天然產物中多糖的分離、純化與鑒定(1)
第一部分多糖的提取、純化目的要求了解多糖提取和純化的一般方法。實驗原理多糖類物質是除蛋白質和核酸之外的又一類重要的生物大分子。早在60年代，人們就發現多糖復雜的生物活性和功能。它可以調節免疫功能，促進蛋白質和核酸的生物合成，調節細胞的生長，提高生物體的免疫力，具有抗腫瘤、抗瘍和抗愛滋病 (AIDS)等功效。由于高等真菌多糖主要是細胞壁多糖，多糖組分主要存在于其形成的小纖維網狀結構交織的基質中，利用多糖溶于水而不溶于醇等有機溶劑的特點，通常采用熱水浸提后用酒精沉淀的方法，對多糖進行提取。影響多糖提取率的因素很多，如：浸提溫度、時間、加水量以及脫除雜質的方法等都會影響多糖的得率。多糖的純化，就是將存在于粗多糖中的雜質去除而獲得單一的多糖組分。一般是先脫除非多糖組分，再對多糖組分進行分級。常用的去除多糖中蛋白質的方法有：Sevag法、三氟三氯乙烷法、三氯醋酸法，這些方法的原理是使多糖不沉淀而使蛋白質沉淀，其中Sevag方法脫蛋白效果較......閱讀全文
天然產物中多糖的分離、純化與鑒定(1)
第一部分多糖的提取、純化目的要求了解多糖提取和純化的一般方法。實驗原理多糖類物質是除蛋白質和核酸之外的又一類重要的生物大分子。早在60年代，人們就發現多糖復雜的生物活性和功能。它可以調節免疫功能，促進蛋白質和核酸的生物合成，調節細胞的生長，提高生物體的免疫力，具有抗腫瘤、抗瘍和抗愛滋病 (AIDS)
天然產物中多糖的分離、純化與鑒定(2)
二、粗多糖的純化粗多糖溶液加入Sevag試劑(氯仿：正丁醇＝3：1混合搖勻)后，置恒溫振蕩器中震蕩過夜，使蛋白質充分沉淀，離心(3000r／min)分離，去除蛋白質。然后濃縮，透析，加入4倍體積的乙醇沉淀多糖，將沉淀凍干。取樣品0.1g溶于10ml 0.01mol/L Tris-HCL, PH=7.
多糖的分離和純化幾種方法
經過前期對多糖的提取，去除蛋白質、色素、小分子等物質得到粗多糖，而這些粗多糖其實是由很多分子量、結構不同的多糖混合而成。為了得到純的多糖即均一性多糖，仍需進一步對這些粗多糖進行分離純化。 1、分步沉淀法 多糖的結構和分子量不同，其極性大小不同，在有機溶劑（如醇或酮）中的溶解度不同，根據這一原
制備型高速逆流色譜分離純化香菇多糖
摘 要 利用高速逆流色譜儀, 研究了雙水相系統對香菇多糖的分離。溶劑系統為w ( PEG1000 ) ∶w (K2HPO4 ) ∶w (KH2 PO4 ) ∶w (H2O) = 0. 5∶1. 25∶1. 25∶7. 0,在轉速為500 r/min,流速為1. 5 mL /min的條件下,成功分離了
高速逆流色譜在天然產物分離中的應用
20世紀80年代，美國國立衛生研究院（National Institutes of Health，NIH）Ito等在液-液分配色譜的基礎上發明了高速逆流色譜（high-speed countercurrent chromatography，HSCCC）。HSCCC技術主要有離子對逆流色譜（ion
高速逆流色譜分離天然產物的溶劑體系選擇
摘 要: 高速逆流色譜(HSCCC) 是一種有效快速的分離方法。綜述了近幾年來關于HSCCC 分離天然產物的研究進展, 與以往綜述按分離物質的種類對溶劑體系分類闡述不同, 將按照溶劑體系的極性對其分類闡述, 并且詳細的論述了常用溶劑體系適合分離物質的特征, 列舉了大量的應用實例和被分離物質的結構及分
高速逆流色譜儀分離純化蘆薈多糖的研究
摘要:采用紫外-可見分光光度計法進行了高速逆流色譜技術分離蘆薈多糖的溶劑系統研究，得出了高速逆流色譜分離蘆薈多糖的溶劑系統為w( PEG600) ∶ w( KH2PO4) ∶ w( K2HPO4) ∶ w( H2O) = 5∶ 15∶ 15∶ 65，加入NaCl 的質量分數為2%。在水浴溫度30 ℃
簡述PCR－產物純化
PCR 反應完成目標 DNA 的擴增后，PCR 產物可以用于進一步的研究，例如用于 DNA 測序、克隆、分析基因的功能和表達等。然而，通過 PCR 反應后體系中仍然存在具有活性的 DNA 聚合酶，剩余的 dNTP、引物以及反應緩沖體系中的各種金屬離子等。因此，我們必須通過一定的方法從反應體系中提純
PCR產物純化方法
Purification of PCR Products in Preparation for CloningJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, AustraliaDavid
PCR－產物純化實驗
試劑、試劑盒 TE 或去離子水PCR 產物儀器、耗材 離心機和轉子PCR 濾 件微量離心管實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液TE(lOmmol/L Tris-HCl，lmmol/L EDTA，pH7.5) 或去離子水2. 核酸和寡核苷酸待測序的 PCR 產物3. 離心機和轉子帶有固定傾角轉子的小型
PCR－產物純化實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 TE 或去離子水 PCR 產物 儀器、耗材 離心機和轉子 PCR 濾 件
PCR－產物純化實驗
介紹一個采用 AmiconMicrocon-PCR 濾件（Millipore) 的方法，有效地去除冗余dNTP 和引物的方法純化 PCR 產物。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。試劑、試劑盒TE 或去離子水PCR 產物儀器、耗材離心機和轉子PCR 濾 件微量離心管實驗步驟
高速逆流色譜分離提取天然產物技術研究進展
摘 要：高速逆流色譜是最近20 多年發展起來的一項液- 液分配技術，由于其具有不需任何固態支撐的特點，在分離提取天然產物方面具有很多優勢，因此被廣泛應用。本文介紹了高速逆流色譜的原理和特點，對其分離提取天然產物有效成分的應用及其進展進行了綜述。關鍵詞：高速逆流色譜；天然產物；分離提取??? 自從上世
利用紫外引導的開放操作純化策略對天然產物提...（二）
為進一步精簡HPLC純化過程，僅使用開放操作系統的登錄頁面即可簡化方法的選擇，如圖2所示。勾選登錄按鈕后，用戶可通過手動進樣器簡單實現進樣。檢測運行完成后，結果可被打印出來或電郵發送給用戶。這些梯度旨在確保即使用戶選擇了一種欠佳的方法，所有潛在的目標化合物也能從柱上被洗脫下來并得到收集。關于這一點的
利用紫外引導的開放操作純化策略對天然產物提...（一）
利用紫外引導的開放操作純化策略對天然產物提取物進行制備應用效益本應用文獻介紹了通過開放操作型純化系統來幫助化學師簡化原料提取物純化方法選擇的技術。與一種用于各種提取物的通用方法相反，簡單的方法選擇標準（基于薄層色譜分析）使分離方法可根據具體的提取物量身打造。這使化學師可減少進行再分析和再純化步驟的次
紫錐菊提取物中的天然產物的分離提取
本文將重點討論Prep150 LC系統用于從紫錐菊提取物等天然產物的提取分離有效成分。系統自帶ChromScope軟件簡單直觀，可快速實現化合物的分離。本文原理同樣適用于帶紫外發色團的任意化合物的分離。 菊苣酸為紫錐菊中主要化合物的一種，它是苯丙素和咖啡酸的衍生物3,4。具有醫療用途，包
PCR產物常規純化方法
大批量、廉價、用于測序的PCR產物純化方法--PEG沉淀?最近，摸索了一下PEG沉淀PCR產物的方法，貼出來，與大家共享。?目的：探索一種方法，能將PCR產物大批量地、廉價地、純度比較高地純化出來，并且最好能去掉200bp以下的小片段DNA，用于DNA測序。?有文獻和方法說，不同濃度的PEG能沉淀不
純化測序反應產物實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 甲酰胺 核酸 寡核苷酸 儀器、耗材 ABI PRISM 3100Genetic An
純化測序反應產物實驗
試劑、試劑盒 甲酰胺核酸寡核苷酸儀器、耗材 ABI PRISM 3100Genetic Analyzer微量離心管DTR Gel Filtration Cartridges (Edge Biosystems)或相應的真空濃縮儀實驗步驟 一、材料1.緩沖液和溶液樣品上樣液所用的樣品上樣液取決于所用的設
純化測序反應產物實驗
電泳之前純化測序反應產物以去除多余的、尚未結合的染料終止子是非常必要的。離心柱可以是快速、有效地去除未結合的染料終止子。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。試劑、試劑盒甲酰胺核酸寡核苷酸儀器、耗材ABI PRISM 3100Genetic Analyzer微量離心管DTR
PCR產物的直接純化
實驗概要本實驗介紹了PCR產物直接純化的原理及操作步驟。實驗原理PCR產物一般都含有過量的引物、Taq ? DNA酶及dNTP，這些成分的存在將直接影響到后續的酶切、雙脫氧PCR測序反應等過程，因此有必要除去。目前核酸純化的方法有很多，商用化試劑盒的出現使得DNA的純化過程變得更加簡便快捷。本實驗中
PCR產物的回收純化
PCR產物的回收純化的目的是：高質量DNA；除去蛋白（如酶等），RNA，無機鹽（NaCl超過150 mM對T4連接酶有抑制作用），小于100 bp的短片段（如引物DNA），有機小分子（如dNTP、Agrose、EB、甘油、礦物油）。
Waters推出用于藥物化學和天然產物提取的新型LC純化系統
新的Prep 150 液相色譜系統滿足了色譜使用者專用前處理凈化的需求 賓夕法尼亞州費城，2013年3月18日。Waters公司(NYSE：WAT)今天宣布了推出新型Prep 150液相系統，一款新型適合通用的前處理色譜系統，專門為從實驗室合成復雜基質中分離目標化合物，或在凈化過程
高速逆流色譜在天然產物活性成分分離制備中的應用
摘 要 高速逆流色譜(HSCCC) 是一種新型的液2液分配色譜技術,由于其克服了傳統固相載體對樣品的死吸附作用而被廣泛用于天然產物的分離與制備中。本文從HSCCC 樣品制備、分離條件優化、技術進展以及近幾年HSCCC 在天然產物有效成分分離制備中的應用等方面進行了綜述。????從天然產物活性成分中開
研究海洋天然產物的意義
海洋中生物種類20多萬種，是地球上最大的資源能源寶庫，豐富的資源有待于人們研究利用， 目前人們對海洋生物的認識仍相當有限，利用率僅1％ 左右。海洋生物生活在一個具有一定水壓、較高鹽度、較小溫差、有限溶氧、有限光照的海水化學緩沖體系中。與環境因子(物理的、化學的、生物的)聯系更為密切。由于生活環境的特
DEAE柱層析純化多糖原理
DAEA：2-二乙氨基乙醇在柱層析中DAEA是作為洗脫劑的。由于糖類在水溶液中對有機物吸附能力很強，在有機溶劑中則較弱。所以用水和乙醇的溶液進行梯度洗脫。
PCR擴增產物鑒定與純化
實驗原理瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。（原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗）本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒（Agarose Gel DNA Purification Kit），該試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收并純化DNA片段的試劑盒。試劑盒采用了獨特的凝膠融解系統，結合DNA制
PCR擴增產物鑒定與純化
實驗原理 瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。（原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗） 本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒（Agarose Gel DNA Purification Kit），該試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收并純化DNA片段的試劑盒。試劑盒采用了獨特的凝膠融解系統，結合DN
直接從PCR產物回收純化DNA
1)直接加90-100μl純化緩沖液于1.5ml離心管，再加入30～300μl PCR反應物，Vortex混合；2)加入1ml樹脂輕輕Vortex 3次，每次間隔1分鐘；3)將取出拉桿的注射器筒（3ml）裝在純化柱上，加入上述DNA與樹脂混合液，然后裝上拉桿，慢慢將混合液推進純化柱內；4)卸下注射器
PCR擴增產物鑒定與純化
實驗原理 瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。（原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗） 本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒（Agarose Gel DNA Purification Kit），該試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收并純化DNA片段的試劑盒。試劑盒采用了獨特的凝膠融解系統，結合DN