常用的幾種分子標記
RAPD利用 10 個堿基的一個或幾個隨機引物非定點地擴增 DNA 片段,一般一個引物可擴增 6-12 條 DNA 片段,利用凝膠電泳分開擴增的片段,從而進行基因多態性研究。 RAPD 是一種能快速進行基因多態性研究的技術,并且由于不涉及印跡雜交、放射性自顯影等技術,因此簡便易行。 SSR 真核生物的基因組中散布著大量的串聯重復序列,其中, 2-4 個 bp 的微衛星序列 (Microsatellite 或叫簡單序列重復 SSR:Simple Sequence Repeats) 具有高度多態性。 微衛星在結構上的最大特點是兩端序列較保守, SSR 引物根據與微衛星重復序兩端的特定短序列設計,用來擴增重復序列本身,從而揭示微衛星的多態性。 SSR 是檢測多態性的一種有效方法。 微衛星( SSR )是廣泛分布于真核生物基因組中的短串聯重復序列( 1 - 7bp ), SSR 實驗一般檢測到的是一個單一的多等位基因......閱讀全文
常用的幾種分子標記
RAPD利用 10 個堿基的一個或幾個隨機引物非定點地擴增 DNA 片段,一般一個引物可擴增 6-12 條 DNA 片段,利用凝膠電泳分開擴增的片段,從而進行基因多態性研究。 RAPD 是一種能快速進行基因多態性研究的技術,并且由于不涉及印跡雜交、放射性自顯影等技術,因此簡便易行。?SSR 真核生物
分子標記
內容:一、遺傳標記?二、DNA分子標記?三、染色體原位雜交?四、DNA分子標記的應用?長期以來,植物育種中選擇都是基于植株的表型性狀進行的,當性狀的遺傳基礎較為簡單或即使較為復雜但表現加性基因遺傳效應時,表型選擇是有效的。但水稻的許多重要農藝性狀為數量性狀,如產量等;或多基因控制的質量性狀,如抗性等
幾種標記實驗的特點
RAPD利用 10 個堿基的一個或幾個隨機引物非定點地擴增 DNA 片段,一般一個引物可擴增 6-12 條 DNA 片段,利用凝膠電泳分開擴增的片段,從而進行基因多態性研究。 RAPD 是一種能快速進行基因多態性研究的技術,并且由于不涉及印跡雜交、放射性自顯影等技術,因此簡便易行。SSR 真核生物的
分子標記的概述
分子標記的概念有廣義和狹義之分。廣義的分子標記是指可遺傳的并可檢測的DNA序列或蛋白質。狹義分子標記是指能反映生物個體或種群間基因組中某種差異的特異性DNA片段。 分子標記(Molecular Markers),是以個體間遺傳物質內核苷酸序列變異為基礎的遺傳標記,是DNA水平遺傳多態性的直接的
分子標記的簡介
分子標記(Molecular Genetic Markers)是以個體間遺傳物質內核苷酸序列變異為基礎的遺傳標記,是 DNA 水平遺傳多態性的直接的反映。與其他幾種遺傳標記——形態標記、同工酶標記、細胞標記相比,DNA 分子標記具有的優越性有:大多數分子標記為共顯性,對隱性的農藝性狀的選擇十分便
分子標記的概念
分子標記(Molecular Markers),是以個體間遺傳物質內核苷酸序列變異為基礎的遺傳標記,是DNA水平遺傳多態性的直接的反映。與其他幾種遺傳標記——形態學標記、生物化學標記、細胞學標記相比,DNA分子標記具有的優越性有:大多數分子標記為共顯性,對隱性的性狀的選擇十分便利;基因組變異極其
免疫標記技術常用的標記物介紹
常用的標記物有熒光素、酶、放射性核素及膠體金等。免疫標記技術具有快速、定性或定量甚至定位的特點,是應用最廣泛的免疫學檢測技術。 常用的免疫熒光素主要有: 1 .異硫氰酸熒光素 (FITC) ,最大吸收光譜為 490~495nm ,最大發射光譜為 520~530nm ,呈黃綠色熒光。 2 .
幾種常用的轉染方法
一、物理-化學方法 脂質體轉染法:采用脂質體轉染試劑,將遺傳物質如質粒, siRNA等轉移至細胞內。 此種方法易于操作且不需要許多步驟或特殊的專業知識。通常情況下,你只需要一種轉染試劑和一種兼容的生長培養基 (通常是低血清且具有良好的緩沖作用,使細胞在轉染過程中保持活性)。不同的廠商有自己的
常用的幾種電橋介紹
由電阻、電容、電感等元件組成的四邊形測量電路叫電橋。人們常把四條邊稱為橋臂。作為測量電路,在四邊形的一條對角線兩端接上電源,另一條對角線兩端接指零儀器。調節橋臂上某些元件的參數值,使指零儀器的兩端電壓為零,此時電橋達到平衡。利用電橋平衡方程Z1Z3=Z2Z4,即可根據橋臂中已知元件的數值求得被測
實驗動物常用的標記法
常用的標記法有染色、耳緣剪孔、烙印、號牌等方法。二)烙印法用刺數鉗在動物耳上刺上號碼,然后用棉簽蘸著溶在酒精中的黑墨在刺號上加以涂抹,烙印前最好對烙印部位預先用酒精消毒。(三)針刺法用七號或八號針頭蘸取少量碳素墨水,在耳部、前后肢以及尾部等處刺入皮下,在受刺部位留有一黑色標記。該法適用于大小鼠、豚鼠
常用單抗的標記技術
目前動物用單抗,在動物疫病診斷和檢疫、妊娠檢測、性別鑒定等方面有廣泛的應用,大多以診斷試劑(盒)的形式提供,其中核心試劑為標記的單抗。下面將介紹最常用的幾種標記技術。1.酶標記(1)辣根過氧化物酶(HRP)標記辣根過氧化物酶(HRP)標記單抗和多克隆抗體的常用方法是過碘酸鈉法。其原理是HRP的糖基用
分子標記的技術展望
分子標記技術已飛速發展,并被廣泛應用于動植物的遺傳研究中。分子標記中的已在玉米、大豆、雞、豬等動植物育種和生產中有許多應用研究,主要集中在基因定位、輔助育種、疾病治療等方面的應用研究工作,取得了一些應用成果。分子標記技術的開發是分子生物學領域研究的熱點。隨著分子生物學理論與技術的迅猛發展,必將研
常用酶標記法介紹
酶與抗體交聯,常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行,標記效果好,特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為:將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中,加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉(NaIO4)水溶液0.5ml,混勻置4℃冰箱30分鐘 , 取出
常用RNA標記方法介紹
RNA標記方法:按反應機制分如下四類:直接標記法,加尾標記法,基于逆轉錄反應的標記方法,基于RNA克隆擴增的標記方法。常用于RNA標記的方法按標記物性質分為:放射性同位素標記:32P、35S、3H非放射性標記:半抗原熒光素化學發光物質地高辛地高辛標記RNA常用的方法是將DIG與UTP共價結合形成DI
菌種保存的幾種常用方法
微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過程中,必須使微生物的代謝處于zui不活躍或相對靜止的狀態,才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。 低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖多,但都是根據這三個因素而設計的。 保藏方法大致可分為以下幾種:
菌種保藏的幾種常用方法
基本原理 微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過程中,必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態,才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。 ? 低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖多,但都是根據這三個因素而設計的。 保藏方法大致可
幾種常用的蛋白鑒定方法
傳統的蛋白鑒定方法,如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一個有機體中有意義的基因的過表達通常耗時、耗力,不適合高流通量的篩選。 目前,所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序、進一步對肽片段進行鑒定的氨基酸組分分析和與質譜相關的技術。
幾種常用的蛋白鑒定方法
傳統的蛋白鑒定方法,如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一個有機體中有意義的基因的過表達通常耗時、耗力,不適合高流通量的篩選。 目前,所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序、進一步對肽片段進行鑒定的氨基酸組分分析和與質譜相關的技術。
幾種常用的蛋白鑒定方法
傳統的蛋白鑒定方法,如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一個有機體中有意義的基因的過表達通常耗時、耗力,不適合高流通量的篩選。 目前,所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序、進一步對肽片段進行鑒定的氨基酸組分分析和與質譜相關的技術。1 ?圖象
常用的幾種流量計
污水流量計按計量原理分類:?1、流量計有節省式流量計、畢保管流量計、均速管流量計、轉子流量計、靶式流量計,這些流量計是運用伯努利方程原理,經過丈量流體差壓信號反映流量;(延伸閱覽…文丘里流量計)?2、流量計有渦輪流量計、渦街流量計、電磁流量計、多普勒超聲波流量計、測速流量計,這些是經過丈量流體流速來
幾種常用的蛋白鑒定方法
幾種常用的蛋白鑒定方法 傳統的蛋白鑒定方法,如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的 comigration分析,或者在一個有機體中有意義的基因的過表達通常耗時、耗力,不適合高流通量的篩選。 目前,所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序、進一步對肽片段進行鑒定的氨基
幾種分析電路的常用方法
常用分析電路的方法有以下幾種: 1、直流等效電路分析法 在分析電路原理時,要搞清楚電路中的直流通路和交流通路。直流通路是指在沒有輸入信號時,各半導體三極管、集成電路的靜態偏置,也就是它們的靜態工作點。交流電路是指交流信號傳送的途徑,即交流信號的來龍去脈。 在實際電路中,交流電路與直流電路共
幾種常用的蛋白鑒定方法
?傳統的蛋白鑒定方法,如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一個有機體中有意義的基因的過表達通常耗時、耗力,不適合高流通量的篩選。 目前,所選用的技術包括對于蛋白鑒定的圖象分析、微量測序、進一步對肽片段進行鑒定的氨基酸組分分析和與質譜相關的技術。?1 ?
幾種常用的熱電偶
1、鉑銠10-鉑熱電偶組成: 由φ0)5mm的純鉑絲和直徑相同的鉑銠絲制成,分度號為S。鉑銠絲為正極,純鉑絲為負極。 2)特點:熱電性能好,抗氧化性強,宜在氧化性、惰性氣氛中連續使用。長期適用的溫度為1400℃,超過此溫度時,即使在空氣中純鉑絲也將再結晶而使晶粒增大。短期使用溫度為
多肽常用的幾種水解方法
雖然多肽合成的氨基酸組成分析方法較多,且趨向更靈敏、更精確、更簡便、更快速,但還沒有一種方法可以單獨適用于所有氨基酸殘基的檢測,并且很多因素如溫度、時間、水解試劑、水解方法及多肽合成樣品中添加劑等對水解程度均有影響。常用的水解方法作簡要介紹如下: 1.酸性水解酸性水解是應用最為廣泛水解方法,可以使大
幾種常用的滅菌方法匯總
物理滅菌法(一)加熱滅菌法加熱可破壞微生物中酶、蛋白質和核酸,導致微生物死亡。加熱滅菌又分干熱滅菌法和濕熱滅菌法。在同一溫度下,濕熱滅菌的效果比干熱滅菌好。主要是因濕熱滅菌時,有水分存在,蛋白質容易變性。水分又易使微生物膜壁潤濕,濕熱的穿透力比干熱大。干熱滅菌法 ?常用的有火焰滅菌法與干熱空氣滅菌法
幾種常用特殊PCR技術
幾種常用特殊PCR技術(一)逆轉錄PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)RNA經逆轉錄后可作為PCR的模板.逆轉錄PCR(RT-PCR)常用于基因表達研究(定量PCR)和逆病毒檢測.設計RT-PCR引物時,應使引物分別位于不同的外顯子中,以便區別cDNA和gDNA
幾種常用特殊PCR技術
幾種常用特殊PCR技術 (一)逆轉錄PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR) RNA經逆轉錄后可作為PCR的模板.逆轉錄PCR(RT-PCR)常用于基因表達研究(定量PCR)和逆病毒檢測. 設計RT-PCR引物時,應使引物分別位于不同的外顯子中,以便區別cDNA和
幾種常用特殊PCR技術
幾種常用特殊PCR技術(一)逆轉錄PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)RNA經逆轉錄后可作為PCR的模板.逆轉錄PCR(RT-PCR)常用于基因表達研究(定量PCR)和逆病毒檢測.設計RT-PCR引物時,應使引物分別位于不同的外顯子中,以便區別cDNA和gDNA
地高辛標記RNA常用的方法介紹
地高辛標記RNA常用的方法是將DIG與UTP共價結合形成DIG-UTP,以DIG-UTP、ATP、CTP、GTP為底物通過RNA聚合酶T7、SP6經體外轉錄合成標記RNA。此法多用于RNA探針的制備,一般每20~25個核苷酸可引入一個地高辛分子。5'末端標記法5'末端標記法是通過化學