果蠅RNA的大規模制備
試劑、試劑盒 5mol LLiCl 70% 乙醇 酚：氯仿（1:1) 20 mg ml 蛋白酶 K 95%(V V) 乙醇 .RNA 勻漿緩沖液 3mol L 乙酸鈉實驗步驟 一 材料與設備1)5mol/L LiCl2)70% 乙醇：70% (V/V)Ethanol，l0 mmol/L Tris-HCl(pH7.5)3) 酚：氯仿（1:1): 酚用 0.1mol/L Tris-HCl(PH8.0) 平衡4)20 mg/ml 蛋白酶 K5)95% (V/V) 乙醇6)RNA 勻漿緩沖液：0.5%(m/V)SDS, 10 mmol/L EDTA\(PH8.0)，50 mmol/L NaCl，高壓滅菌，加入 Tris-HCl (PHI7.5) 至終濃度為 50 mmol/L7)3mol/L 乙酸鈉 ( PH5.5 )。二 操作方法1) 吸取 2 mlRNA 勻漿緩沖液到 7 ml 的 Dounce 勻漿器中。2) 加入 3......閱讀全文
小規模快速制備果蠅RNA
小規模快速制備果蠅RNA ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 Northern 樣品緩沖液 ?lmol L 乙酸
小規模快速制備果蠅RNA
試劑、試劑盒 Northern 樣品緩沖液 lmol L 乙酸 酚氯仿 DEPC 處理的水 GHCL 溶液 無水乙醇實驗步驟 一 材料與設備1)Northern 樣品緩沖液：2.2mol/L 甲醛，1mol/LMOPS，50% 甲酰胺2)lmol/L 乙酸3) 酚：氯仿（1:1)4)DEPC 處理的
2.3.3－小規模快速制備果蠅RNA
鹽酸胍可在裂解細胞的同時快速抑制 RNA 酶的活性，本方法利用這特點來分離果蠅 RNA試劑、試劑盒Northern 樣品緩沖液lmol L 乙酸酚氯仿DEPC 處理的水GHCL 溶液無水乙醇實驗步驟一 材料與設備1)Northern 樣品緩沖液：2.2mol/L 甲醛，1mol/LMOPS，50%
果蠅RNA的大規模制備
試劑、試劑盒 5mol LLiCl 70% 乙醇 酚：氯仿（1:1) 20 mg ml 蛋白酶 K 95%(V V) 乙醇 .RNA 勻漿緩沖液 3mol L 乙酸鈉實驗步驟 一 材料與設備1)5mol/L LiCl2)70% 乙醇：70% (V/V)Ethanol，l0 mmol/L Tris-H
果蠅RNA的大規模制備
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 5mol LLiCl ?70% 乙醇 ?酚：氯仿（1:1) 20 mg ml 蛋白酶 K ?95%(V V) 乙醇 ?
2.3.2－果蠅RNA的大規模制備
本方法可從 100 只果蠅或約 2g 果蠅胚胎中制備 RNA。試劑、試劑盒5mol LLiCl70% 乙醇酚：氯仿（1:1)20 mg ml 蛋白酶 K95%(V V) 乙醇.RNA 勻漿緩沖液3mol L 乙酸鈉實驗步驟一 材料與設備1)5mol/L LiCl2)70% 乙醇：70% (V/V)E
從果蠅胚胎中提取總－RNA－或－poIy(A)－+RNA
試劑、試劑盒 0.lmol LNaOH 乙醇 3mol L 乙酸鈉 苯酚 無 SDS 的結合緩沖液 含 SDS 的結合緩沖液 TE 緩沖液 SEVAG 漂白劑（Bleach) 含 MgCl2 的 PBS(pH7.2) 果蠅勻漿緩沖液實驗步驟 一 材料與設備1)0.lmol/LNaOH2)70%(V/
從果蠅胚胎中提取總－RNA－或－poIy(A)－+RNA
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 0.lmol LNaOH ?乙醇 ?3mol L 乙酸鈉 ? 苯酚 ?無 SDS 的結合緩沖液 含 SDS 的結合緩沖
2.3.1－從果蠅胚胎中提取總－RNA－或－poIy(A)－+RNA
試劑、試劑盒0.lmol LNaOH乙醇3mol L 乙酸鈉苯酚無 SDS 的結合緩沖液含 SDS 的結合緩沖液TE 緩沖液SEVAG漂白劑（Bleach)含 MgCl2 的 PBS(pH7.2)果蠅勻漿緩沖液實驗步驟一 材料與設備1)0.lmol/LNaOH2)70%(V/V) 乙醇3)3mol/
RNA的制備
來源于任何細胞的RNA都可以通過反轉錄酶的作用拷貝成雙鏈DNA并克隆化，獲得相應的于特定細胞來源的cDNA文庫。因此，RNA制備的意義有兩個方面?* 獲得特定細胞來源的cDNA文庫，克隆目的基因?* 分析基因的表達，闡明基因調控的特性，了解從基因轉錄產生RNA的結構，數量，水平及合成的速率抑制RNA
RNA干擾制備方法
化學合成許多國外公司都可以根據用戶要求提供高質量的化學合成siRNA。主要的缺點包括價格高，定制周期長，特別是有特殊需求的。由于價格比其他方法高，為一個基因合成3—4對siRNAs 的成本就更高了，比較常見的做法是用其他方法篩選出最有效的序列再進行化學合成。最適用于：已經找到最有效的siRNA的情況
細菌RNA制備實驗
革蘭氏陰性細菌中提取 革蘭氏陽性細菌中提取 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 RNA 試
細菌RNA制備實驗
實驗材料 RNA試劑、試劑盒 STET氯仿乙酸鈉氯化銫無水乙醇EDTA儀器、耗材 離心機分光光度計搖床實驗步驟 1. ?培養100 ml 大腸桿菌或500 ml 藍細菌至對數生長期，加入1/20體積終止緩沖液，置于冰上。2. ?于4℃用JA-10轉子17 700 g 離心5 min 收集細胞。3.
反義RNA的制備實驗
RNA 也可以由線狀 DNA 為模板，通過 RNA 聚合酶（如T3、T7 或 SP6 ) 在體外合成。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗材料限制性內切核酸酶酶水解模板 DNA大腸桿菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ試劑、試劑盒氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液轉錄緩沖液Tris-Cl鹽
poly（A）+－RNA的制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大多數的信使RNA（mRNA）都帶有poly（A）尾，而結構RNA沒有。使用本工作方案，可以將帶poly（A）的RNA從rRNA和tRNA中分離出來。 實驗材料
酵母總RNA的制備
試劑、試劑盒 AE 緩沖液。 苯酚 10%SDS 酚 氯仿 無水乙醇 乙醇. 3mol L 乙酸鈉 無 RNase 的水儀器、耗材 髙速離心機實驗步驟 一 材料與設備1)AE 緩沖液：50 mmol/L 乙酸鈉 (PH5.3)，lOmmol/LEDTA。2) 苯酚 (用 AE 緩沖液預先平衡）。3)
反義RNA的制備實驗
實驗材料 限制性內切核酸酶酶水解模板 DNA大腸桿菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ試劑、試劑盒 氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液轉錄緩沖液Tris-Cl鹽酸亞精胺NaCl胎盤RNase抑制物牛血清白蛋白RNA聚合酶DEPC儀器、耗材 DNA合成儀瓊脂糖凝膠電泳微量離心管實驗步驟 一、化學合成的 RN
植物RNA的制備實驗
實驗材料 RNA試劑、試劑盒 TELiCl無水乙醇乙酸鈉氯仿儀器、耗材 勻漿器離心管離心機水浴鍋實驗步驟 1. ?研缽和研棒先用液氮冷卻，稱出15 g 凍結植物組織于研缽中（加液氮保持凍結）。2. ?用研棒磨成粉末，立即轉移到一個盛有150 ml，研磨緩沖液和50 ml TLE緩沖液平衡酚的500
真菌總－RNA－的制備
試劑、試劑盒 酚氯仿異戊醇 12mol L 氯化鋰 3mol L 乙酸鈉 乙醇 DEPC 處理的水儀器、耗材 水浴 低溫高速離心機實驗步驟 一 材料與設備1) 酚：氯仿：異戊醇 (25：24:1)。2) 氯仿：異戊醇 (2：1)3)12mol/L 氯化鋰。4)3mol/L 乙酸鈉。5)70% 乙醇。
poly（A）+－RNA的制備實驗
實驗材料 RNA試劑、試劑盒 NaOH寡聚脫氧胸苷纖維素poly（A）樣品緩沖液LiClEDTATE乙酸鈉儀器、耗材 離心機分光光度計搖床實驗步驟 1. ?先用10 ml 5 mol/l NaOH清洗硅化的層析柱，然后用水沖洗。2. ?取0.5 g oligo（dT）纖維素干粉加1 ml 0.1 m
植物RNA的制備實驗
酚/SDS法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 RNA 試劑、試劑盒
真菌總－RNA－的制備
真菌總 RNA 的制備 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 酚 氯仿 異戊醇 ?12mol L 氯化鋰
反義RNA的制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 限制性內切核酸酶酶水解 模板 DNA 大腸桿菌 DNA 多聚酶 胰 DNaseⅠ 試劑、試劑盒
酵母總RNA的制備
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 AE 緩沖液。 ? 苯酚 10%SDS ?酚 ?氯仿 ? 無水乙醇 乙醇. ?3mol L 乙酸鈉 ?無 RNase
poly（A）+－RNA的制備實驗
利用cND A微陣列技術可用于：（1）并行分析檢測成千上萬個基因的表達情況；（2）在新基因的發現、基因組功能的研究、疾病的預測和診斷、藥物靶標的確定和藥物毒性預測等多方面發揮著重要的作用。實驗方法原理大多數的信使RNA（mRNA）都帶有poly（A）尾，而結構RNA沒有。使用本工作方案，可以將帶po
真核細胞總RNA的制備（Total－RNA－Isolation）2
Total RNA Isolation?Guanidine-based isolation Objective: ?To obtain total RNA from zebrafish embryos. Required Materials ?Denaturing Solution
真核細胞總RNA的制備（Total－RNA－Isolation）1
從細胞中分離RNA的純度于完整性對于許多分子生物學實驗至關重要。如Northern印跡與雜交分析、寡聚（dT）纖維素選擇分離 mRNA，cDNA合成及體外翻譯等實驗的成敗，在很大程度上決定于RNA的質量。RNA分離的最關鍵因素是盡量減少RNA酶的污染。快速一步法提取總RNA組織及有核細胞在勻漿過程中
組織和細胞RNA的制備
一、?組織和細胞總RNA提取：異硫氰酸胍法（一）試劑準備1．CSB緩沖液：42mM檸檬酸鈉；0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基，N甲基甘氨酸鈉)；0.2 mM β-巰基乙醇。2．變性液：異硫氰酸胍（終濃度?4 M）25g、CSB緩沖液 33ml，混合直至完全溶解，可在65℃助
酵母菌RNA制備實驗
實驗材料 酵母菌試劑、試劑盒 TES酸性酚氯仿乙酸鈉乙醇儀器、耗材 離心管離心機搖床實驗步驟 1. ?酵母細胞在10 ml 培養基中生長至指數中期（OD600=1.0）。?2. ?將培養液轉移到50 ml，離心管，于4℃，1 500 g 離心3 min。?3. ?棄上清，菌體沉淀用1 ml 冰冷的水
酚/SDS法制備植物RNA
試劑、試劑盒 液氮 研磨緩沖液TLE 緩沖液平衡酚)氯仿IiCl 溶液 (DEPC 處理）乙酸鈉 (DEPC 處理） 無水乙醇DEPC 處理水儀器、耗材 Folytron 勻漿器（BrinkmarmPT10 35)實驗步驟 一 材料與設備1) 液氮2) 研磨緩沖液 18mol/LTris，0.09m