一種新方法評定在培養細胞中siRNA效率
A novel approach for evaluating the efficiency of siRNAs on protein levels in cultured cells.Wu W, Hodges E, Redelius J, Hoog C.Nucleic Acids Res. 2004 Jan 22;32(2):E17. Center for Genomics and Bioinformatics, Karolinska Institutet, S-171 77 Stockholm, Sweden.An important aim in the post-sequencing age of functional genomics is to translate gene sequences into protein functions. This shift of focus is particular......閱讀全文
一種新方法評定在培養細胞中siRNA效率
A novel approach for evaluating the efficiency of siRNAs on protein levels in cultured cells.Wu W, Hodges E, Redelius J, Hoog C.Nucleic Acids Res. 200
一種新方法評定在培養細胞中siRNA效率
A novel approach for evaluating the efficiency of siRNAs on protein levels in cultured cells.Wu W, Hodges E, Redelius J, Hoog C.Nucleic Acids Res. 200
Cell:提高造血干細胞“移植效率”新方法
來自美國印第安納大學醫學院的研究人員報告稱,他們發現了一種提高造血干細胞移植效率的新方法。這項重要的研究在線發表在6月11日的《細胞》(Cell)雜志上。 領導這一研究的是印第安納大學醫學院的杰出教授、美國血液學會前主席Hal E. Broxmeyer博士。Broxmeyer博士的研究領域是調
生態紅線劃定在爭議中前行
2014年,我國將完成全國范圍內的生態保護紅線劃定工作。然而,當前關于紅線如何劃定及落地的爭議聲依舊不斷。 在眾多專家學者看來,繼18億畝耕地紅線后,生態保護紅線或將成為我國第二條被提升為國策的紅線。 事實上,這樣的推測正在一步步變成現實。 剛剛閉幕的十八屆三中全會提出,建設生
人類干細胞培養又有新方法
人類多能干細胞(hPSCs)能夠自我更新并轉換成為體內其他任何類型的細胞,使其成為細胞移植療法、藥物開發、細胞分化和發育研究的一種很有前途的材料來源。然而,眾所周知,干細胞是很難維持和培養。像所有的真核細胞一樣,它們對養分的有效性、pH值、溫度、氧氣和二氧化碳的含量都很敏感,而且它們也易于分化,
分子細胞中心等研發出系統性鑒定siRNA脫靶位點新方法
12月4日,Molecular Therapy–Nucleic Acids在線發表了中國科學院分子細胞科學卓越創新中心(生物化學與細胞生物學研究所)吳立剛研究組,上海市計劃生育科學研究所李衛華研究組與揚州大學趙雅研究組合作的研究成果Identifying Cleaved and Noncleav
如何優化GenMuteTM轉染試劑,提高siRNA/DNA共轉染效率?
GenMuteTM siRNA轉染試劑(Cat#SL100568)是市場上最有力的siRNA傳遞工具之一。siRNA/DNA共轉染時,siRNA的最佳濃度范圍是0.5ηM到10ηM,過多的siRNA可能導致沉默效果差的“洪水效應”,切勿使用超過20ηM的siRNA。以24孔板為例,如下步驟將對如何優
日本理化所:提高體細胞重編程效率的新方法
將成體細胞轉變為能夠發育為其他類型特化細胞的干細胞是當前醫學研究最活躍的領域,其為治療疾病及修復受損組織帶來了巨大的希望。然而當前用于將成體細胞重編程為干細胞的一些技術仍然存在缺陷且效率低下。 在一項幫助提高重編程效率的研究中,來自日本理化研究所(RIKEN)定量生物學中心的Sayaka
同濟大學CellRes提高細胞重編程效率的新方法
來自上海同濟大學生命科學與技術學院、中科院上海藥物研究所的研究人員在新研究中證實利用高滲透壓可提高體細胞的重編程效率,并揭示了其分子作用機制。相關論文“Stress-mediated p38 activation promotes somatic cell reprogramming” 發表
溫度滴定在各個行業中的應用
電鍍行業——主要應用在對各種鍍液成分的分析。例如氯化物分析,硫酸鹽分析,碳酸鹽分析,總酸度分析,苛性堿與氧化鋁分析,硝酸和HF的分析,硼酸的分析,連續滴定硫酸、銅和鐵,連續滴定硝酸、鐵和鋅,鉻分析,銻分析,鐵離子和亞鐵離子分析,鋅分析,鈷分析等。食品行業(包括酒、水果、茶和調味料)——主要應用在酸度
哈弗大學開發出無需手術化療治愈乳腺癌的新方法
據物理學家組織網近日報道,由哈佛大學韋斯仿生工程研究所領導的一個多機構研究小組,開發出一種治療乳腺癌的新方法,能在一定程度上逆轉實驗室培養的小鼠乳腺腫瘤的癌變狀態,遏制癌癥發展,有望帶來一種治療早期癌癥的新方法,而無需手術、化療或放射治療。相關論文發表在近日出版的《科學·轉化醫學》上。 韋
Mol-Cancer-Ther:研究人員沉默重要致癌基因
近日,北卡羅來納大學(UNC)醫學院和德克薩斯大學MD安德森癌癥中心研究人員開發出一種新方法,能阻斷KRAS致癌基因,KRAS是在人類癌癥中最常見的一個突變基因。這種新方法依賴于小干擾RNA(siRNA)的一種特定序列類型。 RNAi技術已經在肝臟疾病,病毒感染以及癌癥的治療中顯示出有很大潛能
培養細胞中RNA檢測
實驗概要掌握培養細胞中RNA的檢測方法。實驗步驟1.制膠(1%):??瓊脂糖 2.5g??? 10×Mops緩沖液 25.0ml??? H2O 192.0ml2.在微波爐中加熱煮沸使膠完全溶于水并滅菌。3.取出膠冷卻到60℃,于通風柜中加45ml甲醛,混勻。4.加20μl溴化乙錠,混勻。5.令膠液再
hepg2細胞siRNA轉染條件
之前我們用過Lipo,說明書上要求細胞的密度在70%左右,同時在轉染后的4-6小時注意要換培養液,后來我們實驗室換了RFect sRNA Transfection Reagent,細胞密度在45%左右 ,設置siRNA終濃度10nM,30nM,50nM,100nM四個梯度,每個梯度最好做2個復孔,一
RNAi及siRNA轉染相關實驗攻略
RNAi 是一種高效的特異性強的基因表達抑制,應用RNAi生物學機制進行基因功能研究已經成為一種創新性的新方法,人們第一次可以如此快速和方便地抑制細胞中特定基因的表達水平,從而用于分析特定基因在細胞中的功能。RNAi 技術還為新藥開發、疾病治療提供了創新性的方法和途徑,有著極其廣闊的應用前景。轉染是
提早知道所培養細胞或培養基中是否有細菌污染一種方法
培養細胞時,要避免細菌污染。如果存在細菌污染,則培養液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯,細胞大多在24小時死亡。在以細胞大規模培養為基礎的生物藥產業中,也需要進行無菌檢查。傳統無菌檢查是采用TSA或TSB培養基培養的方法,一般需要培養14天,觀察是否有菌落生長或溶液渾濁。現介紹一種通過PCR進行無
RNAi制備小分子干擾RNA(small-interfering-RNAs,siRNAs)的方法1
最適用于:快速而經濟地研究某個基因功能缺失的表型不適用于:長時間的研究項目,或者是需要一個特定的siRNA進行研究,特別是基因治療體內表達前面的3種方法主要都是體外制備siRNAs,并且需要專門的RNA轉染試劑將siRNAs轉到細胞內。而采用siRNA表達載體和基于PCR的表達框架則屬于:從轉染到細
山中伸彌PNAS:提高干細胞重編程效率的新方法
最近在美國國家科學院學報PNAS上發表的一項研究中,諾獎得主、首次制備了誘導多功能干細胞(iPSCs)的山中伸彌(Shinya Yamanaka)博士,和他Gladstone研究所的同事,通過對一種罕見的遺傳性疾病進行研究,找到了一種方法來提高干細胞重編程的效率。 iPSCs——從皮膚細胞制
針對稀有樣本——新方法提高單細胞轉錄組測序的效率
近日,中國科學院深圳先進技術研究院醫工所微納系統與仿生醫學研究中心研究員陳艷和南加州大學教授鐘江帆合作,在針對稀有細胞樣本的單細胞測序技術方面取得新進展。相關研究成果以Improving single-cell transcriptome sequencing efficiency with a
日本用新方法提高誘導多功能干細胞生成效率
新華網東京8月29日電 日本京都大學研究人員在新一期《細胞-干細胞》雜志網絡版上發表論文說,在培育誘導多功能干細胞(iPS細胞)的過程中,通過降低培養環境的氧濃度,可大幅提高細胞生成的效率。 京都大學教授山中伸彌等人在iPS細胞研究過程中,發現機體內的干細胞總是集中于氧氣相對少的地方。于是
一種癌癥檢測新方法
日本國立癌癥研究中心的研究團隊宣布,其已經研究開發出一種全新的癌癥檢測方法。運用該方法,只需要采集少量的血液樣本,就能夠全面地對與癌癥相關的60種基因物質進行綜合檢測。 在此之前,如果希望進行全面檢測,通常需要提取患者癌變部位的組織來進行檢測。而新的檢測方法則在避免增加患者身體負擔的前提下,反復
多孔培養板中單層培養細胞生長曲線
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 以三種不同的細胞濃度在多孔板中培養三組細胞,在達到平臺期之前,每天計數一個板中的細胞。 實驗步驟 材料 無菌 單層細胞培養:A549、V
總膽汁酸測定在肝病診斷中的應用
膽汁酸是膽固醇在肝臟分解代謝的產物,膽汁酸是由肝臟分泌到膽汁中,并隨膽汁排入腸腔,作用于脂肪的消化吸收。膽汁酸在腸腔經細菌作用后,95%以上的膽汁酸被腸壁吸收經門靜脈血重返肝臟利用,故正常人血中膽汁酸濃度很低。膽汁酸的生成和代謝與肝臟有十分密切的關系,一旦當肝細胞發生病變,血清TBA很容易升高,因而
總膽汁酸測定在肝病診斷中的應用
膽汁酸是膽固醇在肝臟分解代謝的產物,膽汁酸是由肝臟分泌到膽汁中,并隨膽汁排入腸腔,作用于脂肪的消化吸收。膽汁酸在腸腔經細菌作用后,95%以上的膽汁酸被腸壁吸收經門靜脈血重返肝臟利用,故正常人血中膽汁酸濃度很低。膽汁酸的生成和代謝與肝臟有十分密切的關系,一旦當肝細胞發生病變,血清TBA很容易升高,因而
《癌癥基因治療》-李明遠小組-siRNA基因治療新方法
來自四川大學華西醫學中心微生物學教研室,成都生物制品研究所(Institute of Chengdu Biological Products)的研究人員通過構建質粒pAd-hTR證明了hTR siRNA在HeLa細胞系中有效和特異的端粒酶的敲除,從而指出了這種siRNA表達重組腺病毒系統在癌癥基因治
南京大學長江學者鞠熀先教授開發新的siRNA傳遞策略
siRNA到靶細胞的有效而精確的傳遞,對于成功的基因治療來說,是至關重要的。 雖然新型納米材料可增強傳遞效率,但是,對于精確的基因傳遞來說,克服非特異性的吸附和脫靶效應,仍然還是一個挑戰。 11月24日,在Nature子刊《Nature Communications》在線發表的一項研究中,來自南
JACS:“量子點”助力RNA干擾技術
15年前,科學家發現了一種阻礙基因表達路徑的方法——RNA干擾(簡稱RNAi)。這項榮膺2006年諾貝爾獎的發現承載著醫學科學的迫切希望,它可以通過沉默基因來阻礙特定蛋白制造,從而達到疾病治療的效果。不過到目前為止,RNA干擾技術很難在活體細胞中取得應用。 圖片說明:由不同尺寸的相同物質構成的
研究人員“沉默”重要的致癌基因
最近,來自北卡羅來納大學(UNC)醫學院和德克薩斯大學MD安德森癌癥中心的研究人員,開發出一種新方法,阻斷KRAS致癌基因——在人類癌癥中最常見的一個突變基因。這項研究,由UNC醫學副教授Chad Pecot帶領,為攻擊KRAS提供了另外一種途徑,這個突變被證明是藥物開發當中一個難懂而令人沮喪的
一種提高轉染效率的簡便方法
對于一個成功的細胞生物學實驗來說,轉染那是必不可少的。通常比較受歡迎的方法是利用陽離子脂質體或聚合物來轉染。這些試劑與DNA形成絡合物,進而壓縮DNA使其被細胞內吞。它們的正電荷有助于克服帶負電荷的DNA骨架與細胞膜之間的排斥。 與病毒和物理方法相比,化學轉染方法雖然簡便經濟,但效率不高,毒性
一種跟蹤體內轉移性癌細胞的新方法
在美國,安妮特·哈勒德(Annette Khaled)博士的研究實驗室報告稱,他們使用了一種名為伴侶蛋白(chaperonin)的蛋白質復合物作為血液中癌細胞的新標記物,從而更清楚地表明癌癥正在擴散。通過使用這種新的標記物,UCF的科學家能夠在血液中檢測到更多的癌細胞,這一過程被稱為液體活檢,可以幫