基因技術專題2
RNAi技術RNA干擾(RNA interference， RNAi)是近年來發現的研究生物體基因表達、調控與功能的一項嶄新技術，它利用了由小干擾RNA(small interfering RNA， siRNA)引起的生物細胞內同源基因的特異性沉默(silencing)現象，其本質是siRNA與對應的mRNA特異結合、降解，從而阻止mRNA的翻譯。RNAi是生物進化的結果，是生物體對病毒基因等外源核酸侵入的一種保護性反應。它普遍存在于各種生物，具有抗病毒、穩定轉座子及監控異常表達ｍRNA的生物學功能。RNA干擾現象不僅能提供一種經濟、快捷、高效的抑制基因表達的技術手段，而且有可能在基因功能測定，基因治療等方面開辟一條新思路。1 RNAi的歷史背景20世紀20年代，人們發現，植物受到野生型病毒感染后，能產生對另一種親緣關系相近的病毒的抵抗力。而真正發現雙鏈RNA(dsRNA)能引起基因沉默現象，則在1995年。當時，Guo和Kem......閱讀全文
基因技術專題2
RNAi技術RNA干擾(RNA interference， RNAi)是近年來發現的研究生物體基因表達、調控與功能的一項嶄新技術，它利用了由小干擾RNA(small interfering RNA， siRNA)引起的生物細胞內同源基因的特異性沉默(silencing)現象，其本質是siRNA與對應
基因技術專題1
專題一：RNA干擾技術（RNAi）1995年，康奈爾大學的Su Guo博士用反義RNA阻斷線蟲基因表達的試驗中發現，反義和正義RNA都阻斷了基因的表達，他們對這個結果百思不得其解。直到1998年， Andrew Fire的研究證明，在正義RNA也阻斷了基因表達的試驗中，真正起作用的是雙鏈RNA。這些
前沿顯微成像技術專題——超分辨顯微成像（2）
上一期我們為大家介紹了幾種主要的單分子定位超分辨顯微成像技術，還留下了一些問題，比如它的分辨率是由什么決定的？獲得的大量圖像數據如何進行重構？本期我們就來為大家解答這些問題。單分子定位超分辨顯微成像的分辨率單分子定位超分辨顯微成像的分辨率主要由兩個因素決定：定位精度和分子密度。定位精度是目標分子在橫
前沿顯微成像技術專題－——－轉盤式共聚焦顯微鏡（2）
上一篇文章介紹了轉盤式共聚焦顯微鏡的基本原理和技術特點，本篇主要介紹一些不同的轉盤共聚焦系統。常見轉盤共聚焦系統目前市場上最常見的是由日本Yokogawa（橫河電機）公司生產的?CSU系列轉盤系統，主流轉盤共聚焦顯微鏡多使用的是這一系列。正如在前文中提到的，它由兩個同軸排列的針孔圓盤組成，中間裝有一
細胞技術專題：細胞傳代實驗
根據細胞生長的恃點，傳代方法有3種：懸浮生長細胞傳代、半懸浮生長細胞傳代（Hela細胞）、貼壁生長細胞傳代。實驗方法細胞培養技術 消化法 實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代；部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代；懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代
基因克隆技術（Gene－Cloning－Techniques）2
二、目的基因和載體的連接獲得目的基因后必須將其放在一定的載體內才能在宿主細胞內擴增或表達。目的基因與載體的連接及其后續的轉化過程習慣上稱為克隆（cloning）。由于目前很多基因都是利用PCR技術獲得，因此這里先介紹PCR產物的克隆策略，然后再介紹其他的克隆方式。（一）PCR產物的克隆策略獲得PCR
基因克隆技術（Gene－Cloning－Techniques）2
二、目的基因和載體的連接 獲得目的基因后必須將其放在一定的載體內才能在宿主細胞內擴增或表達。目的基因與載體的連接及其后續的轉化過程習慣上稱為克隆（cloning）。由于目前很多基因都是利用PCR技術獲得，因此這里先介紹PCR產物的克隆策略，然后再介紹其他的克隆方式。 （一
基因表達輪廓（gene－expressed－profile）技術2
經過這輪ＲＤＡ過程,Tester中的目的DNA將得到第一次富集。將第一輪產物更換新接頭,進行第二輪RDA過程,目的DNA可得到進一步的富集。該技術假陽性很低。但仍不能解決個體mRNA在豐度上存在巨大差異的問題,當靶序列濃度較低時,其富集受抑制。3：抑制消減雜交（suppression subtrac
材料檢測技術專題論壇－關注前沿新技術
第十三屆中國國際科學儀器及實驗室裝備展覽會（CISILE）于4月23日至25日在北京國家會議中心召開。本屆CISILE展會 秉承一貫的優良傳統，除了大規模展商展出之外，展覽會同期還舉辦了科學儀器及實驗室技術高峰論壇。 4月24日，在材料檢測技術專題論 壇上，各位報告人為
細胞技術專題：細胞生長曲線實驗
細胞生長曲線是測定細胞絕對生長數的常用方法，是判定細胞活力的重要指標。一般細胞傳代之后，經過短暫的懸浮然后貼壁，隨后度過長短不同的潛伏期，即進入大量分裂的指數生長期。為了準確描述整個過程中細胞數目的動態變化，典型的生長曲線可分為生長緩慢的潛伏期，斜率較大的指數生長期，呈平臺狀的平頂期及退化衰亡4個部
Science專題：癌癥基因組學
在2001年完成人類基因組測序后，許多的研究人員立即將目光放到了利用這些信息來更好地了解遺傳學上。最近，越來越多的研究確定了表觀遺傳學在癌癥的發生、形成及發展過程中起效應。從鑒別與遺傳性癌癥相關的單基因變異的前基因組時代轉向，測序技術的進步使得研究人員能夠利用全基因組方法來檢測基因組間的差異，以
Science專題：大腦的基因表達，發育與疾病
生命是個神秘的個體，它由無法計量的細胞組成。生物學家的工作在于袪魅，發現無知，再解決無知。腦部的神經分布最密集，因此與之有關的疾病更是難以解決的問題。 12月14日的Science公布了PsychENCODE項目的最新成果，闡釋有神經精神疾病罹患風險的腦部構造。 神經精神疾病有著十分復雜的
細胞技術專題：動物細胞融合
細胞融合是指兩個或兩個以上的細胞合并成為一個細胞的過程。在自然情況下，體內和體外培養的細胞均能發生自發融合現象。人工方法誘導細胞融合開始于50 年，現在這項技術已成為研究細胞遺傳、細胞免疫，腫瘤及細胞工程的重要手段。在誘導物（如仙臺病毒，聚乙二醇）作用下，相互融合的細胞發生凝集，隨后在質膜接
生物育種前沿共性技術專題論壇舉辦
近日，由中國農學會承辦的第二十七屆中國科協年會“生物育種前沿共性技術”專題論壇在北京舉辦，來自國內高校、科研院所、科技型企業等單位的近70位相關專家學者和青年科研人員參加會議。中國科學院遺傳與發育生物學研究所研究員高彩霞，中國農業科學院作物科學研究所研究員李英慧，中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所研究
免疫學技術專題：非標記抗體免疫電鏡技術
一、原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織中的
基因檢測的藍海，液體活檢迅速崛起——基因測序行業專題
液體活檢臨床意義大，市場空間廣闊 檢測血液中的CTC和ctDNA對患者腫瘤進行診斷與監測的方法稱為液體活檢。該技術能夠解決臨床取樣的難點，滿足對患者高頻監測的需求，并具有相比于穿刺活檢成本低的優點。因此研發進展迅速。未來有望應用在腫瘤早期篩查、腫瘤患者動態監測、以及個性化用藥指導等領域，市場前
免疫學技術專題：組織病理實驗（一）
標簽： 組織病理組織學技術包括、組織學制片技術、胚胎學制片技術、組織化學技術、熒光組化及免疫組化技術、組織培養技術、各種特殊顯微技術、電鏡組織學技術。組織學技術不但應用于組織學本學科，并且廣泛應用于其他多學科，如生物學、解剖學、病理學、腫瘤學、法醫學、臨床診斷學等。實驗方法石蠟切片法冰凍切片實驗方法
細胞技術專題：腫瘤細胞原代培養實驗
腫瘤細胞原代培養可以：（1）研究癌變機理；（2）研究抗癌藥檢測；（3）研究癌分子生物學；（4）用于闡明和解決癌癥。詳細 實驗方法實驗方法原理腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基，10%血清濃度即可，在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添加物，或原患者血清
蛋白質技術專題：凝膠過濾層析實驗
凝膠過濾層析（gel filtration chromatography）法又稱排阻層析或分子篩方法，主要是根據蛋白質的大小和形狀，即蛋白質的質量進行分離和純化。層析柱中的填料是某些惰性的多孔網狀結構物質，多是交聯的聚糖類物質，使蛋白質混合物中的物質按分子大小的不同進行分離。實驗方法蛋白質的凝膠過濾
免疫學技術專題：組織病理實驗（二）
（7）切成的蠟帶到20~30 cm 長時，右手用另一支毛筆輕輕將蠟帶挑起，以免卷曲，并牽引成帶，平放在蠟帶盒上，靠刀面的一面較光滑，朝下，較皺的一面朝上。（8）用單面刀片切取蠟片一小段，放在載玻上加水一滴，置于放大鏡或顯微鏡下觀察切片是否良好。（9）切片工作結束后，應將切片刀取下用氯仿擦去刀上沾著的
電生理專題——膜片鉗技術的應用
膜片鉗技術發展至今，已經成為現代細胞電生理的常規方法，它不僅可以作為基礎生物醫學研究的工具，而且直接或間接為臨床醫學研究服務。 目前膜片鉗技術廣泛應用于神經（腦）科學、心血管科學、藥理學、細胞生物學、病理生理學、中醫藥學、植物細胞生理學、運動生理等多學科領域研究。 隨著全自動膜片鉗技術（Au
CBIFS－2017專題論壇：－農獸藥殘留檢測技術
2017年4月7日，由中國檢驗檢疫學會、太平洋國際展覽聯合舉辦的“CBIFS2017第十屆中國國際食品安全技術論壇”在杭州國際博覽中心召開。本屆會議邀請了食品行業內著名專家學者和儀器廠商，開展了80余場大會報告和專題報告，其中包括快速檢測、分析方法、食源性微生物、農獸藥殘留、真菌毒素、實驗室建設
植物基因組DNA及總RNA提取技術2
（二）植物總RNA提取?（1）65°C水浴中預熱15 mL CTAB提取液。?（2）液氮中研磨2～3 g新鮮或-70°C冷凍的材料。?（3）轉移樣品至有CTAB提取液的離心管中，立即激烈渦旋30s，短時放回 65°C水浴中（4～5 min）。?（4）加入等體積的氯仿/異戊醇并渦旋混合，10000 r
PCR基因擴增2
（4）引物的熔點溫度（Tm值）要適當。Tm值與引物的堿基組成和長度有關；PCR引物的GC/AT應與要擴增的模板DNA相當或略高些。一般熔點溫度以大于55℃為宜。（5）引物的3，末端必須與模板嚴格互補，而5，末端的要求可靈活些。（6）目前在引物選擇中已廣泛應用計算機軟件，從EMBL或Genebank中
《自然》發表國際腫瘤基因組計劃專題報道
????? 4月15日，國際權威科學期刊《自然》雜志將發表關于國際腫瘤基因組計劃的專題報道，介紹該計劃所取得的發展歷程、研究計劃以及研究成果等。? 全球聯手解讀“天書” “國際癌癥基因組聯合計劃，是繼國際人類基因組計劃后，人類基因研究的新里程碑。”浙江大學醫學院
生物中心赴深圳開展生物技術專題調研
2017年7月28-29日，生物中心黃晶主任帶隊赴深圳市開展生物技術專題調研工作。 生物中心黃晶主任一行先后到深圳市第三人民醫院、深圳市第二人民醫院、深圳大學和中國科學院深圳先進技術研究院等單位進行調研，與相關單位的一線科研人員進行了座談。黃主任肯定了各單位在生物技術及疾病防治科技工作中取
細胞技術專題：大鼠肝星狀細胞培養實驗
實驗方法細胞培養技術 實驗方法原理選用Wistar大鼠經消化酶灌注肝臟后,用分離液分離HSC，通過觀察其自發熒光及其顯著特征性結構的脂肪染色、細胞免疫化學染色等方法鑒定。 實驗材料雄性 SD 大鼠 試劑、試劑盒戊巴比妥鈉 小牛血清 DMEM 酶消化液I、Ⅱ Nycodenz D-Hanks’液 HB
細胞技術專題：小鼠腹腔巨噬細胞培養實驗
小鼠腹腔巨噬細胞培可以：（1）吞噬與清除異物；（2）分泌生物活性物質；（3）對仿生全降解材料，降解后的無機產物與生命過程中有機物的合成作用。實驗方法細胞培養技術實驗方法原理取小鼠腹腔巨噬細胞與乳膠顆粒在不同培養條件下混合后定量加入24孔板，37 ℃，5% CO2?培養箱中孵育后，熒光顯微鏡下計數吞噬
Nature：高分辨率熒光顯微技術專題
近二十年來，熒光顯微技術有了長足的進步，近日Nature，Science雜志就高分辨率熒光顯微技術分別發文，聚焦了這一領域的重要進展。 熒光顯微技術是一種分析分子生物學，細胞生物學的重要工具，這一方法能幫助科研人員了解細胞和活體生物的空間結構。通過一些熒光標記，比如GFP等，研究人員就能觀測到蛋白
前沿顯微成像技術專題——超分辨顯微成像（1）
從16世紀末開始，科學家們就一直使用光學顯微鏡探索復雜的微觀生物世界。然而，傳統的光學顯微由于光學衍射極限的限制，橫向分辨率止步于 200 nm左右，軸向分辨率止步于500 nm，無法對更小的生物分子和結構進行觀察。突破光學衍射極限，一直是科學家們夢想和追求的目標。雖然隨著掃描電鏡、掃描隧道顯微鏡及