twistDx的重組酶聚合酶擴增(RPA)技術原理
twistDx 的重組酶聚合酶擴增(RPA)將徹底改變在資源有限的現場環境中擴增和檢測核酸的能力。RPA 技術原理RPA 體系的重點是重組酶,這些酶與寡核苷酸引物形成復合體,并使引物與雙鏈 DNA 中的同源序列配對。單鏈 DNA 結合(SSB)蛋白與被取代的 DNA 鏈結合,并使形成的 D 環保持穩定。然后從引物啟動由聚合酶介導的 DNA 擴增,但前提是存在靶標序列。一旦啟動,擴增反應將快速進行,因此開始時只需一點靶標 DNA 拷貝數,高特異性 DNA 擴增在數分鐘內即可達到可檢出水平。RPA 循環 RPA 的技術特點為什么選擇 RPA 方法?◇ 速度RPA 非常快速,在 37~42 °C 這一通常最適宜的反應溫度下,只需少量核酸分子即可在 3~10 分鐘(通常)內擴增至可檢出水平,但這將取決于靶標大小。在大部分情況下,只需要一個人即可在半小時內采集樣本、制備樣本、運行檢測并取得結果,并且無需專業培訓。◇ ......閱讀全文
twistDx-的重組酶聚合酶擴增(RPA)技術原理
twistDx 的重組酶聚合酶擴增(RPA)將徹底改變在資源有限的現場環境中擴增和檢測核酸的能力。RPA 技術原理RPA 體系的重點是重組酶,這些酶與寡核苷酸引物形成復合體,并使引物與雙鏈 DNA 中的同源序列配對。單鏈 DNA 結合(SSB)蛋白與被取代的 DNA 鏈結合,并使形成的 D 環保
RPA(重組酶聚合酶擴增)技術原理及RPA與LAMP對比
英國TwistDx公司(前身為ASM科技有限公司)成立于1999年,基于英國劍橋Babraham研究院建立的生物技術公司。該公司通過突破等溫DNA擴增,開發的重組酶聚合酶擴增ZL技術(RPA),被譽為DNA診斷領域的革命性創新。(http://www.twistdx.co.uk)??????????
重組酶聚合酶擴增(RPA)技術簡介
核酸檢測革命:可替代PCR的犀利技術——RPA重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。RPA技術主要依賴于三種酶:能結合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA
重組酶聚合酶擴增敘述
重組酶聚合酶擴增(RPA),被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。RPA技術主要依賴于三種酶:能結合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,最佳反應溫度在37℃左右。重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA復合物,能在雙鏈D
核酸檢測的一場革命,可替代PCR的犀利技術
自PCR技術誕生以來已經有三十年了。從經典PCR、實時定量PCR再到現在的數字PCR,這一技術在不斷蛻變卻從未淡出我們的視野。 英國TwistDx Inc公司開發的重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被稱為是可以替代PCR的核酸
PCR的替代技術RPA全攻略疑難解答
?? ? ? 重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術(由英國公司TwistDx Inc開發)。以此為基礎的TwistAmp? 核酸擴增產品,能夠在15分鐘內進行常溫下的單分子核酸檢測。
等溫擴增到底行不行?
最近又看到一些同行寫的關于等溫擴增的文章。不禁想起幾年前看到的RPA技術介紹。當時第一次看到這個技術的時候,簡直可以用“震驚”、“驚艷”來形容。擴增速度真快啊,十幾分鐘就能出結果,比現在吭哧吭哧做PCR豈不是方便多了!可是幾年過去了,似乎也沒看到基于RPA技術的臨床產品上市。說真的是有點失望的。就像
多酶恒溫核酸快速擴增技術MIRPA的引物與探針設計指導
近期,頂級學術期刊連發兩篇頂級論文,上半年引爆生物圈的華人科學家張鋒教授團隊又有新動作!這次,他在一月內,分別在《Nature》、《Science》連發兩篇論文!他將CRISPR-Cas13a改造成了靈敏度達到了阿摩爾級(aM,10的負18次方摩爾每升),可以檢測單分子的SHERLOCK技術。而
多酶恒溫核酸快速擴增技術MIRPA的引物與探針設計指導
近期,頂級學術期刊連發兩篇頂級論文,上半年引爆生物圈的華人科學家張鋒教授團隊又有新動作!這次,他在一月內,分別在《Nature》、《Science》連發兩篇論文!他將CRISPR-Cas13a改造成了靈敏度達到了阿摩爾級(aM,10的負18次方摩爾每升),可以檢測單分子的SHERLOCK技術。而這其
RPA重組酶是什么?
2006 年,Piepenburg 等首次提出了重組酶聚合酶擴增反應(recombinase polymerase amplification,RPA)。它是由重組酶(T4 uvsX)、聚合酶(Bsu)和單鏈結合蛋白(gp32)以及兩條特異性的上下游引物參與的等溫擴增。 首先, T4 uvsX
酶促重組等溫擴增技術(ERA)的反應原理
1、重組酶首先與上下游引物結合,尋找同源雙鏈DNA,一旦定位發生鏈交換2、同時SSB蛋白與親本鏈綁定,阻止其與其脫離的模板鏈發生相互作用3、DNA聚合酶從上下游引物的3”端啟動合成,形成兩條雙鏈DNA,如此循環重復擴增
什么酶重組等溫擴增技術?
通過模擬生物體遺傳物質自身擴增復制的原理,將來源于細菌,病毒和噬菌體的特定重組酶、外切酶、聚合酶等多酶體系進行改造突變并篩選其功能,通過不同的核酸擴增反應體系進行優化組合,從而獲得核心的重組等溫擴增體系,建立特殊擴增反應體系,在37-42℃恒溫條件下,可將微量DNA/RNA的特異性區段在數分鐘內擴增
一文搞定恒溫擴增——RPA/RAA
分子診斷技術今日不同以往,著實借力突飛猛進,恒溫擴增技術由于其擴增期間不需要特殊的儀器設備而更受矚目。恒溫擴增方法有多種,今天就回顧RPA/RAA,讓大家一文通俗搞定~~嗯啊, 如果有疑問,決定開小灶,包會!哈哈~~為了確保大家所認知的基本概念是一致的,請先了解以下名詞解釋重組酶聚合酶擴增技術,RP
搞定恒溫擴增分子診斷(RPA/RAA)
分子診斷技術今日不同以往,著實借力突飛猛進,恒溫擴增技術由于其擴增期間不需要特殊的儀器設備而更受矚目。恒溫擴增方法有多種,今天就回顧RPA/RAA,讓大家一文通俗搞定!為了確保大家所認知的基本概念是一致的,請先了解以下名詞解釋重組酶聚合酶擴增技術,RPA, recombinase polymeras
核酸檢測革命:rpa技術原理
重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。本專題為大家詳細介紹RPA的原理、引物設計、疑難解答以及在致病菌檢測、病毒檢測以及癌癥研究中的靈活應用。 自PCR技術誕生以來已經有三十年了,從經典PCR
快速核酸檢測黑科技——RPA
面對突如其來的新冠疫情核酸檢測引來發展新高潮尤其在分子診斷領域傳統核酸分子檢測技術不斷蛻變和創新從未淡出我們的視野經歷了經典PCR、實時定量PCR再到現在的數字PCR三個階段這些都離不開PCR的高溫變性低溫退火和延伸離不開精準控溫的PCR儀今天小編給你介紹一個黑科技可以替代PCR的核酸檢測技術--重
PCR、qPCR、dPCR你需要知道的事兒
??上世紀八十年代Cetus Corporation公司的化學家Kary Mullis發明了PCR,如今DNA擴增儼然已經成為了生物學研究的基礎。三十多年以來,人們為了解決研究中出現的新問題新需求,不斷對這一經典技術進行改良。從經典PCR、實時定量PCR再到現在的數字PCR,PCR技術在不斷
PCR、qPCR、dPCR你需要知道的事兒
上世紀八十年代Cetus Corporation公司的化學家Kary Mullis發明了PCR,如今DNA擴增儼然已經成為了生物學研究的基礎。三十多年以來,人們為了解決研究中出現的新問題新需求,不斷對這一經典技術進行改良。從經典PCR、實時定量PCR再到現在的數字PCR,PCR技術在不斷蛻變卻從
酶促重組等溫擴增(ERA)的原理和核心技術
酶促重組等溫擴增技術(ERA技術)是一種等溫核酸擴增技術,它是利用抗體制藥領域先進的Molecular Design、Directed Evolution、Affinity Maturation 等技術手段,將來源于細菌,病毒和噬菌體的特定工具酶進行改造突變并篩選其功能,通過不同的核酸擴增反應體系進
總統推薦、FDA特批的ID-NOW-5分鐘檢測新冠病毒是啥原理?
根據雅培所說,其ID NOW COVID-19檢測儀非常輕巧,只有6.6磅重,相當于一臺面包機大小。無需將其送到中心實驗室進行分析,而是直接在急救室或緊急護理診所進行,這能減少部分患者所面臨的長達數天的檢測結果等待時間。醫生將采集到病人鼻咽拭子的棉簽直接插入機器,測試新冠病毒陽性反應只需要5分鐘時間
關于基因擴增技術—聚合酶鏈反應的擴增產物分析
基因擴增技術—聚合酶鏈反應擴增DNA片段只是一個重要手段。擴增片段的檢測和分析才是目的,根據研究對象和目的的不同而采用不同的分析法。瓊脂糖凝膠電泳可幫助判斷擴增產物的大小,有助于擴增產物的鑒定,點雜交除可鑒定擴增產物外,還有助于產物的分型;Southern雜交分析可從非特異擴增產物中鑒定出特異產
RPA技術原理與RPA產品形態簡述
回顧2019年,RPA機器人流程自動化行業迎來了一個快速發展的機遇。RPA創業者得到了國內投資人的認可,一些RPA公司也接連拿到千萬美金級別的融資,這在當下遇冷的資本市場環境下顯得格外耀眼。 眼下,RPA已在金融、財會、電信、能源、制造、物流等行業領域生根發芽。當下的RPA技術可以替代各行業企
酶促重組等溫擴增技術(ERA)的應用介紹
1、研究診斷領域:針對細胞培養中的支原體污染,提供一種快速、簡單、靈敏的檢測方法,只需要20分鐘便能得出結果2、公共衛生領域:針對危害公眾健康的呼吸道傳染性病原,腸道致病病原及生殖系統病原進行快速檢測3、食品安全領域:針對致病微生物、動物源性成分和轉基因農產品進行快速現場檢測4、農業生產領域:針對水
核酸檢測革命:可替代PCR的犀利技術——RPA
導讀重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。本專題為大家詳細介紹RPA的原理、引物設計、疑難解答以及在致病菌檢測、病毒檢測以及癌癥研究中的靈活應用。自PCR技術誕生以來已經有三十年了,從經典PCR、實
關于基因擴增技術—聚合酶鏈反應的影響因素耐熱DNA聚合酶的介紹
基因擴增技術—聚合酶鏈反應之所以能得到廣泛應用,主要是因為Taq DNA聚合酶取代了大腸桿菌DNA聚合酶I大片段。Taq DNA聚合酶是從水生棲熱菌Thermus Aquaticus(Taq)中分離出的熱穩定性DNA聚合酶,使用Taq DNA聚合酶不僅簡化了PCR程序,也極大地增加了基因擴增技術
替代PCR,RPA成為致病菌檢測的得力工具
重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術(由英國公司TwistDx Inc開發)。以此為基礎的TwistAmp? 核酸擴增產品,能夠在15分鐘內進行常溫下的單分子核酸檢測。該技術對硬件設備的要求很低
核酸檢測革命:可替代PCR的犀利技術——RPA
自PCR技術誕生以來已經有三十年了,從經典PCR、實時定量PCR再到現在的數字PCR,這一技術在不斷蛻變卻從未淡出我們的視野。很多人的實驗根本離不開PCR。筆者曾經也接觸PCR很長一段時間,加樣、設置程序、等待、檢測。這些過程看起來容易,但實驗結果卻總是會出人意料,很多時候根本不知道是哪里出了錯。那
等溫擴增技術的原理及應用
等溫擴增技術(isothermal amplification technology,ITA)是近年來發展起來的基于恒溫擴增的新型核酸擴增技術,主要包括環介導等溫擴增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)[1]、交叉引物擴增(crossing pr
關于基因擴增技術—聚合酶鏈反應的試劑介紹
(1)基因擴增技術—聚合酶鏈反應— 引物:決定擴增的特異性。根據檢測的DNA不同,選用不同引物,每種病原微生物都有自己特異的引物。 (2)基因擴增技術—聚合酶鏈反應—?耐熱的DNA聚合酶:此酶是從耐熱細菌中分離出來的,能耐受高溫90℃-100℃。 (3)基因擴增技術—聚合酶鏈反應—?10×P
簡述基因擴增技術—聚合酶鏈反應的標本制備
在將Taq DNA聚合酶引入基因擴增技術—聚合酶鏈反應反應,并使之達到自動化之后,基因擴增技術—聚合酶鏈反應反應已變得十分的簡單了。但是PCR樣品的采集及制備卻并非同樣簡單,而且,許多PCR的失敗都歸因于標本的制備不當。用于PCR的標本必須經適當處理后才能使用,因為標本中的許多雜質能抑制Taq