的方法主要有單點測定和電荷耦合裝置(CCD)熒光成像(包括用于微區分析的激光共聚
大連化物所可逆檢測過氧化亞硝酰分子熒光探針研究獲進展
可逆檢測過氧化亞硝酰分子熒光探針研究取得新進展 近日,中科院大連化學物理研究所1101組韓克利研究員在可逆檢測過氧化亞硝酰分子熒光探針的研究中取得新進展,相關結果以通訊的形式發表在最近一期的J. Am. Chem. Soc.上 (2011, 133 (29), pp 11030–1
蛋白質的內源熒光與熒光探針
利用熒光光譜法研究蛋白質一般有兩種方法。一是測定蛋白質分子的自身熒光(內源熒光),另一種是當蛋白質本身不能發射熒光時,通過非共價吸附或共價作用向蛋白質分子的特殊部位引入外源熒光(也稱熒光探針),然后測定外源熒光物質的熒光。 ?蛋白質的內源熒光 含有芳香族氨基酸(色氨酸(tryptophan?,Trp
生物芯片技術熒光探針
目前用熒光探針作為檢測信號的儀器,主要是考慮熒光標記所要檢測的DNA的效率,以及熒光探針本身的發光效率和光譜特性。PCR過程中的DNA標記1.末端標記:在引物上標記有熒光探針,在DNA擴增過程時,使新形成的DNA鏈末端帶有熒光探針。2 .隨機插入:選擇四種緘機基,使其中一種或幾種掛有熒光探針,在PC
共聚焦熒光探針的選擇
共聚焦熒光探針的選擇共聚焦激光掃描顯微鏡是20世紀80年代來發展起來的一種新型高精度顯微鏡系統,輔以各類熒光探針或熒光染料與被測物質特異性結合,不僅可觀察固定的細胞、組織切片,還可對活細胞的結構、分子、離子進行實時動態地觀察和檢測。熒光探針的發展非常迅速,目前僅美國Molecular Probes公
pcr熒光探針法是什么
pcr熒光探針法是是SYBRGreen摻入到雙鏈DNA中的量。SYBRGreen摻入到雙鏈DNA中后會發出熒光。但是只要是雙鏈,它都摻。而探針法是當探針結合到目標序列上以后,聚合酶降解探針后,探針上自帶的熒光基團離開淬滅基團,從而發出熒光。
pcr熒光探針法是什么
實時定量聚合酶鏈反應 (Quantitative Real-time PCR,qPCR) 是一種分子生物學技術,用于放大和同時檢測或量化靶向 DNA 分子。程序遵循 PCR 的一般原則。在 PCR 反應過程中,隨著循環次數的增加,PCR 產物的積累導致熒光信號的增強。因此,通過監測熒光強度,在"實時
研究發展RNA“緩沖熒光探針”
近日,中國科學院大連化學物理研究所副研究員喬慶龍和徐兆超研究員團隊發展了能夠與RNA特異性可逆結合,在活細胞內對細胞核核仁穩定成像的“緩沖熒光探針”Nu-AN,實現了對核仁動態輪廓的成像,并通過活細胞內藥物誘導下核仁特定形態的可視化,為核仁應激試劑的篩選提供可視化的工具。相關成果發表在《先進科學》。
研究發展RNA“緩沖熒光探針”
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納米熒光探針摧滅原理
通過一間隔基S(space)和熒光團F(fluorophore)相連而構建。其中熒光團部分是光能吸收和熒光發射的場所,識別基團部分則用于結合客體,這兩部分被間隔基隔開,又靠間隔基相連而成一個分子,構成了一個在選擇性識別客體的同時又給出光信號變化的超分子體系。PET熒光探針中,熒光團與識別基團之間
共聚焦熒光探針標記方法
(一)BCECF測定pH值 1. 儲存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分裝后,-20℃避光保存。 2. 染色步驟 將培養細胞用PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。加入BCECF-AM(終濃度1~5μmol/L),37℃孵育30~60min。PBS(含Ca2+、M
熒光探針的分類及應用
受到激發光激發后,從激發態單重態回到基態,在紫外-可見-近紅外區有特征發光,稱之為熒光。熒光性質(激發和發射波長、強度、壽命、偏振等)可隨所處環境的性質,如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子,被稱為熒光探針。熒光探針分類很多,可以根據材料屬性分為有機和無機探針,可以根據探針尺寸分為
中科院大連化物所等研制出高選擇熒光探針
中科院大連化物所楊凌團隊與大連理工大學精細化工重點實驗室崔京南團隊合作,在藥物代謝領域取得新突破,研制出人源性細胞色素P450 1A酶的高選擇熒光探針。相關研究近日發表于《美國化學會志》。 細胞色素P450 1A(CYP1A)是人體重要的藥物I相代謝酶,參與多種臨床藥物、環境污染物及致癌物(如
雙重熒光定量PCR探針熒光基團該怎么選擇
有干擾的話,在儀器上面就可以看出來,比如說,FAM和VIC,FAM有信號,單獨看VIC也肯定有信號,只是低點而已
熒光探針和熒光染料對于PCR技術的區別
1. TaqMan熒光探針:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅
實時熒光定量-PCR-所用熒光探針及功能介紹
應用于實時定量 PCR 檢測體系中的熒光探針主要有兩種:一種是 TaqMan 探針,一種是分子信標探針。Tyagi 和 Krammer(1996)首次建立了分子信標探針,在同一寡核苷酸探針的5'端標記熒光素、3'端標記淬滅劑(DABCYL)分子信標探針能形成發夾結構,探針的嚕撲環(L
探針法熒光定量pcr-熒光值要達到多少
定量PCR有絕對定量跟相對定量,絕對定量就是先用已知濃度的質粒濃度梯度(1.00E+07、1.00E+06、1.00E+05、1.00E+04、1.00E+03)制作標準曲線,然后通過做Real-timePCR的CT值計算出其表達量;相對定量是比較管家基因(GAPDH)與目的基因的CT值,得出各標本
熒光探針的化學性質
熒光定量PCR所使用的熒光化學制劑可分為兩種:熒光探針和熒光染料。PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切