大化所代謝酶特異性探針底物研發取得新進展
近日,我所藥用資源開發研究組(1806組)楊凌研究團隊采用計算機輔助篩選及酶催化位點局部改造的策略成功設計研發了首個細胞色素P450 1A1亞酶的高特異性熒光探針底物,相關研究成果發表在Chemical Science上(DOI:10.1039/C6SC03970G)。 酶是生物體內分布的具有催化活性的一類蛋白質。人體內分布了數千種代謝酶,其可催化6000余種生化反應并在內源性代謝和外源物代謝處置中發揮著至關重要的作用。長期以來,設計開發亞型特異性的探針底物一直是生物醫藥領域的一大挑戰。該研究中,研發人員以細胞色素P450 1A(CYP1A)家族為研究對象,基于CYP1A1與CYP1A2在催化活性空腔上的微小差別,采用酶催化位點局部改造的策略,并借助計算機輔助篩選及代謝表型篩選設計合成了首個CYP1A1亞型選擇性的熒光探針底物。該探針對目標酶具有極高的特異性,不僅可實現CYP1A1與CYP1A2等相似亞型酶間的區分,同時其......閱讀全文
Chemical-Science:-酶特異性探針底物研發新策略
近日,中科院大連化學物理研究所楊凌團隊探索出酶特異性探針底物的研發新策略,該團隊采用計算機輔助篩選及酶催化位點局部改造的策略成功設計研發了首個細胞色素P450 1A1亞酶的高特異性熒光探針底物。相關研究成果以“A practical strategy to design and develop
中國學者J-Med-Chem發文:-膽紅素代謝酶特異性熒光探針底物
近日,上海中醫藥大學交叉科學研究院葛廣波、楊凌團隊研發了一種全新的膽紅素代謝酶(UGT1A1,又稱尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉移酶1A1)特異性熒光探針底物,并將其用于人肝細胞/組織制備物中UGT1A1的活性檢測以及UGT1A1抑制劑和誘導劑的高通量篩選等研究,相關工作在線發表在美國化學會著名學術刊物
大連化物所代謝酶特異性探針底物研發取得新進展
近日,中國科學院大連化學物理研究所藥用資源開發研究組楊凌研究團隊采用計算機輔助篩選及酶催化位點局部改造的策略成功設計研發了首個細胞色素P450 1A1亞酶的高特異性熒光探針底物,相關研究成果發表在《化學科學》(Chemical Science,DOI:10.1039/C6SC03970G)上。
大化所代謝酶特異性探針底物研發取得新進展
近日,我所藥用資源開發研究組(1806組)楊凌研究團隊采用計算機輔助篩選及酶催化位點局部改造的策略成功設計研發了首個細胞色素P450 1A1亞酶的高特異性熒光探針底物,相關研究成果發表在Chemical Science上(DOI:10.1039/C6SC03970G)。 酶是生物體內分布的具有
如何設計特異性熒光原位雜交探針
1.探針分為好多種,你要先決定你用何種,是RNA探針還是DNA探針,雜交時,RNA-RNA結合的穩定性要比DNA-RNA好,所以RNA探針具有結合牢固、背景低等優點;DNA探針背景稍微深一些,不過也可以,標記方法比前者簡單一些,另外還有寡核苷酸探針,此類探針分子量小,通透性好,但就是標記的敏感性
熒光底物有哪些
(一)熒光色素 許多物質都可產生熒光現象,但并非都可用作熒光色素.只有那些能產生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染料.常用的熒光色素有: 異硫氰酸熒光素2.四乙基羅丹明 3.四甲基異硫氰酸羅丹明4.藻紅蛋白(二)其他熒光物質 1.酶作用后產生熒光的物質:某
靶向CEACAM5的NIRII熒光探針實現結直腸癌高特異性識別
結直腸癌是全球發病率和死亡率都位居前列的惡性腫瘤,手術是結直腸癌治療的主要方式,完全切除腫瘤 (R0) 與更好的總生存期和更低的復發率相關。然而,進展期結直腸癌具有較高的不完全切除率,缺乏實時的術中影像技術來輔助外科醫生區分惡性和良性組織,R0 切除在許多患者中仍然具有挑戰性。近紅外二區(nea
鈣離子熒光探針:比值型熒光探針
前面我們介紹了熒光指示劑法可以將Ca2+檢測的實驗與其他技術結合使用,如可以與流式細胞儀、熒光分光光度計、或者熒光顯微鏡進行聯合檢測 。紫外光型主要包括Quin-2、Indo-1、Fura-2等,數量較少,可見光型數目較多,包括Fluo-3、鈣黃綠素、Rhod-2等。熒光指示劑根據測光原理和數據
線粒體定位型高選擇性ATP熒光探針的構建
ATP(三磷酸腺苷)是生物體內不可缺少的生物大分子,在細胞呼吸、酶催化、能量和信號傳遞過程中起到關鍵的作用。線粒體是產生ATP的主要場所,ATP的含量變化必然會對線粒體的功能產生不可逆的影響。科學研究表明,線粒體的功能紊亂與心血管疾病、惡性腫瘤以及帕金森氏癥等疾病密切相關。因此,發展一種可靠并能
消化道脂肪酶底物特異性
Ewa RogalskaS等(1990)研究了豬胰脂肪脂肪酶、兔胃脂肪酶和人胃脂肪酶對化學結構類似、但在同一甘油三酯分子中立體結構不同的酯鍵的立體選擇性,結果表明兩種胃脂肪酶對sn-3位具有立體選擇性。如果由對映體過量百分率表示的話,人和兔胃脂肪酶對三辛酸甘油酯和三油精分別是54%、70%和74%、
廣州大學研究發現一種新型甲醛特異性熒光探針
近日,廣州大學大灣區環境研究院王平山教授團隊的謝廷正教授在超分子材料領域取得進展,發現一種可循環利用的新型特異性識別甲醛的超分子熒光探針。該研究提供了一種對甲醛進行有效視覺檢測和可逆吸收的新方法,可應用于環境監測領域。相關研究發表于Inorganic Chemistry。 甲醛是一種典型的揮發性
使用熒光底物的直接-ELISA-實驗
實驗概要使用熒光偶聯一抗的直接 ELISA 測定的程序。實驗步驟第 1 天:1.?在濾過的 PBS 中稀釋包被抗體后,在每孔中加入 100 μl 進行包被。用封板膜覆蓋酶標板,將酶標板在 4℃下孵育過夜。 第 2 天:2.?將 4 g Block ACE 粉末稀釋于 100 ml 去離子水中,使用其
中科院大連化物所等研制出高選擇熒光探針
中科院大連化物所楊凌團隊與大連理工大學精細化工重點實驗室崔京南團隊合作,在藥物代謝領域取得新突破,研制出人源性細胞色素P450 1A酶的高選擇熒光探針。相關研究近日發表于《美國化學會志》。 細胞色素P450 1A(CYP1A)是人體重要的藥物I相代謝酶,參與多種臨床藥物、環境污染物及致癌物(如
熒光探針有毒嗎
有毒的。在紫外-可見-近紅外區有特征熒光,并且其熒光性質可隨所處環境的性質,如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。
房建國團隊開發硫氧還蛋白還原酶的快速特異性熒光探針
開發高效可靠的工具對于探索基本的生物過程至關重要,這是一項長期的挑戰。一種特別有用的工具是小分子熒光探針,這使人們越來越關注設計和開發用于生物大分子,無機離子,生物小分子和各種反應性信號物種的各種化學探針。一般而言,探針的質量對于探究復雜的生物系統以及從實驗觀察中得出令人信服的結論至關重要,因為
特異性檢測溶酶體亞硫酸氫鹽新武器:新款智能熒光探針
文章提出了一種新的基于邏輯與的熒光探針(NY-Lyso),它由嗎啉基、半花菁苷和1,8-萘二甲酰亞胺顯色團組成,用于特異性檢測溶酶體中的亞硫酸氫鹽。該智能探針由兩個功能部件組成:NY-Lyso探針上的嗎啉基對細胞內溶酶體(pH 4.5-5.5)和其他細胞器之間的pH差異產生敏感反應,噻吩和花菁之
熒光原位雜交探針和熒光探針有什么區別
熒光原位雜交探針和熒光探針有什么區別 熒光原位雜交技術問世于70年代后期,其曾多用于染色體異常的研究,近年來隨著FISH所應用的探針鐘類的不斷增多,特別是全Cosmid探針及染色體原位抑制雜交技術的出現,使FISH技術不僅在細胞遺傳學方面,而且還廣泛應用于腫瘤學研究,如基因診斷基因定位等 。原
熒光探針的相關介紹
在紫外-可見-近紅外區有特征熒光,并且其熒光性質(激發和發射波長、強度、壽命、偏振等)可隨所處環境的性質,如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。 與核酸(DNA或RNA)、蛋白質或其他大分子結構非共價相互作用而使一種或幾種熒光性質發生改變的小分子物質。可用于研究大分子物質的性
搖核酸的熒光探針
DNA和RNA?搖核酸的熒光探針 用于共聚焦激光掃描顯微鏡的主要有Acridine Orange(吖啶橙,AO)、Propidium Iodide(碘化丙啶,PI)。兩種染料既可標記DNA又可標記RNA,如為獲得單獨的DNA或RNA分布,染色前可用RNA酶或DNA酶處理細胞。PI不能進入完整的細胞膜
熒光探針的功能介紹
在紫外-可見-近紅外區有特征熒光,并且其?熒光性質(激發和發射波長、?強度、壽命、?偏振等)可隨所處環境的性質,如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。
熒光探針的分類檢測
常用的熒光探針有熒光素類探針、無機離子熒光探針、熒光量子點、分子信標等。熒光探針除應用于核酸和蛋白質的定量分析外,在核酸染色、DNA電泳、核酸分子雜交、定量PCR技術以及DNA測序上都有著廣泛的應用。 檢測熒光探針的方法主要有單點測定和電荷耦合裝置(CCD)熒光成像(包括用于微區分析的激光共聚
熒光探針技術的概念
受到激發光激發后,從激發態單重態回到基態,在紫外-可見-近紅外區有特征發光,稱之為熒光。熒光性質(激發和發射波長、強度、壽命、偏振等)可隨所處環境的性質,如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子,被稱為熒光探針。熒光探針分類很多,可以根據材料屬性分為有機和無機探針,可以根據探針尺寸分為
溶酶體熒光探針原理介紹
溶酶體熒光探針溶酶體為單層膜蛋白包圍的內含一系列酸性水解酶的小體。溶酶體中含有多種酶,如糖苷酶、酸性磷酸酶、彈性蛋白酶、組織蛋白酶等等,是物質代謝的場所。弱堿性胺選擇性聚集在胞內低pH值的小室中,可用于研究溶酶體的生物合成和發病機理。其中最常用的就是DAMP,它不發熒光,需要和抗DNP的抗體共同使用
使用熒光底物的直接-ELISA-實驗方案
實驗概要使用熒光偶聯一抗的直接 ELISA 測定的程序。實驗步驟第 1 天:1.?在濾過的 PBS 中稀釋包被抗體后,在每孔中加入 100 μl 進行包被。用封板膜覆蓋酶標板,將酶標板在 4℃下孵育過夜。 第 2 天:2.?將 4 g Block ACE 粉末稀釋于 100 ml 去離子水中,使用其
關于角蛋白酶的底物特異性作用介紹
角蛋白酶作用的底物除了角蛋白外,它還可水解多種蛋白質底物,包括可溶和不可溶的蛋白質。角蛋白酶可以降解如酪蛋白、明膠、牛血清白蛋白等可溶的蛋白質。也可以降解包括羽毛、羊毛、角質、人發、指甲等不可溶的蛋白質。個別角蛋白酶的底物范圍很窄,例如雞毛癬菌角蛋白酶只能降解鳥類羽毛,較難降解其它種類的角蛋白。
蛋白質的內源熒光與熒光探針
利用熒光光譜法研究蛋白質一般有兩種方法。一是測定蛋白質分子的自身熒光(內源熒光),另一種是當蛋白質本身不能發射熒光時,通過非共價吸附或共價作用向蛋白質分子的特殊部位引入外源熒光(也稱熒光探針),然后測定外源熒光物質的熒光。 ?蛋白質的內源熒光 含有芳香族氨基酸(色氨酸(tryptophan?,Trp
我國科研人員開發出新型高靈敏鈣信號熒光蛋白探針
近日,北京師范大學認知神經科學與學習國家重點實驗室教授章曉輝團隊、北師大生命科學學院教授王友軍團隊與中國科學技大學教授唐愛輝團隊合作開發構建了一類新型的檢測鈣信號的熒光蛋白探針“尼莫”(NEMO),該探針具有更強和更精準的定量測定性能。近日,該成果在線發表于期刊《自然-方法》。生命體的許多活動都離不
pcr熒光探針法是什么
實時定量聚合酶鏈反應 (Quantitative Real-time PCR,qPCR) 是一種分子生物學技術,用于放大和同時檢測或量化靶向 DNA 分子。程序遵循 PCR 的一般原則。在 PCR 反應過程中,隨著循環次數的增加,PCR 產物的積累導致熒光信號的增強。因此,通過監測熒光強度,在"實時
pcr熒光探針法是什么
pcr熒光探針法是是SYBRGreen摻入到雙鏈DNA中的量。SYBRGreen摻入到雙鏈DNA中后會發出熒光。但是只要是雙鏈,它都摻。而探針法是當探針結合到目標序列上以后,聚合酶降解探針后,探針上自帶的熒光基團離開淬滅基團,從而發出熒光。
檢測酶活性的熒光探針
檢測酶活性的熒光探針?共聚焦激光掃描顯微鏡除了具備熒光顯微鏡檢測熒光酶細胞化學的作用以外,在檢測活細胞酶活性動態變化方面有著無可比擬的優勢。通過對細胞施予不同的處理因素可檢測細胞內相應的酶被激活或滅活的動態變化過程。有的酶熒光探針是自身就可發出熒光、有的是與酶結合后發出熒光、有的則是被酶分解后發出熒