PCR技術PCR技術的應用
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一。這也是分子生物醫學令人震撼的一例。 何謂PCR 簡單的說，PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內 (In Vitro) 的大量合成。基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制.目前常用的技術,可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。 PCR的要素 基本的PCR須具備１.要被復制的DNA模板 (Template)&nb......閱讀全文
定量PCR實驗技術－QPCR
Quantitative PCRJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, AustraliaDavid W. RussellUniversity of Texas Southwes
PCR技術（十）：PCR產物克隆方法
平端連接 通常情況下，PCR產物可直接與平端載體DNA進行連接，但其連接效 率效低。因為TaqDNA聚合酶具有非模板依賴性末端轉移酶活性，能 在兩6條DNA鏈的3'末端加上一個多余的堿基，使合成的PCR產物成為 3'突出一個堿基的DNA分子。這種DNA分子的連接效率很低。由于PCR
PCR技術（四）：PCR污染與對策
PCR反應的最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污 染，極其微量的污染即可造成假陽性的產生.一、污染原因 (一)標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染，或標本放置時，由于 密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提 取過程中，由
技術變革：超速光電PCR技術
最近，加州大學伯克利分校的生物工程學家，開發出一種新技術，通過用一種光開關，加速遺傳學樣本的加熱和冷卻，有望使PCR這種實驗室主力工具更便宜、更方便，并將其速度提高很多倍。 研究人員在七月三十一日的Nature子刊《Light: Science & Application》描述了這種渦輪增壓熱
熒光PCR/實時定量PCR技術應用簡介
一．熒光PCR原理1．熒光共振能量傳遞?(FRET)某熒光標記基團在激發光刺激下生成某波長的發射光，當另一屏蔽基團與其距離合適時，原發射光將會被屏蔽基團所吸收，并轉化為其他波長的發射光或熱能，稱之為FRET。2．熒光化學：熒光定量PCR所使用的熒光化學可分為兩種：熒光探針和熒光染料。PCR擴增時在加
PCR技術（十三）：PCR用于進化分析
進化遺傳學具有兩個并列的研究方向：系統發育的重建和種群分析。自1962年， Zuckerkandl和Pauling提出蛋白質序列和基因序列的比較可以象分子種一樣用于標志 現存物種分化的時間以來，各種生化方法被用于系統發育的研究。在最初二十年內， 同功酶的電泳分析、免疫學比較和蛋白質序列分析被廣泛地應
PCR技術（二）：PCR反應模板的制備
PCR反應的關鍵因素主要有引物的選擇與設計，酶的質量.模板的制備，在前二者都穩定可行的情況下，PCR模板的制備尤為重要.模板處理方法的選擇及操作人員的基 本技能，決定分離模板核酸(DNA或RNA)的質和量及PCR的成敗.而提高模板核酸質量的 關鍵是除去雜質(蛋白質、酶、脂肪等).除去抑制Taq DN
直接PCR技術，讓PCR更簡單（二）
直接PCR（Direct PCR）是一種不經核酸提取而直接使用動物或植物組織等直接進行擴增的反應。在許多方面，直接PCR的工作方式類似于常規PCR。主要區別是直接PCR中使用的定制緩沖液，樣本可不經過核酸抽提，直接進行PCR反應，但對于參與直接PCR反應的酶的耐受性和buffer的兼容性有相對應的要
降落PCR（Touchdown－PCR）技術的的優點
綜合比較普通PCR技術和最大耐受量聚合酶鏈反應，認為前者程序簡單，省時，一般的PCR擴增儀都可完成，但缺點是退火溫度不適當時容易出現假陽性;而最大耐受量聚合酶鏈反應雖然程序復雜，需要擴增儀有較大的內存，但能非常有效地降低或避免假陽性，且不在理想的工作條件（比如最佳鎂離子濃度）下也可擴增出產物。?這就
Single－Cell－PCR－單細胞PCR實驗技術
Single Cell PCR(Protocol provided by Carolyn Troeger)Cell picking c Axiovert 100/Zeiss, extended glass capillary/Drummond, Broomall and a micromanipul
PCR實驗技術指南之PCR反應參數
1. 變性：在*輪循環前，在94℃下變性5-10min 非常重要，它可使模板DNA 完全解鏈，然后加入Taq DNA聚合酶(hot start)，這樣可減少聚合酶在低溫下仍有活性從而延伸非特異性配對的引物與模板復合物所造成的錯誤。變性不完全，往往使PCR 失敗，因為未變性完全的DNA 雙鏈會很快復性
PCR實驗技術指南之PCR反應參數
1. 變性：在*輪循環前，在94℃下變性5-10min 非常重要，它可使模板DNA 完全解鏈，然后加入Taq DNA聚合酶(hot start)，這樣可減少聚合酶在低溫下仍有活性從而延伸非特異性配對的引物與模板復合物所造成的錯誤。變性不完全，往往使PCR 失敗，因為未變性完全的DNA 雙鏈會很快復性
PEQLAB推出最新PCR技術與PCR儀
PEQLAB是一家專注于分子生物學領域試劑、儀器及耗材研發、生產及銷售的德國公司。旗下的全資子公司Clemens 成立于1989年，是德國三大PCR儀器制造商之一，擁有近20年的PCR儀研發及生產經驗。其新近研發的peqSTAR是集高通量，快速，多功能，觸摸屏設計于一體的高端PCR儀，引領21s
PCR實驗技術（一）
PCR（聚合酶鏈式反應）【原理】PCR（polymerase?chain?reaction）用于在體外將微量的目標DNA大量擴增，以便進行分析。反應體系：①樣品DNA；②引物（primer），是人工合成的一對寡核苷酸鏈（約15-20個核苷酸），用于擴增夾在雙引物與模板DNA互補區之間的區域；③4種d
入門：PCR技術概論
聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點；能在一個試管內將所要研究 的目的基因或某一DNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷；可從一
PCR技術的原理
PCR原理：DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子拷貝。PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個基
PCR技術操作步驟
PCR即聚合酶鏈式反應（Polymerase chain reaction）的縮寫，它是體外酶促合成特異DNA片段的方法。這一方法的要點是合成兩個分別互補于待擴增DNA片段兩端的小片段引物，在含有引物、待擴增DNA模板核苷酸底物和DNA多聚酶的反應體系中DNA復制反復進行，在短時間內可以取得大量擴增
熒光定量PCR技術
熒光定量pcr（也稱taqmanpcr,以下簡稱fq-pcr）是美國pe（perkinelmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術，該技術是在常規pcr基礎上加入熒光標記探針來實現其定量功能的，與變通pcr相比，fq-pcr具有許多優點。
什么是PCR技術
PCR技術也就是基因擴增技術，它是通過基因擴增儀，在細胞外進行DNA復制，由1個DNA分子增加到2個，然后依次增加到4個，8個…，使分子數目呈幾何級數增加，以在短時間內獲得足夠的DNA，供研究用的一種技術。PCR技術的出現，使生物學的研究一大突破。在PCR技術問世之前，人們無法查出愛滋病病毒感染者，
PCR實驗技術（四）
4．我們上面介紹的只是一種基本的PCR反應條件，對于具體的每一種PCR反應，反應條件差異很大，需要根據情況調整。（1）時間：上面介紹的時間適用于在0.2?ml薄壁管進行PCR反應，其反應體積為50?μl，熱循環儀為Perkin-Elmer?9600?或9700、Master?Cycler?PCR儀（
PCR技術拓展知識
1.逆轉錄PCR（RT-PCR）用來擴增RNA的方法。2.競爭逆轉錄PCR（competitive reverse transcription-polymerase chain rection C-RT-PCR）低豐度RNA定量的好方法。3.多重PCR（multiples PCR）在同一PCR體系中
PCR技術要素引物
引物: 引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
什么是PCR技術
PCR技術也就是基因擴增技術，它是通過基因擴增儀，在細胞外進行DNA復制，由1個DNA分子增加到2個，然后依次增加到4個，8個…，使分子數目呈幾何級數增加，以在短時間內獲得足夠的DNA，供研究用的一種技術。PCR技術的出現，使生物學的研究一大突破。在PCR技術問世之前，人們無法查出愛滋病病毒感染者，
PCR技術的原理
PCR的原理：該技術是在模板DNA、引物和四種脫氧核糖核苷酸存在下，依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應。DNA聚合酶以單鏈DNA為模板，借助一小段雙鏈DNA來啟動合成，通過一個或兩個人工合成的寡核苷酸引物與單鏈DNA模板中的一段互補序列結合，形成部分雙鏈。在適宜的溫度和環境下，DNA聚合酶將脫氧單核苷
PCR實驗技術（二）
【方法】方法一、基本的PCR方法下面介紹的基本PCR方法可作為任何PCR擴增的一般指導和出發點。由于各種PCR反應條件（如PCR擴增次數、溫度、Taq?DNA聚合酶的濃度、引物、氯化鎂以及模板DNA）變異極大，應根據具體情況，對各種PCR反應條件進行相應調整。1．按以下次序，將各成分加入0.2?ml
PCR技術應用進展
? PCR技術自1985年建立以來，發展之迅速、應用之廣泛，表明其具有強大的生命力.近些年來，基于PCR的基本原理，許多學者充分發揮創造性思維，對PCR技術進行研究和改進，使PCR技術得到了進上步地完善，并在此基礎上派生出了許多新的用途.?原位PCR技術 原位PCR就是在組織細胞里進行PCR反應
PCR技術操作步驟
PCR即聚合酶鏈式反應（Polymerase chain reaction）的縮寫，它是體外酶促合成特異DNA片段的方法。這一方法的要點是合成兩個分別互補于待擴增DNA片段兩端的小片段引物，在含有引物、待擴增DNA模板核苷酸底物和DNA多聚酶的反應體系中DNA復制反復進行，在短時間內可以取得大量擴增
PCR－Array－技術原理
?PCR Arrays是分析一組特定基因表達的可靠工具，引物經過優化。每個96孔板、384孔板PCR Array都包含SYBR? Green優化的引物分析，可對相關的通路或疾病相關的基因進行細致的研究，并含有相應的RNA、DNA質量控制。PCR Arrays也可針對您特定的研究興趣對一些基因作定制化
PCRSSCR技術
實驗概要掌握PCR-SSCR技術的基本方法。實驗原理聚合酶鏈式反應-單鏈構象多態（Polymerase ?Chain Reaction-Single Strand Conformation ?Polymorphism，PCR-SSCP）技術是在PCR技術基礎上發展起來的，它是一種簡單、快速、經濟的用
什么是PCR技術
PCR技術也就是基因擴增技術，它是通過基因擴增儀，在細胞外進行DNA復制，由1個DNA分子增加到2個，然后依次增加到4個，8個…，使分子數目呈幾何級數增加，以在短時間內獲得足夠的DNA，供研究用的一種技術。PCR技術的出現，使生物學的研究一大突破。在PCR技術問世之前，人們無法查出愛滋病病毒感染者，