凝膠中激酶直接分析實驗
實驗方法原理 鹽酸胍或脲都能使蛋白質變性，選用哪一種取決于不同的激酶，但一般首選鹽酸胍，因為對大多數激酶而言它的變性效果更好。實驗材料 10 mmol L 激酶底物有激酶活性的酶樣品試劑、試劑盒 2-丙醇Tris?Cl鹽酸胍 脲DTTTween 20匹配的激酶反應緩沖液 Mg／ATP 溶液 [γ-32P] ATP三氯乙酸（TCA）焦磷酸鈉儀器、耗材 放射性物質專用溫浴器（如帶有緊蓋的小盤和可熱密封的聚乙烯袋密封儀（選用））實驗步驟 1. 按適當百分比濃度制備聚丙烯酰胺分離膠，加入 10 mg/ml 激酶底物，使其在分離膠混合液中的終濃度達到 1 mg/ml。均勻混合后澆入制膠裝置使其聚合。2. 按通常的方法制備有激酶活性樣品的 SDS-PAGE 電泳樣品，電泳。3. 電泳完畢后將膠放入 200 ml 20 %（V/V）2-丙醇/ 50 mmol/L Tris?Cl，pH 8.0 的洗液中，漂洗 20 min， 換入新的緩沖液，再......閱讀全文
凝膠中激酶直接分析實驗——－直接分析
蛋白激酶的分析是使用標記的供體底物，當酶樣品中含有磷酸轉移酶活性時，蛋白 質或多肽受體底物中標記物的積累就很容易被檢出。實驗方法原理鹽酸胍或脲都能使蛋白質變性，選用哪一種取決于不同的激酶，但一般首選鹽酸胍，因為對大多數激酶而言它的變性效果更好。實驗材料10 mmol L 激酶底物有激酶活性的酶樣品試
凝膠中激酶直接分析實驗
實驗方法原理 鹽酸胍或脲都能使蛋白質變性，選用哪一種取決于不同的激酶，但一般首選鹽酸胍，因為對大多數激酶而言它的變性效果更好。實驗材料 10 mmol L 激酶底物有激酶活性的酶樣品試劑、試劑盒 2-丙醇Tris?Cl鹽酸胍 脲DTTTween 20匹配的激酶反應緩沖液 Mg／ATP 溶液 [γ-3
凝膠中激酶直接分析實驗
基本方案 直接分析 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 鹽酸胍或脲都能使蛋白質變性，選用哪一種取決于不同的激酶，但一般首選鹽酸胍，因為對大多數激酶而言它的變性效果更好。
脈沖場凝膠中DNA片段的直接回收
實驗方法原理 低熔點瓊脂糖制備規模的 PFGE 經常被用于 DNA 片段的分離。不同大小的 DNA 可以用限制酶酶切產生高分辨率酶切圖譜或產生用于插入噬菌體或質粒載體的片段。實驗材料 DNA 大小標準基因組 DNA試劑、試劑盒 溴化乙錠酚：氯仿儀器、耗材 水浴實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液溴化
脈沖場凝膠中DNA片段的直接回收
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 低熔點瓊脂糖制備規模的 PFGE 經常被用于 DNA 片段的分離。不同大小的 DNA 可以用限制酶酶切產生高分辨率酶切圖譜或產生用于插入噬菌體或質粒載體的片段。 實驗材料
脈沖場凝膠中DNA片段的直接回收
低熔點瓊脂糖制備規模的 PFGE 經常被用于 DNA 片段的分離。不同大小的 DNA 可以用限制酶酶切產生高分辨率酶切圖譜或產生用于插入噬菌體或質粒載體的片段。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理低熔點瓊脂糖制備規模的 PFGE 經常被用于 DNA 片段的分離。不同大小的 D
用蛋白質底物進行蛋白質激酶分析—凝膠蛋白質激酶分析
試劑、試劑盒Tris-HClDTT鹽酸胍尿素激酶分析緩沖液儀器、耗材SDS-PAGE實驗步驟1. 準備下列材料：SDS-PAGE 要用到的所有試劑50 mmol/L Tris-HCl，室溫（pH 8.0)，1 mmol/L DTT6 mol/L 鹽酸胍，50 mmol/L Tris-HCl，室溫（p
酪氨酸激酶分析實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 兔肌肉烯醇化酶
酪蛋白激酶分析實驗
基本方案 用 β-酪蛋白 備擇方案 用多肽底物 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 β-酪蛋
酪氨酸激酶分析實驗
實驗材料兔肌肉烯醇化酶試劑、試劑盒1 mmol L DTT 50 mmol L HEPES（pH 7.0 ）甘油100 mmol L 乙酸5 × 酪氨酸激酶反應緩沖液[γ-32P] ATP 溶液冰 2 × SDS-PAGE 樣品緩沖液儀器、耗材30℃ 水浴和沸水浴實驗步驟1. 4℃ 最大速度離心 5
酪氨酸激酶分析實驗
實驗方法原理 實驗材料?兔肌肉烯醇化酶試劑、試劑盒?1 mmol L DTT 50 mmol L HEPES（pH 7.0 ）甘油100 mmol L 乙酸5 × 酪氨酸激酶反應緩沖液[γ-32P] ATP 溶液冰 2 × SDS-PAGE 樣品緩沖液儀器、耗材?30℃ 水浴和沸水浴實驗步驟 1.
酪蛋白激酶分析實驗
實驗方法原理 實驗材料?β-酪蛋白（溶于水）有酪蛋白激酶活性的酶樣品試劑、試劑盒?[γ-32P] ATP 溶液酪蛋白激酶反應緩沖液TCA SDS-PAGE 樣品緩沖液儀器、耗材?30℃ 水浴P81 磷酸纖維素膜離心管離心機實驗步驟 每個鑒定反應按以下比例將各反應組分加入 1.5 ml 微量離心管中：
用于激酶分析的細胞裂解實驗
實驗材料培養細胞（貼壁貼壁細胞在100 mm 組織培養板中約 70% 生長成片／懸浮細胞濃度 為 10^6 細胞／ml）試劑、試劑盒PBS裂解緩沖液蛋白酶抑制劑儲存液儀器、耗材微量離心機實驗步驟1. 用預冷的 PBS 洗細胞 2 次，將最后的洗液盡可能吸盡。2. 加入 0.75 ml 裂解緩沖液重懸
用于激酶分析的細胞裂解實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 培養細胞（貼壁貼壁細胞在100 mm 組織培養板中約 7
用于激酶分析的細胞裂解實驗
實驗方法原理 實驗材料 培養細胞（貼壁貼壁細胞在100 mm 組織培養板中約 70% 生長成片／懸浮細胞濃度 為 10^6 細胞／ml）試劑、試劑盒 PBS裂解緩沖液蛋白酶抑制劑儲存液儀器、耗材 微量離心機實驗步驟 1. 用預冷的 PBS 洗細胞 2 次，將最后的洗液盡可能吸盡。2. 加入 0.
OD實驗中強堿性水樣能否直接測定？
?COD實驗中強堿性水樣能否直接測定？zui好用硫酸將水樣PH值中和到中性，中和過程中要緩慢，少量多次添加試劑。
凝膠中蛋白質的洗脫實驗
SDS-PAGE 在確定樣品中多肽的數量和大小方面已被證明是極有用的分析方法。若能熟練運用的話, 它還具有分離許多大小不一的單體蛋白質的能力。許多人在凝膠電泳應用的早期希望可以利用凝膠的高分辨率特性來獲得小量的純凈蛋白質。實驗步驟一、通過擴散來洗脫凝膠中的蛋白質將 SDS 從蛋白質中移除的早期方法由
凝膠中蛋白質的洗脫實驗
一、通過擴散來洗脫凝膠中的蛋白質將 SDS 從蛋白質中移除的早期方法由 Weber 和 Kutter(1971) 發表，但當用于微量的蛋白質時，這個方法既麻煩又會造成大部分蛋白質的損失。這一領域較多的早期方法已經發表（HagerandBurgess,1980)，但卻需要重新討論 (butbear
凝膠中蛋白質的洗脫實驗
實驗步驟 一、通過擴散來洗脫凝膠中的蛋白質 將 SDS 從蛋白質中移除的早期方法由 Weber 和 Kutter(1971) 發表，但當用于微量的蛋白質時，這個方法既麻煩又會造成大部分蛋白質的損失。 這一領域較多的早期方法已經發
凝膠滲透色譜實驗中的樣品濃度
凝膠滲透色譜實驗中的樣品濃度因為GPC測的該樣品中的分子量分布，不論溶液的濃度大小或者準確與否，并不影響其分子量分布。當然測的過程還應該保證溶液的濃度在儀器的檢測限以上。
凝膠遷移率變動分析實驗
凝膠遷移率變動分析實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 丙烯酰胺 雙丙烯酰胺 過硫酸銨
凝膠遷移率變動分析實驗
在本實驗中, 我們用 DNA 親和層析所用的同一互補寡核苷酸 (具體序列見實驗 3 的引言的末尾) 來進行 AP-1 的凝膠遷移率變動分析。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南，作者：朱厚礎。試劑、試劑盒丙烯酰胺雙丙烯酰胺過硫酸銨TEMED(NNN'N'四甲基乙二胺）甘油 (50%;
凝膠遷移率變動分析實驗
試劑、試劑盒?丙烯酰胺雙丙烯酰胺過硫酸銨TEMED(NNN'N' 四甲基乙二胺）甘油 (50%;v v)競爭 DNA遷移率變動分析探針TBE凝膠遷移率變動分析緩沖液 TE實驗步驟?材料丙烯酰胺雙丙烯酰胺過硫酸銨（10%;w/v)TEMED(N,N,N',N', 四甲基
蛋白激酶C異構體分析實驗
實驗材料有 PKC 活性的酶樣品試劑、試劑盒[γ-32P] ATP 溶液PKC 反應緩沖液TCASDS - PAGE 樣品緩沖液儀器、耗材30℃ 水浴P81 磷酸纖維素膜離心管實驗步驟1. 每個分析反應按以下比例將各反應組分加入 1.5 ml 微量離心管中：4 μl 5 × PKC 反應緩沖液1 μ
酪蛋白激酶分析實驗_用－β酪蛋白
實驗材料β-酪蛋白（溶于水）有酪蛋白激酶活性的酶樣品試劑、試劑盒[γ-32P] ATP 溶液酪蛋白激酶反應緩沖液TCASDS-PAGE 樣品緩沖液儀器、耗材30℃ 水浴P81 磷酸纖維素膜離心管離心機實驗步驟1. 每個鑒定反應按以下比例將各反應組分加入 1.5 ml 微量離心管中：4 μl 5 ×
蛋白激酶C異構體分析實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 有 PKC 活性的酶樣品
酪蛋白激酶分析實驗_用多肽底物
實驗方法原理酪蛋白激酶 I 可用多肽 AspAspAspGluGluSerIleThrArgArg 進行分析，最近釀蛋白激酶 II 也已被特異性的多肽底物分析，如 ArgArgArgGluGluGluThrGluGluGlu（下劃線殘基是磷酸受體）。兩個多肽均可通過精氨酸殘基結合到 P81 磷酸纖維
蛋白激酶C異構體分析實驗
實驗方法原理 實驗材料 有 PKC 活性的酶樣品試劑、試劑盒 [γ-32P] ATP 溶液PKC 反應緩沖液TCASDS - PAGE 樣品緩沖液儀器、耗材 30℃ 水浴P81 磷酸纖維素膜離心管實驗步驟 1. 每個分析反應按以下比例將各反應組分加入 1.5 ml 微量離心管中：4 μl 5 × P
化學實驗中，可以直接加熱的儀器有哪些
試管、蒸發皿、坩堝、燃燒匙可以直接加熱
化學實驗中可用于直接加熱的化學儀器
化學實驗中可用于直接加熱的儀器有：試管、蒸發皿、坩堝、燃燒匙。1.試管，化學實驗室常用的儀器，用作于少量試劑的反應容器，在常溫或加熱時（加熱之前應該預熱，不然試管容易爆裂。）使用。試管分普通試管、具支試管、離心試管等多種。普通試管的規格以外徑（mm）×長度（mm）表示，如15×150、18×180、