大腸桿菌亮氨酰tRNA合成酶E292對于氨基酰化活性的作用
實驗概要本研究通過基因點突變的方法，將大腸桿菌LeuRS的E292用不同性質的6種氨基酸替換，這些氨基酸包括K(帶正電荷的氨基酸)，F(芳香族氨基酸)，S(親水性小分子氨基酸)，D(比E少一個亞甲基一CHZ一的氨基酸)，Q(去除谷氨酸的負電荷)，A(不帶電荷的氨基酸)，得到了該位置點突變的LeuRS變種，研究了純化后的這些LeuRS變種酶光譜學性質和酶學動力學性質，發現該部位與ATP的結合密切相關，揭示了E292對LeuRS氨基酞化功能的貢獻。主要試劑L-Leucine，ATP，DTT，焦磷酸鈉(tetrasodium pyrophosphate)和HA-Ultrogel購自美國Sigma公司。[32p]-焦磷酸鈉購自美國杜邦公司。L-[I4C]-亮氨酸和DEAE-SepharoseTM Fast Flow購自英國Amersham公司。限制性內切酶和T4DNA連接酶購自立陶宛MBI Ferments公司。實驗材料質粒pTrc-9......閱讀全文
氨酰tRNA
中文名稱氨酰tRNA英文名稱aminoacyl tRNA定 義轉移核糖核酸的3′端通過酯鍵與氨基酸連接生成，進入核糖體的A位參與蛋白質生物合成。由氨酰tRNA合成酶催化tRNA與活化氨基酸(即氨酰AMP)反應得到。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）
甲硫氨酸tRNA
中文名稱甲硫氨酸tRNA英文名稱methionine tRNA定 義真核生物的一種起始tRNA，攜帶甲硫氨酸進入核糖體，進入新生肽鏈的N端。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）
tRNA的結構
1.tRNA結構保守：70-80個堿基。2.二級結構：三葉草。3.五個主要臂：(1)接受臂：攜帶氨基酸；(2)TΨC臂；(3)反密碼子臂；(4)雙氫尿嘧啶臂（DHU）；(5)附加臂：大小反映了整個tRNA分子的大小，根據其大小，tRNA分為兩類：第Ⅰ類tRNA，3/4 tRNA只有3-5個堿基的附加
tRNA的功能特點
作為“搬運工具”的tRNA有很多種，體內20種氨基酸都有其自已特有的tRNA，所以，tRNA的種類不少于20種。tRNA在ATP供應能量和酶的作用下，可分別與特定的氨基酸結合。每個tRNA都有一個由三個核苷酸編成的“反密碼”。這個反密碼可以根據堿基配對的原則與mRNA上對應的密碼配對，而且只有當反密
tRNA測序，約嗎？
高通量RNA測序（RNA-seq）技術的使用讓我們認識了細胞中無比精彩的RNA世界。然而，目前的方法無法檢測高度修飾或大量折疊的RNA，如tRNA。近日，《Nature Methods》上的兩種方法通過在文庫制備前去除tRNA的修飾，解決了tRNA測序的技術難題。 盡管tRNA被認為是看家RN
tRNA的功能介紹
作為“搬運工具”的tRNA有很多種，體內20種氨基酸都有其自已特有的tRNA，所以，tRNA的種類不少于20種。tRNA在ATP供應能量和酶的作用下，可分別與特定的氨基酸結合。每個tRNA都有一個由三個核苷酸編成的“反密碼”。這個反密碼可以根據堿基配對的原則與mRNA上對應的密碼配對，而且只有當反密
tRNA的結構特征
tRNA的結構特征之一是含有較多的修飾成分，如上面提到的 D、T、 Ψ等；核酸中大部分修飾成分是在tRNA中發現的。修飾成分在tRNA分子中的分布是有規律的，但其功能不清楚。1974年用X射線晶體衍射法測出第一個tRNA——酵母苯丙氨酸tRNA晶體的三維結構，分子全貌象倒寫的英文字母L，呈扁平狀，長
tRNA的結構介紹
1.tRNA結構保守：70-80個堿基。2.二級結構：三葉草。3.五個主要臂：(1)接受臂：攜帶氨基酸；(2)TΨC臂；(3)反密碼子臂；(4)雙氫尿嘧啶臂（DHU）；(5)附加臂：大小反映了整個tRNA分子的大小，根據其大小，tRNA分為兩類：第Ⅰ類tRNA，3/4 tRNA只有3-5個堿基的附加
tRNA轉錄加工過程
主要加工方式是切斷和堿基修飾。真核生物tRNA前體一般無生物學特性，需要進行加工修飾。加工過程包括：（1）剪切和拼接tRNA前體在tRNA剪切酶作用下，切成一定大小的分子。大腸桿菌RnaseP特異切割tRNA前體5′旁側序列，3′－核酸內切酶如RnaseF可將tRNA前體3′端一段序列切下來。Rna
tRNA的結構基礎
tRNA的二級結構如圖1所示，其在原核生物和真核生物均相對保守。主要結構有D-loop（D環）、T（C）-loop（T環）、Anticodon-loop（反密碼子環）、Accepter Arm（受體臂）、3'端CCA保守序列、Discriminator（識別堿基）、Variable-loop
關聯tRNA的結構特點
中文名稱關聯tRNA英文名稱cognate tRNA定 義由同一特異氨酰tRNA合成酶識別的所有tRNA。應用學科遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
tRNA相關研究背景介紹
A. 概述 轉運RNA（Transfer Ribonucleic Acid，tRNA）是生物體內含量最為豐富的短鏈非編碼RNA分子。它攜帶并轉運氨基酸，參與蛋白翻譯，是連接mRNA與蛋白質的重要橋梁。盡管tRNA廣泛存在于生物體內，但不同機體基因組對于特定密碼子的偏好性不同，從而導致tRN
苯酚法制備酵母tRNA
試劑、試劑盒 DEAE 纖維素 二乙醇胺 (TEA) 溶液 0.lmol LTEA 緩沖液 0.lmol L 氯化鈉含 0.lmoi. LTEA 緩沖液 12mol L 氯化鈉含 0.lmol LTEA 緩沖液 lmol L 氯化鈉含 0.lmol LTEA 緩沖液 乙醚 水飽和酚 乙醇儀器
tRNA相關研究背景介紹
A. 概述 轉運RNA（Transfer Ribonucleic Acid，tRNA）是生物體內含量最為豐富的短鏈非編碼RNA分子。它攜帶并轉運氨基酸，參與蛋白翻譯，是連接mRNA與蛋白質的重要橋梁。盡管tRNA廣泛存在于生物體內，但不同機體基因組對于特定密碼子的偏好性不同，從而導致tRN
關于tRNA的功能簡介
作為“搬運工具”的tRNA有很多種，體內20種氨基酸都有其自已特有的tRNA，所以，tRNA的種類不少于20種。tRNA在ATP供應能量和酶的作用下，可分別與特定的氨基酸結合。每個tRNA都有一個由三個核苷酸編成的“反密碼”。這個反密碼可以根據堿基配對的原則與mRNA上對應的密碼配對，而且只有當
細胞化學詞匯阻抑tRNA
中文名稱：阻抑tRNA英文名稱：suppressor tRNA定 義：能夠消除信使核糖核酸(mRNA)突變有害結果的突變轉移RNA(tRNA)。生物體內蛋白質基因或mRNA的突變往往產生有害的結果，但它可被同一基因的第二次突變或其他基因(包括tRNA基因)的突變所消除。應用學科：生物化學與分子生物
苯酚法制備酵母tRNA
通過 DEAE 纖維素柱純化，除去少量 DNA、大分子 RNA、蛋白質、多糖等雜質，最后得到各種氨基酸專一性 tRNA 的混合物.試劑、試劑盒DEAE 纖維素二乙醇胺 (TEA) 溶液0.lmol LTEA 緩沖液0.lmol L 氯化鈉含 0.lmoi. LTEA 緩沖液12mol L 氯化鈉含
同工tRNA的結構特點
同工tRNA（cognate tRNA）：指幾個代表相同氨基酸、能夠被一個特殊的氨酰-tRNA合成酶識別的tRNA。
tRNA相關研究背景介紹
A.?概述轉運RNA（Transfer Ribonucleic Acid，tRNA）是生物體內含量最為豐富的短鏈非編碼RNA分子。它攜帶并轉運氨基酸，參與蛋白翻譯，是連接mRNA與蛋白質的重要橋梁。盡管tRNA廣泛存在于生物體內，但不同機體基因組對于特定密碼子的偏好性不同，從而導致tRNA譜的差
tRNA相關研究背景介紹
A. 概述 轉運RNA（Transfer Ribonucleic Acid，tRNA）是生物體內含量最為豐富的短鏈非編碼RNA分子。它攜帶并轉運氨基酸，參與蛋白翻譯，是連接mRNA與蛋白質的重要橋梁。盡管tRNA廣泛存在于生物體內，但不同機體基因組對于特定密碼子的偏好性不同，從而導致tRN
阻抑tRNA的結構特點
中文名稱阻抑tRNA英文名稱suppressor tRNA定 義能夠消除信使核糖核酸(mRNA)突變有害結果的突變轉移RNA(tRNA)。生物體內蛋白質基因或mRNA的突變往往產生有害的結果，但它可被同一基因的第二次突變或其他基因(包括tRNA基因)的突變所消除。應用學科生物化學與分子生物學（一級
細胞化學詞匯起始tRNA
起始tRNA initiation tRNA是指能特異性地認別mRNA上的起始密碼子，是使蛋白質合成開始的tRNA。在細胞中有兩種甲硫氨酸tRNA分子，其中的一種就起這種作用。在大腸桿菌中，已接受甲硫氨酸的tRNAfMet在被甲酰化之后，以其30S核糖體亞基與mRNA共同結合，使蛋白質合成開始。即使
苯酚法制備酵母tRNA
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 DEAE 纖維素 ? 二乙醇胺 (TEA) 溶液 0.lmol LTEA 緩沖液 ?0.lmol L 氯化鈉含 0.lmoi. LTEA 緩沖液
細胞化學詞匯關聯tRNA
中文名稱：關聯tRNA英文名稱：cognate tRNA定 義：由同一特異氨酰tRNA合成酶識別的所有tRNA。應用學科：遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
研究揭示人線粒體丙氨酰tRNA合成酶識別tRNA獨特機制
2月15日，國際學術期刊《核酸研究》（Nucleic Acids Research）發表了中國科學院生物化學與細胞生物學研究所王恩多研究組最新研究成果“The G3-U70-independent tRNA recognition by human mitochondrial alanyl-tR
阻抑tRNA的基本信息
中文名稱阻抑tRNA英文名稱suppressor tRNA定 義能夠消除信使核糖核酸(mRNA)突變有害結果的突變轉移RNA(tRNA)。生物體內蛋白質基因或mRNA的突變往往產生有害的結果，但它可被同一基因的第二次突變或其他基因(包括tRNA基因)的突變所消除。應用學科生物化學與分子生物學（一級
關聯tRNA的基本信息
中文名稱關聯tRNA英文名稱cognate tRNA定 義由同一特異氨酰tRNA合成酶識別的所有tRNA。應用學科遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
細胞化學詞匯tRNA前體
中文名稱：tRNA前體英文名稱：tRNA precursor定 義：轉移核糖核酸(tRNA)基因轉錄的初始產物，需經過多步加工才能產生成熟的、有功能的tRNA分子。應用學科：生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）
脫酰tRNA的結構特點
中文名稱脫酰tRNA英文名稱deacylated tRNA定 義脫去酰基(氨酰基或肽酰基)的轉移核糖核酸(tRNA)。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）
細胞化學詞匯脫酰tRNA
中文名稱：脫酰tRNA英文名稱：cognate tRNA定 義：同工tRNA，指幾個代表相同氨基酸、能夠被一個特殊的氨酰-tRNA合成酶識別的tRNA。應用學科：生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）