對流免疫電泳
【原理】 對流免疫電泳(counter immunoelectrophoresis,CIEP)是指在適宜緩沖液和電場條件下,抗原和相應抗體在瓊脂凝膠中,由于電泳和電滲作用抗原,抗原向正極移動,抗體向負極移動。將抗原放負極端,抗體放正極端,則抗原抗體相向移動,在兩孔之間相遇,在比例合適時形成沉淀線。以Sm和RNP(核糖核蛋白)等可提取性抗原(extractable nucleat antigen,ENA)檢測相應抗Sm和RNP為例。 【材料】 1. Sm/RNP抗原制備 將新鮮或凍存于-30℃的小牛胸腺除去脂肪與結締組織后,用0.004 mol/L 氯化鈣-0.28 mol/L蔗糖溶液洗凈,切碎。每50 g胸腺加上述含鈣0.28 mol/L蔗糖450 ml。于勻漿器中慢......閱讀全文
對流免疫電泳實驗——對流免疫電泳
對流免疫電泳實質上是定向加速度的免疫雙擴散技術,其基本原理是:在瓊脂板上打兩排孔,左側各孔加人待測抗原,右側孔內放人相應抗體,抗原在陰極側,抗體在陽極側。通電后,帶負電荷的抗原泳向陽極抗體側,而抗體借電滲作用流向陰極抗原側,在兩者之間或抗體的另一側形成沉淀線。實驗方法原理對流免疫電泳是在瓊脂擴散基礎
對流免疫電泳
對流免疫電泳是在瓊脂擴散基礎上結合電泳技術而建立的一種簡便而快速的方法。此方法能在短時間內出現結果,故可用于快速診斷,敏感性比雙向擴散技術高10~15倍。【實驗目的】通過本實驗的學習,復習鞏固免疫學的基本知識,了解對流免疫電泳的基本原理及其用途,并掌握對流免疫電泳的操作步驟及技能。【實驗原理】抗原抗
對流免疫電泳
【原理】?對流免疫電泳(counter?immunoelectrophoresis,CIEP)是指在適宜緩沖液和電場條件下,抗原和相應抗體在瓊脂凝膠中,由于電泳和電滲作用抗原,抗原向正極移動,抗體向負極移動。將抗原放負極端,抗體放正極端,則抗原抗體相向移動,在兩孔之間相遇,在比例合適時形成沉淀線。以
對流免疫電泳
實驗概要本實驗介紹了對流免疫電泳(counter immune electrophoresis)的原理及操作流程。實驗原理對流免疫電泳又叫反向免疫電泳或免疫電滲電泳。其原理為:在pH值8.6的瓊脂凝膠中,抗體球蛋白只帶有微弱的負電荷,而且它分子又較大,所以泳動慢,受電滲作用的影響也大,往往不能抵抗電
對流免疫電泳實驗
實驗方法原理 對流免疫電泳是在瓊脂擴散基礎上結合電泳技術而建立的一種簡便而快速的方法。此方法能在短時間內出現結果,故可用于快速診斷,敏感性比雙向擴散技術高10~15倍。實驗材料 待檢血清試劑、試劑盒 瓊脂巴比妥緩沖液生理鹽水儀器、耗材 電泳儀離心機打孔器微量進樣器實驗步驟 1. ?瓊脂板的制備根據需
對流免疫電泳的原理
在pH值8.6的瓊脂凝膠中,抗體球蛋白只帶有微弱的負電荷,而且它分子又較大,所以泳動慢,受電滲作用的影響也大,往往不能抵抗電滲作用,故在電泳時,反而向負極倒退。而一般抗原蛋白質常帶較強的負電荷,分子又較小,所以泳動快,雖然由于電滲作用泳動速度減慢,但仍能向正極泳動。如將抗原置陰極,抗體置陽極,電泳時
對流免疫電泳的定義
在pH值8.6的瓊脂凝膠中,抗體球蛋白只帶有微弱的負電荷,而且它分子又較大,所以泳動慢,受電滲作用的影響也大,往往不能抵抗電滲作用,故在電泳時,反而向負極倒退。而一般抗原蛋白質常帶較強的負電荷,分子又較小,所以泳動快,雖然由于電滲作用泳動速度減慢,但仍能向正極泳動。如將抗原置陰極,抗體置陽極,電泳時
對流免疫電泳的原理
在pH值8.6的瓊脂凝膠中,抗體球蛋白只帶有微弱的負電荷,而且它分子又較大,所以泳動慢,受電滲作用的影響也大,往往不能抵抗電滲作用,故在電泳時,反而向負極倒退。而一般抗原蛋白質常帶較強的負電荷,分子又較小,所以泳動快,雖然由于電滲作用泳動速度減慢,但仍能向正極泳動。如將抗原置陰極,抗體置陽極,電泳時
對流免疫電泳的操作
1.制瓊脂板 以pH8.6離子強度0.05巴比妥緩沖液配成1%~1.5%瓊脂凝膠板,厚度2mm~3mm. 2.打孔 瓊脂冷卻后,按圖打孔,打成對的小孔數列,孔徑0.3cm~0.6cm,孔距0.4cm~1.0cm.挑去孔內瓊脂,封底。 3.加樣 一對孔中,一孔加已知(或待測)抗原,另一孔加待測
對流免疫電泳是什么?
對流免疫電泳是免疫電泳技術中的一種,還包括免疫電泳、火箭電泳等方法。在pH值8.6的瓊脂凝膠中,抗體球蛋白只帶有微弱的負電荷,而且它分子又較大,所以泳動慢,受電滲作用的影響也大,往往不能抵抗電滲作用,故在電泳時,反而向負極倒退。而一般抗原蛋白質常帶較強的負電荷,分子又較小,所以泳動快,雖然由于電滲作
什么是對流免疫電泳?
對流免疫電泳是免疫電泳技術中的一種,還包括免疫電泳、火箭電泳等方法。
對流免疫電泳的相關介紹
對流免疫電泳是免疫電泳技術中的一種,還包括免疫電泳、火箭電泳等方法。 在pH值8.6的瓊脂凝膠中,抗體球蛋白只帶有微弱的負電荷,而且它分子又較大,所以泳動慢,受電滲作用的影響也大,往往不能抵抗電滲作用,故在電泳時,反而向負極倒退。而一般抗原蛋白質常帶較強的負電荷,分子又較小,所以泳動快,雖然由
簡述對流免疫電泳的原理
在pH值8.6的瓊脂凝膠中,抗體球蛋白只帶有微弱的負電荷,而且它分子又較大,所以泳動慢,受電滲作用的影響也大,往往不能抵抗電滲作用,故在電泳時,反而向負極倒退。而一般抗原蛋白質常帶較強的負電荷,分子又較小,所以泳動快,雖然由于電滲作用泳動速度減慢,但仍能向正極泳動。如將抗原置陰極,抗體置陽極,電
對流免疫電泳的觀察結果
斷電后,將玻板置于燈光下,襯以黑色背景觀察。陽性者則在抗原抗體孔之間形成一條清楚致密的白色沉淀線。如沉淀線不清晰,可把瓊脂板放在濕盒中37℃數小時或置電泳槽過夜再觀察。
對流免疫電泳技術(CIET)
一、原理在pH8.6的瓊脂凝膠中,抗體球蛋白只帶有微弱的負電荷,在電泳時,由于電滲作用的影響,抗體球蛋白不但不能抵抗電滲作用向正極移動,反而向負極倒退。而一般抗原蛋白質帶負電荷,將抗原置于負極,將血清抗體置于正極,電泳后則在兩孔之間相遇,并在比例適當的部位形成肉眼可見的沉淀線。本法由于抗原抗體分子在
沉淀反應實驗:對流免疫電泳
對流免疫電泳是在瓊脂擴散基礎上結合電泳技術而建立的一種簡便而快速的方法。此方法能在短時間內出現結果,故可用于快速診斷,敏感性比雙向擴散技術高10-15倍。血清蛋白在PH8.6條件下帶負電荷,所以在電場作用下都向E極移動。但由于抗體分子在這樣的PH條件下只帶微弱的負電荷,而且它的分子量又較大(為r球蛋
對流免疫電泳的觀察結果
斷電后,將玻板置于燈光下,襯以黑色背景觀察。陽性者則在抗原抗體孔之間形成一條清楚致密的白色沉淀線。如沉淀線不清晰,可把瓊脂板放在濕盒中37℃數小時或置電泳槽過夜再觀察。
對流免疫電泳的觀察結果
斷電后,將玻板置于燈光下,襯以黑色背景觀察。陽性者則在抗原抗體孔之間形成一條清楚致密的白色沉淀線。如沉淀線不清晰,可把瓊脂板放在濕盒中37℃數小時或置電泳槽過夜再觀察。
對流免疫電泳的觀察結果
斷電后,將玻板置于燈光下,襯以黑色背景觀察。陽性者則在抗原抗體孔之間形成一條清楚致密的白色沉淀線。如沉淀線不清晰,可把瓊脂板放在濕盒中37℃數小時或置電泳槽過夜再觀察。
對流免疫電泳的實驗原理
在pH值8.6的瓊脂凝膠中,抗體球蛋白只帶有微弱的負電荷,而且它分子又較大,所以泳動慢,受電滲作用的影響也大,往往不能抵抗電滲作用,故在電泳時,反而向負極倒退。而一般抗原蛋白質常帶較強的負電荷,分子又較小,所以泳動快,雖然由于電滲作用泳動速度減慢,但仍能向正極泳動。如將抗原置陰極,抗體置陽極,電泳時
影響對流免疫電泳的因素
影響結果的因素(1)抗原抗體的比例:抗原抗體比例適應時容易出現沉淀帶,反之不易發生。當抗體濃度恒定時,被檢血清含甲胎蛋白濃度高時,作10倍、20倍或更高倍數稀釋可以提高陽性率。隨稀釋度的增加,抗原抗體的比例發生變化,沉淀線由靠近抗血清孔向逐步移向兩孔中間,并可出現不典型的沉淀線如弧形、八字須形、斜線
對流免疫電泳實驗失敗原因
1.電泳液的PH值不對。2.電極插反了。3.抗原抗體含量低了
影響對流免疫電泳的因素
影響結果的因素(1)抗原抗體的比例:抗原抗體比例適應時容易出現沉淀帶,反之不易發生。當抗體濃度恒定時,被檢血清含甲胎蛋白濃度高時,作10倍、20倍或更高倍數稀釋可以提高陽性率。隨稀釋度的增加,抗原抗體的比例發生變化,沉淀線由靠近抗血清孔向逐步移向兩孔中間,并可出現不典型的沉淀線如弧形、八字須形、斜線
對流免疫電泳的基本信息
免疫電泳技術是將瓊脂內電泳和凝膠內沉淀反應相結合的一種常用的免疫學方法,包括免疫電泳、對流免疫電泳和火箭電泳等方法。
對流免疫電泳的操作方法
1.制瓊脂板 以pH8.6離子強度0.05巴比妥緩沖液配成1%~1.5%瓊脂凝膠板,厚度2mm~3mm。2.打孔 瓊脂冷卻后,按圖打孔,打成對的小孔數列,孔徑0.3cm~0.6cm,孔距0.4cm~1.0cm。挑去孔內瓊脂,封底。3.加樣 一對孔中,一孔加已知(或待測)抗原,另一孔加待測(或已知)抗
對流免疫電泳的基本信息
對流免疫電泳是免疫電泳技術中的一種,還包括免疫電泳、火箭電泳等方法。在pH值8.6的瓊脂凝膠中,抗體球蛋白只帶有微弱的負電荷,而且它分子又較大,所以泳動慢,受電滲作用的影響也大,往往不能抵抗電滲作用,故在電泳時,反而向負極倒退。而一般抗原蛋白質常帶較強的負電荷,分子又較小,所以泳動快,雖然由于電滲作
對流免疫電泳的操作方法
1.制瓊脂板 以pH8.6離子強度0.05巴比妥緩沖液配成1%~1.5%瓊脂凝膠板,厚度2mm~3mm。2.打孔 瓊脂冷卻后,按圖打孔,打成對的小孔數列,孔徑0.3cm~0.6cm,孔距0.4cm~1.0cm。挑去孔內瓊脂,封底。3.加樣 一對孔中,一孔加已知(或待測)抗原,另一孔加待測(或已知)抗
關于對流免疫電泳法的簡介
對流免疫電泳法是將瓊脂內電泳和凝膠內沉淀反應相結合的一種常用的免疫學方法為免疫電泳技術中的一種,還包括免疫電泳、火箭電泳等方法。在pH值8.6的瓊脂凝膠中,抗體球蛋白只帶有微弱的負電荷,而且它分子又較大,所以泳動慢,受電滲作用的影響也大,往往不能抵抗電滲作用,故在電泳時,反而向負極倒退。
對流免疫電泳的操作方法
1.制瓊脂板 以pH8.6離子強度0.05巴比妥緩沖液配成1%~1.5%瓊脂凝膠板,厚度2mm~3mm。2.打孔 瓊脂冷卻后,按圖打孔,打成對的小孔數列,孔徑0.3cm~0.6cm,孔距0.4cm~1.0cm。挑去孔內瓊脂,封底。3.加樣 一對孔中,一孔加已知(或待測)抗原,另一孔加待測(或已知)抗
對流免疫電泳的注意事項
1.抗原抗體濃度的比例 當抗原抗體比例不適合時,均不能出現明顯可見的沉淀線。所以除了應用高效價的血清外,每份待測樣品均可做幾個不同的稀釋度來進行檢查。2.特異性對照鑒定 為了排除假陽性反應,則在待檢抗原孔的鄰近并列一陽性抗原孔,若待檢樣品中的抗原與抗體所形成的沉淀線和陽性抗原抗體沉淀線完全融合時,則