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  • 體細胞雜交實驗

    隨著分子遺傳學技術出現,體細胞雜交也取得了重要的進步:作為探針的 DNA 可以從用于體細胞雜交或 Southernblot 的細胞中獲取,而來自相應基因的探針無論是雜交到濾膜,還是雜交到染色體的變性或非變性的片段上,都能被辨別。然而,由于人類與嚙齒目動物在 DNA 和蛋白質水平上的相似性,作為雜交用的片段必須非常特異,以免與嚙齒目動物發生交叉反應。利用這一技術,許多基因被成功定位,但值得注意的是:由于假基因和基因家族的存在,探針在設計時應盡量與該基因的相應片段吻合,以免與這些基因發生交叉反應。單層全細胞融合實驗實驗材料 匯合至一定程度的受體細胞試劑、試劑盒 受體細胞適合生存的培養基合適的選擇性試劑含感興趣染色體及合適遺傳標記的供體細胞儀器、耗材 10 cm 組織培養板25 cm 組織培養瓶倒置相差顯微鏡實驗步驟 基本方案 單層全細胞融合1.倘若不知道細胞的選擇條件,通過以下方式來確定:將培養于 25 cm 培養瓶中的受體......閱讀全文

    體細胞雜交的雜交實驗

    不同種植物的原生質體可在人工誘導條件下融合,所產生的雜種細胞,即異核體經過培養可再生新壁,分裂形成愈傷組織,進而分化產生雜種植株。由于進行融合的原生質體來自體細胞,故該項技術也叫體細胞雜交。原生質體融合能使有性雜交不親合的植物種間進行廣泛的遺傳重組,因而在農業育種上具有巨大的潛力。在植物遺傳操作研究

    體細胞雜交實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗材料 匯合至一定程度的受體細胞 試劑、試劑盒 受體細胞適合生存的培養基 合適的選擇性試劑 含感

    體細胞雜交實驗

    單層全細胞融合實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 匯合至一定程度的受體細胞 試劑、試劑盒

    體細胞雜交實驗

    隨著分子遺傳學技術出現,體細胞雜交也取得了重要的進步:作為探針的 DNA 可以從用于體細胞雜交或 Southernblot 的細胞中獲取,而來自相應基因的探針無論是雜交到濾膜,還是雜交到染色體的變性或非變性的片段上,都能被辨別。然而,由于人類與嚙齒目動物在 DNA 和蛋白質水平上的相似性,作

    體細胞雜交的實驗原理介紹

    不同種植物的原生質體可在人工誘導條件下融合,所產生的雜種細胞,即異核體經過培養可再生新壁,分裂形成愈傷組織,進而分化產生雜種植株。由于進行融合的原生質體來自體細胞,故該項技術也叫體細胞雜交。原生質體融合能使有性雜交不親合的植物種間進行廣泛的遺傳重組,因而在農業育種上具有巨大的潛力。在植物遺傳操作研究

    體細胞雜交實驗的原理介紹

      不同種植物的原生質體可在人工誘導條件下融合,所產生的雜種細胞,即異核體經過培養可再生新壁,分裂形成愈傷組織,進而分化產生雜種植株。由于進行融合的原生質體來自體細胞,故該項技術也叫體細胞雜交。原生質體融合能使有性雜交不親合的植物種間進行廣泛的遺傳重組,因而在農業育種上具有巨大的潛力。在植物遺傳操作

    體細胞雜交實驗的方法介紹

    實驗目的了解用聚乙二醇PEG方法誘異同種植物原生質體融合的技術,并能根據新本原生質體的形態樗來鑒別雜種細胞。實驗原理不同種植物的原生質體可在人工誘導條件下融合,所產生的雜種細胞,即異核體經過培養可再生新壁,分裂形成愈傷組織,進而分化產生雜種植株。由于進行融合的原生質體來自體細胞,故該項技術也叫體細胞

    體細胞雜交的實驗方法

      1.原生質體的分離和收集。  2.將收集的兩種不同材料的原生質體分別懸浮在0.16mol/L的CaCl2·2H2O(pH5.8~6.2)原生質體密度調整為2×105/ml左右(用血細胞計數板統計原生質體密度)。  3.將兩種原生質體懸液等量混合。  4.用刻度吸管將混合的原生質體懸液滴在直徑為6

    體細胞雜交的實驗原理介紹

      不同種植物的原生質體可在人工誘導條件下融合,所產生的雜種細胞,即異核體經過培養可再生新壁,分裂形成愈傷組織,進而分化產生雜種植株。由于進行融合的原生質體來自體細胞,故該項技術也叫體細胞雜交。原生質體融合能使有性雜交不親合的植物種間進行廣泛的遺傳重組,因而在農業育種上具有巨大的潛力。在植物遺傳操作

    體細胞雜交所需實驗材料儀器介紹

    1.實驗材料:煙草或其它植物無菌苗的葉片。胡蘿卜肉質根誘導的松軟愈傷組織或懸浮培養細胞。2.試劑2.1酶液及洗滌液,同植物原生質體的分離和培養實驗。2.2PEG溶液2.3高pH高鈣稀釋液2.4DPD培養基同植物原生質體的分離和培養實驗。

    關于體細胞雜交實驗的方法介紹

      所有操作均在超凈工作臺上進行。  1.原生質體的分離和收集。  2.將收集的兩種不同材料的原生質體分別懸浮在0.16mol/L的CaCl2·2H2O(pH5.8~6.2)原生質體密度調整為2×105/ml左右(用血細胞計數板統計原生質體密度)。  3.將兩種原生質體懸液等量混合。  4.用刻度吸

    體細胞雜交的實驗方法介紹

    所有操作均在超凈工作臺上進行。1.原生質體的分離和收集。2.將收集的兩種不同材料的原生質體分別懸浮在0.16mol/L的CaCl2·2H2O(pH5.8~6.2)原生質體密度調整為2×105/ml左右(用血細胞計數板統計原生質體密度)。3.將兩種原生質體懸液等量混合。4.用刻度吸管將混合的原生質體懸

    體細胞雜交實驗——單層全細胞融合實驗

    實驗材料匯合至一定程度的受體細胞試劑、試劑盒受體細胞適合生存的培養基合適的選擇性試劑含感興趣染色體及合適遺傳標記的供體細胞儀器、耗材10 cm 組織培養板25 cm 組織培養瓶倒置相差顯微鏡實驗步驟基本方案 單層全細胞融合1.倘若不知道細胞的選擇條件,通過以下方式來確定:將培養于 25 cm 培養瓶

    體細胞雜交的定義

    體細胞雜交又稱體細胞融合,指將兩個原生質體不同的體細胞融合成一個體細胞的過程。融合形成的雜種細胞,兼有兩個細胞的染色體。

    什么是體細胞雜交?

    細胞雜交又稱細胞融合(cellfusion),是將來源不同的兩種細胞融合成一個新細胞。大多數體細胞雜交是用人的細胞與小鼠、大鼠或倉鼠的體細胞(hybridcell)進行雜交。

    體細胞雜交的概念

    體細胞雜交又稱體細胞融合,指將兩個原生質體不同的體細胞融合成一個體細胞的過程。融合形成的雜種細胞,兼有兩個細胞的染色體。

    體細胞雜交的簡介

      體細胞是生物體除生殖細胞外的所有細胞。將從身體分離的體細胞做組織培養進行遺傳學研究的學科稱為體細胞遺傳學(somaticgenetics)。體外培養細胞可人為控制或改變環境條件,并可建立細胞株,長期保存,進行各種正常和病理研究。與基因定位有關的是體細胞雜交(somaticcellhybridiz

    體細胞雜交的技術方法

    體細胞雜交又稱體細胞融合,指將兩個原生質體不同的體細胞融合成一個體細胞的過程。融合形成的雜種細胞,兼有兩個細胞的染色體。

    植物體細胞雜交

    植物體細胞雜交是指用兩個來自不同植物的體細胞融合成一個雜種細胞,并且把雜種細胞培育成新的植物體的方法。植物體細胞雜交的第一步是去掉細胞壁,分離出有活力的原生質體。去除細胞壁的常用方法是酶解法,即用纖維素酶和果膠酶等分解植物細胞的細胞壁。第二步是將兩個具有活力的原生質體放在一起,通過一定的技術手段進行

    體細胞雜交的所用方法

    所用方法是:①根據雙親細胞的形態特征,用不同熒光染料標記,人工挑選或用熒光激活細胞分揀機分離。或通過顯微操作直接挑選。②在合適的選擇壓下,只允許雜種細胞生長,淘汰雙親和同源融合細胞。如生長激素自主選擇、代謝互補選擇、白化互補選擇、營養缺陷型互補選擇、藥物抗性互補選擇等。

    體細胞雜交的方法介紹

    所用方法是:①根據雙親細胞的形態特征,用不同熒光染料標記,人工挑選或用熒光激活細胞分揀機分離。或通過顯微操作直接挑選。②在合適的選擇壓下,只允許雜種細胞生長,淘汰雙親和同源融合細胞。如生長激素自主選擇、代謝互補選擇、白化互補選擇、營養缺陷型互補選擇、藥物抗性互補選擇等。

    關于體細胞雜交的簡介

      體細胞是生物體除生殖細胞外的所有細胞。將從身體分離的體細胞做組織培養進行遺傳學研究的學科稱為體細胞遺傳學(somaticgenetics)。體外培養細胞可人為控制或改變環境條件,并可建立細胞株,長期保存,進行各種正常和病理研究。與基因定位有關的是體細胞雜交(somaticcellhybridiz

    輻射性雜交產生體細胞雜交的原理

    利用高劑量的X射線將候選染色體打斷成若干片段,含有這種片段的細胞可與倉鼠細胞形成雜交克隆。在這種雜交中,人類染色體片段被插入到倉鼠染色體的中間部分,因此大部分克隆片段在進行有絲分裂時處于穩定的狀態。利用類似于遺傳重組原理和最大似然性的統計學方法來計算存在于DNA片段上的多態性或非多態性標記之間的斷點

    輻射性雜交產生體細胞雜交的應用

    輻射性雜交技術是繼熒光原位雜交后新近建立的染色體定位方法,RH作圖法提供了一種聯系物理圖和遺傳圖的方法,已成為當今構建人類基因組大尺度、高密度、連續的染色體圖的常用方法之一。其用途主要有:EST定位、基因克隆、基因組作圖、測定距離、尋找新基因等。

    輻射性雜交產生體細胞雜交的過程

    G3嵌板的產生→確定STSs→PCR體系及反應條件→構建RH圖譜.

    輻射性雜交產生體細胞雜交的優點

    熒光原位雜交(FISH)法和輻射雜種細胞系(RH)技術是國際上最常用的基因定位的兩種方法,各有優缺點。FISH可以定位基因組中多個同源位點,結果直觀、可靠,而RH法則很困難。但是FISH法檢測步驟繁雜,尤其受探針大小的影響較大,2kb以下的cDNA序列很難定位,而且結果需要有經驗的細胞遺傳學家進行分

    輻射性雜交產生體細胞雜交的方法介紹

    輻射性雜交(radiationhybridRH)制圖技術是1975年由Goss和Harris創立的一種體細胞雜交技術,適用于構建人類基因組長范圍內的高分辨率連續物理圖譜。成熟的輻射性雜交制圖技術是由CoxVR等人于1990年建立的。

    關于體細胞雜交的相關介紹

      體細胞是生物體除生殖細胞外的所有細胞。將從身體分離的體細胞做組織培養進行遺傳學研究的學科稱為體細胞遺傳學(somaticgenetics)。體外培養細胞可人為控制或改變環境條件,并可建立細胞株,長期保存,進行各種正常和病理研究。與基因定位有關的是體細胞雜交(somaticcellhybridiz

    體細胞輻射性雜交的原理簡介

      利用高劑量的X射線將候選染色體打斷成若干片段,含有這種片段的細胞可與倉鼠細胞形成雜交克隆。在這種雜交中,人類染色體片段被插入到倉鼠染色體的中間部分,因此大部分克隆片段在進行有絲分裂時處于穩定的狀態。利用類似于遺傳重組原理和最大似然性的統計學方法來計算存在于DNA片段上的多態性或非多態性標記之間的

    體細胞雜交的雜種細胞的介紹

      新產生的融合細胞稱為雜種細胞(hybridcell),含有雙親不同的染色體。雜種細胞有一個重要的特點是在其繁殖傳代過程中出現保留嚙齒類一方染色體而人類染色體則逐漸丟失,最后只剩一條或幾條,其原因至今不明。這種僅保留少數甚至一條人染色體的雜種細胞正是進行基因連鎖分析和基因定位的有用材料。由于人和鼠

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