植物組織石蠟切片的制作
一、實驗目的 1.熟練掌握石蠟切片的方法。 2.掌握永久制片的制作過程,為研究植物的內部結構奠定基礎。 3.學會植物內部結構的比較研究方法。 二、實驗器具與 試劑1.器具 石蠟切片機、烘箱、顯微鏡、染色缸、小培養皿、鑷子、毛筆、吸水紙、紗布、載玻片、蓋玻片等。 2. 試劑 10%番紅水溶液、0.5%固綠(用95%的酒精配制)、酒精(100%、95%、80%、70%、50%)、二甲苯、 蒸餾 水、甘油、中性樹膠等。 三、實驗材料 幼嫩植物各部分,根據季節選擇材料。 四、實驗內容與方法 石蠟切片法是顯微技術上最重要、最常用的一種方法。它是把材料封埋在石蠟里面,用旋轉切片機切片,可以切出很薄的切片。凡是精細的工結構,大都用石蠟切片。全都過程如下: 1.固定 2.洗滌 3.脫水與硬化 4.脫酒精 2.封埋 6.切片 ......閱讀全文
植物組織石蠟切片的制作
一、實驗目的 1.熟練掌握石蠟切片的方法。 2.掌握永久制片的制作過程,為研究植物的內部結構奠定基礎。 3.學會植物內部結構的比較研究方法。 二、實驗器具與 試劑1.器具 石蠟切片機、烘箱、顯微鏡、染色缸、小培養皿、鑷子、毛筆、吸水紙、紗布、載玻片、蓋玻
石蠟切片的制作
以石蠟制作的切片,可以制成極薄的切片。一般的切片厚度要求在4—6微米。而石蠟切片不但可以達到這個要求,甚至可以切得更薄到2微米以至1微米。這一點是冰凍切片和火棉膠切片難以獲得的結果。另外,石蠟切片還便于制作大批的或是連續的切片。而且以石蠟包埋的組織塊便于長期保存。所以石蠟切片是目前各種切片制作方法中
石蠟切片的制作
以石蠟制作的切片,可以制成極薄的切片。一般的切片厚度要求在4—6微米。而石蠟切片不但可以達到這個要求,甚至可以切得更薄到2微米以至1微米。這一點是冰凍切片和火棉膠切片難以獲得的結果。另外,石蠟切片還便于制作大批的或是連續的切片。而且以石蠟包埋的組織塊便于長期保存。所以石蠟切片是目前各種切片制作方法中
石蠟切片制作基本技術
石蠟切片 石蠟切片(paraffin section) 組織學常規制片技術中最為廣泛應用的方法。石蠟切片不僅用于觀察正常細胞組織的形態結構,也是病理學和法醫學等學科用以研究、觀察及判斷細胞組織的形態變化的主要方法,而且也已相當廣泛地用于其他許多學科領域的研究中。教學中,光鏡下觀察切片標本多數是石蠟
石蠟切片和半薄切片的制作
實驗概要本方法介紹了石蠟切片和半薄切片的制作流程。主要試劑4%戊二醛固定液(pH7.0磷酸緩沖液),乙醇,二甲苯,純石蠟,蜂蠟,樹脂膠主要設備真空泵,AO手搖式切片機,Olypmus BH-2型顯微鏡,LKB超薄切片機實驗步驟1. 石蠟切片的制作?? 1) 取材固定新鮮配置4%戊二醛固定液(pH7.
石蠟切片術的制作過程
光學顯微標本的制作技術【實驗目的】了解光學顯微鏡切片制作技術的基本方法步驟。【實驗原理】采用光學顯微鏡研究一般生物體的內部結構,在自然狀態下是無法觀察清楚的,多數動、植物材料都必須經過某種處理,將組織分離成單個細胞或薄片,光線才能通過細胞。為了適應這個需要,就產生了光學顯微鏡制片技術。光學顯微鏡的制
植物組織化學顯微鏡標本片制作方法_石蠟切片法
實驗方法原理石蠟切片技術是顯微技術上最重要最常用的一種方法。其優點在于①應用范圍廣,幾乎適用于所有的植物材料;②能將材料切成厚薄均一的切片,較清楚地顯現細胞、組織的細微結構;③能切成連續蠟帶,可觀察細胞和組織的動態發生及層次變化過程;④切片可以長期保存,便于以后觀察比較。缺點是:操作程序比較復雜,需
HE染色石蠟切片制作的基本過程
HE染色石蠟切片制作的基本過程:1、取材與固定從人或動物新鮮尸體上取下組織塊(一般厚度不超過0.5厘米)投入預先配好的固定液中(10%福爾馬林,Bouin氏固定液等)使組織、細胞的蛋白質變性凝固,以防止細胞死后的自溶或細菌的分解,從而保持細胞本來的形態結構。2、脫水透明一般用由低濃度到高濃度酒精作脫
冷凍組織切片制作
實驗試劑液氮,干冰,1%明膠,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀釋抗體,辣根過氧化物酶標記的二抗,DAB/金屬鹽試劑,3%過氧化氫,0.3%(W/V)氯化鎳貯存液,Harris蘇木精,乙醇實驗設備載玻片,Whatman 1#濾紙,低倍光學顯微鏡實驗材料未受損傷的組織
病理制片技術——組織石蠟切片
組織經石蠟包埋后制成的蠟塊,用切片機制成切片的過程為石蠟切片法。石蠟切片法現使用的切片機有平推式切片機、輪轉式切片機兩種。一、平推式切片機石蠟切片法1.切片前的準備:清洗過的載物片(或免清洗的),毛筆,鉛筆,小竹片,水槽,霧化器,攤片器,切片刀,刀架。2.切片制作步驟:刀架的粗削部放在頭端,在切片機
普通組織石蠟包埋切片步驟
1、取材:新鮮組織固定于4%多聚甲醛24h以上。將組織從固定液取出在通風櫥內用手術刀將目的部位組織修平整,將修切好的組織和對應的標簽放于脫水盒內。 2、脫水:將脫水盒放進吊籃里于脫水機內依次梯度酒精進行脫水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-無水乙醇I 30min
組織石蠟包埋和切片技術
包埋劑embedding?agent? 在制作切片或超薄切片時,由于組織是柔軟的,或局部的軟硬不均,這樣制作厚薄均勻的切片是困難的。所以有必要用一定物質浸透組織內部,整個組織一樣硬化,以利于切成薄片,這種物質叫做包埋劑。一股用光學顯微鏡觀察的切片,用石蠟、火棉膠、炭蠟、明膠等作包埋劑;電子顯微鏡則
組織病理實驗_石蠟切片法
實驗方法原理石蠟切片是最基本的切片技術,冰凍切片和超薄切片等都是在石蠟切片基礎上發展起來的。蘇木素與伊紅對比染色法(簡稱H.E.對染法)是組織切片最常用的染色方法。這種方法適用范圍廣泛,對組織細胞的各種成分都可著色,便于全面觀察組織構造,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長期保存。實驗
冷凍組織切片的制作
實驗概要本實驗介紹了冷凍組織切片制作的基本操作流程。主要試劑液氮,干冰,1%明膠,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀釋抗體,辣根過氧化物酶標記的二抗,DAB/金屬鹽試劑,3%過氧化氫,0.3%(W/V)氯化鎳貯存液,Harris蘇木精,乙醇主要設備載玻片,Whatm
石蠟切片制作過程有哪些步驟
石蠟切片操作步驟:1、取材2、固定3、脫水:30%--50%---70%(每步60分鐘)---85%---95%--100%---100%(每步30鐘)。4、透明:轉入1/2二甲苯+1/2無水酒精混合液20ml透明1h,純二甲苯20ml透明1h,再用純二甲苯20ml透明40min,并回收各液。5、浸
石蠟塊做超薄切片的樣品制作流程
石蠟塊做超薄切片的樣品制作流程如下:?1、取材:從石蠟塊上相應部位切下約1mm3?的小塊。?2、溶蠟:將取下的標本放在一張濾紙上,40℃烘箱內烘1小時,然后轉放入二甲苯溶液中40℃烘箱內繼續浸泡8—12h。?3、水化:純丙酮30分鐘、90%、80%、70%丙酮各15分鐘。?4、漂洗:用緩沖液漂洗(0
冷凍組織切片的制作實驗
實驗試劑液氮,干冰,1%明膠,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀釋抗體,辣根過氧化物酶標記的二抗,DAB/金屬鹽試劑,3%過氧化氫,0.3%(W/V)氯化鎳貯存液,Harris蘇木精,乙醇實驗設備載玻片,Whatman 1#濾紙,低倍光學顯微鏡實驗材料未受損傷的組織
石蠟切片制作(蘇木精伊紅對染法)
石蠟切片制作可以用于:(1)保持細胞間的正常的相互關系,能較好和較長時間地保留細胞的原貌。(2)是光學顯微鏡的主要制片方法。實驗方法原理石蠟切片是最基本的切片技術,冰凍切片和超薄切片等都是在石蠟切片基礎上發展起來的。蘇木素與伊紅對比染色法(簡稱 H.E. 對染法)是組織切片最常用的染色方法。這種方法
光學顯微鏡的石蠟切片制作過程
? ? I.將組織塊放入帶標記的盒子內,光學顯微鏡置于200m1液體中;? ? 2.按選定的溫度加熱;測定溫度。? ? 3.光學顯微鏡3%戊二醛預固定15秒鐘;緩沖液沖洗3次,光學顯微鏡每次3分鐘;1 %OsO;固定15秒鐘。如中斷操作,預固定后仍需在4℃下保存.? ? 用微波脫水、浸透每一步驟只需
組織免疫熒光是用石蠟切片還是冰凍切片
二者應該都是可以的,具體要看自身的實驗條件哪個操作更方便以及抗體的性質。看你的實驗要求,冰凍片要求較高(低溫環境,液氮,冰凍切片機,OCT包埋劑等等),石蠟片的制作就比較簡單,試劑也較便宜。另外看你購買的抗體適用于哪種片子免疫組化的話,一般大都使用石蠟切片。免疫熒光染色的話,都可以的,冰凍切片比較容
石蠟切片制作(蘇木精伊紅對染法)(一)
實驗方法原理 石蠟切片是最基本的切片技術,冰凍切片和超薄切片等都是在石蠟切片基礎上發展起來的。蘇木素與伊紅對比染色法(簡稱 H.E. 對染法)是組織切片最常用的染色方法。這種方法適用范圍廣泛,對組織細胞的各種成分都可著色,便于全面觀察組織構造,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可
石蠟切片制作(蘇木精伊紅對染法)(二)
5.透明純酒精、二甲苯等量混合液15min,二甲苯Ⅰ15min、Ⅱ15min(至透明為止)。由于乙醇與石蠟不相溶,而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蠟,所以脫水后還要經過二甲苯以過渡。當組織中全部被二甲苯占有時,光線可以透過,組織呈現出不同程度的透明狀態。透明注意事項(1)使用透明劑時,要隨時蓋緊蓋子,
普通組織石蠟包埋切片的注意事項
1、固定劑應有足夠的量,一般為組織塊體積的10∽15倍。 2、根據組織的不同和實驗目的的不同,選取不同的固定劑。 3、固定時間依材料大小、固定劑種類而異,可從1小時到幾時小時,有時中間需要更新固定劑。某些固定劑對組織的硬化作用較強,作用時間應嚴加控制,不能過長。 4、取材切面要平整,厚度不
石蠟切片與冰凍切片
一、組織和細胞標本類型:(一) 組織標本類:1、 石蠟切片:組織形態保存好2、 冰凍切片:抗原性保存好(二)細胞標本類:1、組織印片 2、細胞培養片(細胞爬片) 3、細胞涂片二、組織取材1、腦組織和神經組織應采用灌注固定后,再進行后固定。2、組織取材注意事項:(1)標本新鮮:組織要求離體后30min
石蠟切片免疫組織化學染色
主要試劑染色缸;染色架;保濕盒;晾片盤;微量移液器;0.2MPBS,乙醇,二甲苯,BSA,中性樹膠等實驗步驟1.?????石蠟切片放置在60℃恒溫箱中烘烤120分鐘;2.?????脫蠟和水化:二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→無水乙醇(5min×2次)→95%乙醇(5min×2)→90%(
石蠟組織切片的保存方法和注意事項
許多實驗室研究人員習慣將組織蠟塊切片后長期保存在室溫條件下,而切片后的組織在室溫下長期保存抗原易損失。一些研究發現,切片在室溫下保存3個月以上,免疫組化染色結果會出現減弱,甚至陰性。因此,有學者進行了新、舊切片保存時間對照實驗。選擇11種不同組織蠟塊每例連續切10片,共110片,常溫空氣中放置1個月
制作組織切片時包埋的目的
目的浸蠟是組織經過脫水、透明后在熔化的石蠟內浸沒的過程稱浸蠟。包埋是使石蠟變硬并將組織包埋進去以利于切片和觀察的過程。目的是去除組織中的透明劑而代之以石蠟,并浸入組織內部,把軟組織變為適當硬度的蠟塊,以便切成薄片。1、概念包埋:指用包埋劑支撐組織的過程。2、種類石蠟、火棉膠、樹脂、OCT、膠水,其中
制作組織切片時包埋的目的
目的浸蠟是組織經過脫水、透明后在熔化的石蠟內浸沒的過程稱浸蠟。包埋是使石蠟變硬并將組織包埋進去以利于切片和觀察的過程。目的是去除組織中的透明劑而代之以石蠟,并浸入組織內部,把軟組織變為適當硬度的蠟塊,以便切成薄片。1、概念包埋:指用包埋劑支撐組織的過程。2、種類石蠟、火棉膠、樹脂、OCT、膠水,其中
制作組織切片時包埋的目的
目的浸蠟是組織經過脫水、透明后在熔化的石蠟內浸沒的過程稱浸蠟。包埋是使石蠟變硬并將組織包埋進去以利于切片和觀察的過程。目的是去除組織中的透明劑而代之以石蠟,并浸入組織內部,把軟組織變為適當硬度的蠟塊,以便切成薄片。1、概念包埋:指用包埋劑支撐組織的過程。2、種類石蠟、火棉膠、樹脂、OCT、膠水,其中
制作組織切片時包埋的目的
目的浸蠟是組織經過脫水、透明后在熔化的石蠟內浸沒的過程稱浸蠟。包埋是使石蠟變硬并將組織包埋進去以利于切片和觀察的過程。目的是去除組織中的透明劑而代之以石蠟,并浸入組織內部,把軟組織變為適當硬度的蠟塊,以便切成薄片。1、概念包埋:指用包埋劑支撐組織的過程。2、種類石蠟、火棉膠、樹脂、OCT、膠水,其中