桿狀病毒毒種貯液的制備
實驗材料 桿狀病毒試劑、試劑盒 胎牛血清重組病毒儀器、耗材 培養箱培養瓶轉子實驗步驟 從單層培養中制備: 1a. 以毎瓶1.8×107 Sf9細胞的密度,將細胞接種于兩個150 cm2 培養瓶,在含10%胎牛血清的完全培養液中培養。于27℃讓細胞貼壁3 h,然后移去完全培養液。以感染復數為0.1的病毒量,加入5 ml 含野生型或重組病毒的無血清完全培養液。于27℃溫育1 h。 2a. 去掉病毒接種物,代之以20 ml 10%胎牛血清的完全培養液,于27℃溫育1 h。每天在光學顯微鏡下檢查細胞有無包涵體出現或細胞病變效應。 3a. 當大多數細胞含有包涵體或顯示出細胞病變效應時(通常在感染后4至5天),收獲病毒。將感染的培養物移入滅菌試管中,于4℃以1 000 g 離心10 min,將上清移至一新的滅菌試管,分別吸取1 m......閱讀全文
桿狀病毒毒種貯液的制備
實驗材料?桿狀病毒試劑、試劑盒?胎牛血清重組病毒儀器、耗材?培養箱培養瓶轉子實驗步驟 從單層培養中制備:?1a.? 以毎瓶1.8×107 Sf9細胞的密度,將細胞接種于兩個150 cm2 培養瓶,在含10%胎牛血清的完全培養液中培養。于27℃讓細胞貼壁3 h,然后移去完全培養液。以感染復數為
桿狀病毒毒種貯液的制備實驗
桿狀病毒是一類具有囊膜包裹的雙鏈環狀DNA病毒,其基因組大小為80~180 kb,在自然界中以節肢動物作為專一性宿主進行感染和傳播。實驗材料桿狀病毒試劑、試劑盒胎牛血清重組病毒儀器、耗材培養箱培養瓶轉子實驗步驟從單層培養中制備:?1a. ?以毎瓶1.8×107?Sf9細胞的密度,將細胞接種于兩個15
常用貯液與溶液(一)
1mol/L亞精胺(Spermidine): 溶解2.55g亞精胺于足量的水中,使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):
常用貯液與溶液(二)
100 mmol/L dNTP 溶液(dNTP solutions)可以購買到100mmol/L純dNTPs貯液,-80℃可貯存至少6個月。10mmol/L dNTP混合液成分及終濃度配制20ul溶液各成分的用量10mmol/L dATP10mmol/L dCTP 10mmol/L dGTP10mm
重組桿狀病毒的純化實驗
實驗材料?桿狀病毒試劑、試劑盒?瓊脂牛血清儀器、耗材?培養瓶凍存管實驗步驟 1.? 制備病毒上清的系列稀釋液,該病毒上清獲得自在無血清完全培養液中轉染 pAC360β-gal DNA的細胞。在含150 μg/ml X-gal 的瓊脂糖頂層覆蓋物下病毒形成蝕斑。?2.? 當蝕斑形成后,用滅菌巴斯德吸管
桿狀病毒儲液制備實驗
基本方案 從懸浮培養中制備 基本方案 從單層培養中制備 噬斑試驗測定滴度 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料
桿狀病毒儲液制備實驗
實驗方法原理 實驗材料 懸浮培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒(野生型的或重組)試劑、試劑盒 含10%胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材 150 mm 培養瓶 27℃ 培養箱 倒置顯微鏡 帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機 帶螺口蓋的凍存管 液氮罐 500 ml 旋轉細
重組桿狀病毒的純化實驗——編碼β半乳糖苷酶
桿狀病毒是一類在自然界中專一性感染節肢動物的DNA病毒,可用于(1)作為基因工程病毒殺蟲劑 ,提高害蟲防治效率(2)作為超高效的真核基因表達載體 ,生產有用的工程蛋白(3)研究桿狀病毒基因組的結構與功能(4)研究真核基因表達的調控機制。實驗方法原理由于昆蟲桿狀病毒環狀雙鏈DNA基因組很大 (約 13
液相色譜儀貯液器概述
液相色譜儀貯液器是用來存放流動相的容器,供給符合要求的流動相以完成液相色譜分析工作。一、貯液器材質:貯液器材質應耐腐蝕,對洗脫液呈化學惰性,可為玻璃、不銹鋼和聚四氟乙烯等材料。二、貯液器容積:貯液器容積與色譜柱的粗細、輸液泵的種類和所采用的液相色譜系統有關,一般容積約為0.5~2L,以便在不重復加液
提高入貯種質量對種子低溫低濕樣品柜安全貯種的重要性
? ? 不可否認,種子低溫低濕樣品柜所運用的低溫低濕儲藏技術是我國種子產業邁向現代化貯藏管理的重要舉措,有效保證了種子經營部門種子的安全越夏,延長了種子的使用壽命,目前采用種子低溫低濕樣品柜儲藏的種子種類涉及到糧、棉、油、甜菜、紅麻、瓜果、蔬菜等七大類作物,經濟有效的保證了種子質量,不過在使用種子
高效液相色譜儀貯液器概述
高效液相色譜儀貯液器是用來存放流動相的容器,供給符合要求的流動相以完成液相色譜分析工作。一、貯液器材質:貯液器材質應耐腐蝕,對洗脫液呈化學惰性,可為玻璃、不銹鋼和聚四氟乙烯等材料。二、貯液器容積:貯液器容積與色譜柱的粗細、輸液泵的種類和所采用的液相色譜系統有關,一般容積約為0.5~2L,以便在不重復
酚麻美敏口服液的貯-藏
遮光,密封,置陰涼處保存
桿狀病毒儲液制備實驗——從單層培養中制備
實驗材料單層培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒(野生型的或重組)試劑、試劑盒含10%胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材150 mm 培養瓶27℃ 培養箱倒置顯微鏡帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐500 ml 旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺實驗步驟1
桿狀病毒儲液制備實驗——噬斑試驗測定滴度
實驗材料對數生長期單層培養的 Sf 9 細胞試劑、試劑盒桿狀病毒儲液昆蟲細胞培養液儀器、耗材瓊脂糖頂層覆蓋物臺盼藍頂層覆蓋物(選用)60 mm 組織培養皿27℃ 培養箱1.5 ml 帶螺口蓋的凍存管實驗步驟1. 用含 10% 胎牛血清的 TNM-FH 培養液稀釋處于對數生長期的 Sf 9 細胞至約
桿狀病毒儲液制備實驗——從懸浮培養中制備
實驗材料懸浮培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒(野生型的或重組)試劑、試劑盒含10%胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材150 mm 培養瓶27℃ 培養箱倒置顯微鏡帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐500 ml 旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺實驗步驟1
桿狀病毒介紹
狀病毒是一類在自然界中專一性感染節肢動物的DNA病毒,病毒粒子呈桿狀,基因組為雙鏈環狀DNA分子,DNA以超螺旋形式壓縮包裝在桿狀衣殼內,大小在90~180 Kb之間。目前桿狀病毒作為高效、安全的無公害生物蟲劑廣泛應用于害蟲防治。 桿狀病毒只來源于無脊椎動物,雖然已發現600多種桿狀病毒,但進行
貯液容器連接件泄露測試儀---徽濤
貯液容器連接件泄漏測試儀?一,用途采用可編程控制器,觸摸屏,壓力傳感器,加壓裝置,機載打印機等組成,中英文菜單顯示,人機對話設定各項參數自動運行測試。生產單位,批次可任意輸入,操作方便。并采用三級密碼,信息安全可靠。產品規格、測試壓力值設定、保持時間設定,打印設定、測試、加壓、減壓、時間、標定,檢定
用蝕斑試驗測定病毒貯液的滴度實驗
實驗方法原理 空斑形成單位 (plaque forming units, PFUs)試驗,是將不同稀釋倍數的動物病毒與平鋪于平板表面的宿主細胞混合,當病毒顆粒在一大片宿主細胞上引發感染時,會造成細胞被溶解而形成空斑,每個空斑系由一個病毒顆粒所造成,計算空斑數目再乘以稀釋倍數,即可得知原來的病毒感
用蝕斑試驗測定病毒貯液的滴度實驗4
在細胞培養板內做病毒空斑形成單位試驗實驗材料病毒試劑、試劑盒95% 酒精胰酶含 5%小牛血清的 Eagle儀器、耗材細胞培養板實驗步驟(1) 用細胞培養板 (6孔),若用舊板,洗凈后浸于 95% 酒精中5 min, 再用紫外線照射 2-4 h備用,新板可直接使用。(2) 將傳代細胞系經胰酶消化分散后
用蝕斑試驗測定病毒貯液的滴度實驗2
蟲媒病毒在雞胚成纖維細胞中的空斑形成單位試驗實驗方法原理病毒常殺死被病毒感染的細胞?即產生致細胞病變作用。用只染活細胞(如中性紅)或只染死細胞(如臺盼蘭)的染料對單層細胞染色以檢測空斑。也可以使用活性染料溴化二苯基四氮唑(MTT)?進行染色,使用?MTT?的優點是黃色的?MTT?能將活細胞染成深藍色
用蝕斑試驗測定病毒貯液的滴度實驗3
用傳代細胞系平皿法測量病毒空斑形成單位實驗材料病毒細胞系試劑、試劑盒含 10% 小牛血清、89%水解乳蛋白一酵母浸液培養液儀器、耗材培養皿實驗步驟(1) 將單層細胞 (2X 106/ml, 6 ml)培養在直徑 60 mm 的平皿上,生長液為含 10% 小牛血清、89%水解乳蛋白一酵母浸液培養液,加
鹽酸倍他司汀口服液的不良反應及貯
不良反應 用本品偶有口干、胃部不適、心悸、皮膚瘙癢等,個別病例偶有惡心、頭暈、頭脹、出汗等,一般不影響繼續服藥。 貯藏 密封,在干燥處保存。
桿狀病毒滴度檢測
實驗概要本實驗介紹了檢測病毒滴度的方法。實驗原理根據噬菌斑數計算病毒滴度。主要試劑1. 4% agarose gel:2g agrose ? 50ml 水,高壓滅菌2. 2×Grace(unsupplemented):9.14g粉末(invitrogen) 0.07gNaHCO3 H2O,調PH6.
痢特靈片的貯----藏
遮光,密閉保存。
排毒嫩膚-8種蔬菜越吃越美
導讀:現在越來越多的研究數據表明,美容和排毒有著密不可分的關系,健康和排毒的關系同樣也十分密切。那么,想要身體健康,皮膚水水嫩嫩,排毒就很重要了。現在就隨小編一起看看,哪8種蔬菜,MM們吃了既健康又排毒吧!冬菇(Mushrooms) 功效:提高人體排毒能力,降低膽固醇 冬菇含
用蝕斑試驗測定病毒貯液的滴度實驗_蝕斑試驗法
實驗方法原理空斑形成單位 (plaque forming units, PFUs)試驗,是將不同稀釋倍數的動物病毒與平鋪于平板表面的宿主細胞混合,當病毒顆粒在一大片宿主細胞上引發感染時,會造成細胞被溶解而形成空斑,每個空斑系由一個病毒顆粒所造成,計算空斑數目再乘以稀釋倍數,即可得知原來的病毒感染單位
桿狀病毒表達系統的應用
用桿狀病毒做載體,可高效表達外源基因,到目前為止已有幾百個包括動植物、病毒、細菌、真菌的基因在昆蟲細胞或幼蟲體內得到高效表達。這個表達體系的主要特點是可以獲得大量抗原性、免疫原性較好的,與天然蛋白功能相似的可溶性重組蛋白。這一特點優于細菌、酵母和哺乳動物細胞表達體系。重組桿狀病毒感染昆蟲細胞后,可以
桿狀病毒表達系統的應用
桿狀病毒是近年來被廣泛用于高效表達外源蛋白的載體系統,本文就桿狀病毒表達系統的生物學特性、轉染載體、重組病毒的篩選、基因表達調控及其發展應用等方面作一概述。
桿狀病毒轉染載體的分類
用于表達融合型蛋白的轉染質粒是一類早期構建的轉染質粒,它包括pAC系列[4],如pAC101、pAC311、pAC360等。在每個載體中,多角體蛋白基因啟動子下游ATG啟始密碼后含有一個單一的BamHⅠ酶切位點,當外源基因和多角體基因的讀碼框架正確時,就可以獲得含1個或幾個多角體蛋白N端氨基酸的融合
桿狀病毒昆蟲細胞表達系統
實驗步驟一、桿狀病毒表達載體最簡單的經典桿狀病毒表達載體是一個重組的桿狀病毒,其基因組含有一段外源核酸序列,通常為編碼目標蛋白質的dDNA,在多角體蛋白啟動子控制下進行轉錄。這個嵌合的基因由多角體蛋白啟動子和外源蛋白編碼序列組成,其位于病毒基因組多角體座位,替代了非必需的野生型多角體基因。在實驗室中