高壓液相色譜常見問題
(一)渦流擴散(Eddy diffusion)流動相碰到較大的固體顆粒,就像流水碰到石頭一樣產生渦流。如果柱裝填得不均勻,有的部分松散或有細溝,則流動相的速度就快;有的部位結塊或裝直緊密則流就慢,多條流路有快有慢,就使區帶變寬。因此,固相載體的顆粒要小而均勻,裝柱要松緊均一,這樣渦流擴散小,柱效率高。(二)分子擴散(Molecular diffusion)分子擴散就是物質分子由濃度高的區域向濃度低的區域運動,也稱縱向分子擴散。要減少分子擴散就要采用小而均勻的固相顆粒裝柱。同時在操作時,如果流速太慢,被分離物質停留時間長,則擴散嚴重。(三)質量轉移(Mass transfer)被分離物質要在流動相與固定相中平衡,這樣才能形成較窄的區帶。在液相色譜中,溶質分子要在兩個液相之間進行分配,或在固相上被吸附和解吸附均需要一定的時間。當流速快時,轉移速度慢,來不及達到平衡動相就向前移,這各物質的非平衡移動,使區帶變寬。(四)動相流速......閱讀全文
高壓液相色譜常見問題
(一)渦流擴散(Eddy diffusion)流動相碰到較大的固體顆粒,就像流水碰到石頭一樣產生渦流。如果柱裝填得不均勻,有的部分松散或有細溝,則流動相的速度就快;有的部位結塊或裝直緊密則流就慢,多條流路有快有慢,就使區帶變寬。因此,固相載體的顆粒要小而均勻,裝柱要松緊均一,這樣渦流擴散小,
高壓液相色譜
Martin 和 Synge在1941年就提出高效相色譜的設想,然而直到六十年代后期,由于各種技術的發展,高效液相色譜才付諸實現。這種色譜技術曾被稱為高速液相色譜(HighSpeed Liquid Chromatography),高壓液相色譜(High Parss-ure Lipuid Chroma
高壓液相色譜簡述
Martin 和Synge在1941年就提出高效相色譜的設想,然而直到六十年代后期,由于各種技術的發展,高效液相色譜才付諸實現。這種色譜技術曾被稱為高速液相色譜(HighSpeed Liquid Chromatography),高壓液相色譜(High Parss-ure Lipuid C
高壓液相色譜特點簡介
高壓 液相色譜法以液體為流動相(稱為載液),液體流經色譜柱,受到阻力較大,為了迅速地通過色譜柱,必須對載液施加高壓。一般可達150~350×105Pa。 高速 流動相在柱內的流速較經典色譜快得多,一般可達1~10ml/min。高效液相色譜法所需的分析時間較之經典液相色譜法少得多,一般少于1
高壓液相色譜淋洗劑
?高壓液相色譜淋洗劑高壓液相色譜淋洗劑又稱流動相或洗脫劑,是高壓液相色譜分析中必不可少的試劑,其作用有兩個,一是攜帶樣品前進,二是給分析樣品提供一個分配相,進而調節選擇性,達到混合樣品的分離。高壓液相色譜法根據固定相的類型和分離原理可分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法、離子交換色譜法、凝膠滲透色譜法
高壓液相色譜的概念
高壓液相色譜又叫高效液相色譜(High Performance Liquid Chromatography,HPLC),是利用更細的高效填料進行分離的,具有高柱效、高流速、分離時間短的特點。與經典液相色譜相比,高效液相色譜有很大不同,表1列出了一些不同之處。
高壓液相色譜淋洗劑
高壓液相色譜淋洗劑高壓液相色譜淋洗劑又稱流動相或洗脫劑,是高壓液相色譜分析中必不可少的試劑,其作用有兩個,一是攜帶樣品前進,二是給分析樣品提供一個分配相,進而調節選擇性,達到混合樣品的分離。高壓液相色譜法根據固定相的類型和分離原理可分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法、離子交換色譜法、凝膠滲透色譜法、
液相色譜高壓輸液系統結構
高壓輸液系統由溶劑貯存器、高壓泵、梯度洗脫裝置和壓力表等組成。
高壓液相制備色譜儀
高壓液相制備色譜儀是一種用于中醫學與中藥學、產品應用相關工程與技術領域的分析儀器,于2016年11月21日啟用。 技術指標 Waters 2545 Binary Gradient Module,二元梯度制備泵。 主要功能 對液體中的成分進行定性定量分析,同時可對復雜相中的各種成分,特別是
色譜分析技術:高壓液相色譜
一、分類高效液相色譜法可分為四個基本類型:即液-固色譜法,鍵合相色譜法,離子交換色譜法及體積排阻色譜法。(一)液-固色譜法液-固色譜法通常稱吸附色譜法,吸附劑有活性碳,氧化鋁和硅膠,在液-固色譜法中用的載體都是硅膠。硅膠對溶質,分子的吸附能力不是平均分布在整個硅脫表面的,在硅膠表面有一些區域與溶質分
高效液相色譜(HPLC)常見問題
1、HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法樣品量不足:解決辦法為增加樣品量樣品未從柱子中流出:可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子樣品與檢測器不匹配:根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器檢測器衰減太多:調整衰減即可。檢測器時間常數太大:解決辦法為降低時間參數檢測器池窗污染:解決辦法為清洗池窗。檢測池
高效液相色譜(HPLC)常見問題
1、HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法?樣品量不足:解決辦法為增加樣品量樣品未從柱子中流出:可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子樣品與檢測器不匹配:根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器檢測器衰減太多:調整衰減即可。檢測器時間常數太大:解決辦法為降低時間參數檢測器池窗污染:解決辦法為清洗池窗。檢測
高壓液相色譜出峰太早好嗎
液相色譜儀了峰早當然好了,如果峰型正常,分離效果好,當然是分析時間越短越好。兩個前提是必須的:分離效果正常,峰型對稱。液相色譜儀的目的就是分離樣品進行分析,只要不影響分析結果,出峰越早越好。
高壓液相色譜(HPLC)系統組成(二)
四、檢測器?? ??檢測器是HPLC儀的三大關鍵部件之一。其作用是把洗脫液中組分的量轉變為電信號。HPLC的檢測器要求靈敏度高、噪音低(即對溫度、流量等外界變化不敏感)、線性范圍寬、重復性好和適用范圍廣。?1.分類?1)按原理可分為光學檢測器(如紫外、熒光、示差折光、蒸發光散射)、熱學檢測器(如吸附
高壓液相色譜(HPLC)系統組成(一)
?HPLC系統一般由??輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、數據記錄及處理裝置?等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測器是關鍵部件。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機、自動進樣器、預柱或保護柱、柱溫控制器等,現代HPLC儀還有微機控制系統,進行自動化儀器控制和數據處理。制備型HPLC儀還備有自動餾分收集裝置
高壓液相色譜淋洗劑的作用
高壓液相色譜淋洗劑高壓液相色譜淋洗劑又稱流動相或洗脫劑,是高壓液相色譜分析中必不可少的試劑,其作用有兩個,一是攜帶樣品前進,二是給分析樣品提供一個分配相,進而調節選擇性,達到混合樣品的分離。
高壓液相色譜的操作注意要點
1)首先對流動相進行過濾,根據需要選擇不同的濾膜,一般為有機系和水系,常用的孔徑為0.20um和0.45um。 2)對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。 3)正常情況下,儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘,然后再進入測試用流動相(如流動相為緩沖試劑,則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘,直
高壓液相色譜的特點有哪些?
1、高壓:液相色譜法以液體為流動相(稱為載液),液體流經色譜柱,受到阻力較大,為了迅速地通過色譜柱,必須對載液施加高壓。一般可達150~3.5萬KPa。 2、高速:流動相在柱內的流速較經典色譜快得多,一般可達1~10ml/min。高效液相色譜法所需的分析時間較之經典液相色譜法少得多,一般少于
色譜柱在高壓液相色譜中的應用
色譜柱的維護與保養在高壓液相色譜中的應用 高效液相色譜(HPLC)是20世紀60年代后期發展起來的分離分析技術,是現代分離測定的重要手段。問世以來,因其具有分離效能高、分析速度快、檢測靈敏度好、能分析高沸點但不能氣化的熱不穩定生理活性物質的特點而被廣泛應用于生物化學、藥物及臨床分析。高效液相色譜柱
色譜柱在高壓液相色譜中的應用
摘要:科學技術的發展,使得色譜技術也得到進一步的發展,不斷有新的聯用的技術得到應用。生物醫學的發展,也不斷要求高靈敏和高選擇性的方法對研究的對象進行定性和定量的研究。 關鍵詞:色譜柱 維護與保養 高壓液相色譜 應用 0 引言 色譜作為一種分離技術與方法,自本世紀初起已經有100多年
液相色譜常見問題及處理辦法
問:用HPLC進行分析時保留時間有時發生漂移,有時發生快速變化,原因何在?如何解決?答:關于漂移問題:1. 溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定2. 流動相發生變化,解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等3. 柱子未平衡好,需對柱子進行更長時間的平衡 關于快速變化問題 1. 流速發生變化
液相色譜常見問題及處理辦法
一、問:用HPLC進行分析時,保留時間有時發生漂移,有時發生快速變化,原因何在?如何解決??關于漂移問題:?1. 溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定。?2. 流動相發生變化,解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等。?3. 柱子未平衡好,需對柱子進行更長時間的平衡。?關于快速變化問題:?
液相色譜常見問題及處理方法
HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法 1、樣品量不足,解決辦法為增加樣品量 2、樣品未從柱子中流出。可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子 3、樣品與檢測器不匹配。根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器 4、檢測器衰減太多。調整衰減即可。 5、檢測器時間常數太大。解決辦法為降低時間
液相色譜常見問題及處理辦法
一、問:用HPLC進行分析時,保留時間有時發生漂移,有時發生快速變化,原因何在?如何解決?關于漂移問題:1. 溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定。2. 流動相發生變化,解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等。3. 柱子未平衡好,需對柱子進行更長時間的平衡。關于快速變化問題:1. 流速發
什么是高壓液相色譜分析?
高壓液相色譜又稱“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高壓液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。該方
高壓液相色譜操作的注意事項
1)流動相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。 2)柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要讓液體過柱子。 3)所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。 4)壓力不能太大,最好不要超過150kgf/cm2 . 5)因為緩沖試劑遇有機溶劑,會結晶,有損色譜柱
高壓液相色譜淋洗劑的相關介紹
高壓液相色譜淋洗劑又稱流動相或洗脫劑,是高壓液相色譜分析中必不可少的試劑,其作用有兩個,一是攜帶樣品前進,二是給分析樣品提供一個分配相,進而調節選擇性,達到混合樣品的分離。高壓液相色譜法根據固定相的類型和分離原理可分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法、離子交換色譜法、凝膠滲透色譜法、親和色譜法等幾
高壓快速液相制備色譜儀概述
高壓快速液相制備色譜儀是一種用于化學領域的分析儀器,于2017年6月23日啟用。 技術指標 泵流量范圍:1-250ml/min;泵最大壓力:250bar(3625psi); 四元梯度泵:實現四元梯度洗脫;檢測器波長范圍:200-600nm,支持雙波長同時顯示,支持全波長掃描;UV顯示范圍:0
液相色譜樣品預處理的常見問題
1、色譜圖中出現無關的峰,原因有可能是樣品過濾器帶來污染,解決方法如下: (1)將過濾器浸泡在樣品溶劑中并進樣試驗; (2)改變過濾器類型; (3)采用交替清洗技術; 2、一些或全部化合物的峰比預期的小,尤其是低濃度的樣品,原因可能是樣品過濾器表面吸附下降,解決方法如下: (1)改變過
蛋白分離色譜與高壓制備液相色譜異同討論
蛋白分離色譜與高壓制備液相色譜異同討論快速蛋白液相色譜(FPLC)、中壓液相色譜(MPLC)、低壓液相色譜(LPLC)是近年來從HPLC基礎上發展的新型色譜技術,其中FPLC能以極快的速度把復雜混合物分離,可在短時間內大量純化樣品,具有柱容量大、回收效率高及生物大分子不易失活等特性,在生命科學研究及