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  • PCR產物純化實驗

    試劑、試劑盒 TE 或去離子水PCR 產物儀器、耗材 離心機和轉子PCR 濾 件微量離心管實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液TE(lOmmol/L Tris-HCl,lmmol/L EDTA,pH7.5) 或去離子水2. 核酸和寡核苷酸待測序的 PCR 產物3. 離心機和轉子帶有固定傾角轉子的小型離心機,如 Eppemlorf5415C4. 特殊設備AmiconMicrocon-PCR 濾件(Millipore) 或者相當的產品,微董離心管或接收管二、方法1. 對每一個待純化的 PCR 產物,都在接收管中放置一個濾件,濾件的儲液面向上儲液池中加入 400ul 去離子水或 TE,注意加樣時不要觸及膜。加入 100ulPCR 產物,避免帶進礦物油。如果 PCR 產物不足 100ul, 用去離子水或 TE 補足,蓋上蓋子。2. 將 1 中所得組合體用帶有固定傾角轉子的離心機,l000 g 離心 15 min(例如,Eppendorf......閱讀全文

    PCR-產物純化實驗

    試劑、試劑盒 TE 或去離子水PCR 產物儀器、耗材 離心機和轉子PCR 濾 件微量離心管實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液TE(lOmmol/L Tris-HCl,lmmol/L EDTA,pH7.5) 或去離子水2. 核酸和寡核苷酸待測序的 PCR 產物3. 離心機和轉子帶有固定傾角轉子的小型

    PCR-產物純化實驗

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 TE 或去離子水 PCR 產物 儀器、耗材 離心機和轉子 PCR 濾 件

    PCR-產物純化實驗

    介紹一個采用 AmiconMicrocon-PCR 濾件(Millipore) 的方法,有效地去除冗余dNTP 和引物的方法純化 PCR 產物。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒TE 或去離子水PCR 產物儀器、耗材離心機和轉子PCR 濾 件微量離心管實驗步驟

    PCR產物純化方法

    Purification of PCR Products in Preparation for CloningJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, AustraliaDavid

    簡述PCR-產物純化

    PCR 反應完成目標 DNA 的擴增后,PCR 產物可以用于進一步的研究,例如用于 DNA 測序、克隆、分析基因的功能和表達等。然而,通過 PCR 反應后體系中仍然存在具有活性的 DNA 聚合酶,剩余的 dNTP、引物以及反應緩沖體系中的各種金屬離子等。因此,我們必須通過一定的方法從反應體系中提純

    PCR產物的直接純化

    實驗概要本實驗介紹了PCR產物直接純化的原理及操作步驟。實驗原理PCR產物一般都含有過量的引物、Taq ? DNA酶及dNTP,這些成分的存在將直接影響到后續的酶切、雙脫氧PCR測序反應等過程,因此有必要除去。目前核酸純化的方法有很多,商用化試劑盒的出現使得DNA的純化過程變得更加簡便快捷。本實驗中

    PCR產物的回收純化

    PCR產物的回收純化的目的是:高質量DNA;除去蛋白(如酶等),RNA,無機鹽(NaCl超過150 mM對T4連接酶有抑制作用),小于100 bp的短片段(如引物DNA),有機小分子(如dNTP、Agrose、EB、甘油、礦物油)。

    PCR產物常規純化方法

    大批量、廉價、用于測序的PCR產物純化方法--PEG沉淀?最近,摸索了一下PEG沉淀PCR產物的方法,貼出來,與大家共享。?目的:探索一種方法,能將PCR產物大批量地、廉價地、純度比較高地純化出來,并且最好能去掉200bp以下的小片段DNA,用于DNA測序。?有文獻和方法說,不同濃度的PEG能沉淀不

    pcr產物的純化與回收實驗報告

      PCR產物的直接純化:  一、原理  PCR產物一般都含有過量的引物、 Taq DNA酶及dNTP,這些成分的存在將直接影響到后續的酶切、雙脫氧PCR測序反應等過程,因此有必要除去。目前核酸純化的方法有很多,商用化試劑盒的出現使得DNA的純化過程變得更加簡便快捷。本實驗中, Buffer PCR

    以磁性顆粒為基礎純化-PCR-產物實驗

    試劑、試劑盒 乙醇PCR 樣品儀器、耗材 自動定位器吸頭液體處理自動機械分離裝置平板密封條PCR 純化系統實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑乙醇,80%2. 核酸和寡核苷酸在 96 孔板中的 PCR 樣品(不多于100ul/孔)3. 特殊設備3 臺單位置的實驗用自動定位器(BeckmanCo

    以磁性顆粒為基礎純化-PCR-產物實驗

    MagneSil 是一種順磁性硅質顆粒,能夠充當可移動的固相物質而用于捕獲雙鏈 DNA 片段。通過洗滌黏附于硅質顆粒上的靶復合物來去除殘留污染,從而純化的目的 DNA。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒乙醇PCR 樣品儀器、耗材自動定位器吸頭液體處理自動機械分

    以磁性顆粒為基礎純化-PCR-產物實驗

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 乙醇 PCR 樣品 儀器、耗材 自動定位器 吸頭 液體處理自動機械

    PCR擴增產物鑒定與純化實驗原理及實驗過程

    實驗原理瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。(原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗)本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒(Agarose Gel DNA Purification Kit),該試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收并純化DNA片段的試劑盒。試劑盒采用了獨特的凝膠融解系統,結合DNA制

    PCR擴增產物鑒定與純化實驗原理及實驗過程

    ?實驗原理瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。(原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗)本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒(Agarose Gel DNA Purification Kit),該試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收并純化DNA片段的試劑盒。試劑盒采用了獨特的凝膠融解系統,結合DNA制備膜技

    以硅膜為基礎純化-PCR-產物實驗方法

    試劑、試劑盒 乙醇PCR 樣品儀器、耗材 真空裝置真空泵真空廢物收集裝置真空管PCR 純化系統實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑乙醇,80%(75 ml/板;使用前配制)2. 核酸和寡核苷酸在 96 孔板中的 PCR 樣品(每樣品 20?lOOul)3. 特殊設備Vac-man96 真空裝置

    以硅膜為基礎純化-PCR-產物實驗方法

    Wizard SV96 PCR 純化系統提供了一個以膜為基礎,用于從 96 孔板中進行高產率 PCR純化的方法。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒乙醇PCR 樣品儀器、耗材真空裝置真空泵真空廢物收集裝置真空管PCR 純化系統實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和

    以硅膜為基礎純化-PCR-產物實驗方法

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 乙醇 PCR 樣品 儀器、耗材 真空裝置 真空泵 真空廢物收集裝置

    實驗室PCR產物的電泳及純化分析

    實驗室PCR 產物的電泳及純化一、目的(1)了解PCR產物電泳與純化的原理。(2)熟悉和掌握PCR產物電泳與純化的操作。二、原理在PCR過程中,部分引物和dNTPs在Taq酶等因子的作用下以DNA模板為指導合成新的DNA分子,當然還有一部分的引物和dNTPs沒有完成所期望的任務,以小分子的形式存在于

    PCR擴增產物鑒定與純化

    實驗原理瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。(原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗)本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒(Agarose Gel DNA Purification Kit),該試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收并純化DNA片段的試劑盒。試劑盒采用了獨特的凝膠融解系統,結合DNA制

    PCR擴增產物鑒定與純化

      實驗原理  瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。(原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗)  本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒(Agarose Gel DNA Purification Kit),該試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收并純化DNA片段的試劑盒。試劑盒采用了獨特的凝膠融解系統,結合DN

    直接從PCR產物回收純化DNA

    1)直接加90-100μl純化緩沖液于1.5ml離心管,再加入30~300μl PCR反應物,Vortex混合;2)加入1ml樹脂輕輕Vortex 3次,每次間隔1分鐘;3)將取出拉桿的注射器筒(3ml)裝在純化柱上,加入上述DNA與樹脂混合液,然后裝上拉桿,慢慢將混合液推進純化柱內;4)卸下注射器

    PCR擴增產物鑒定與純化

      實驗原理  瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。(原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗)  本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒(Agarose Gel DNA Purification Kit),該試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收并純化DNA片段的試劑盒。試劑盒采用了獨特的凝膠融解系統,結合DN

    制備克隆用PCR產物的純化

    PCR 產物經酚:氯仿抽提、乙醇沉淀及其他一些常用方法純化后,DNA 樣品內還往往殘留了一些具有酶活性的 Taq DNA 酶與另外一些熱穩定 DNA 聚合酶(Cioweetal. 1991; Bamesl992)。這些殘余的 DNA 聚合酶連同一些殘余的 dNTP 的持續存在,常常妨礙有待進一步克隆

    PCR擴增產物鑒定與純化

    實驗概要通過瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR擴增產物,并對獲得的產物進行割膠純化回收,為接下來的DNA重組和轉化實驗提供外源DNA片段。實驗原理瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。(原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗) 本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒(Agarose Gel DNA Purifi

    制備克隆用PCR產物的純化

    實驗方法原理 PCR 產物經酚:氯仿抽提、乙醇沉淀及其他一些常用方法純化后,DNA 樣品內還往往殘留了一些具有酶活性的 Taq DNA 酶與另外一些熱穩定 DNA 聚合酶(Cioweetal. 1991; Bamesl992)。這些殘余的 DNA 聚合酶連同一些殘余的 dNTP 的持續存

    制備克隆用PCR產物的純化

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 PCR 產物經酚:氯仿抽提、乙醇沉淀及其他一些常用方法純化后,DNA 樣品內還往往殘留了一些具有酶活性的 Taq DNA 酶與另外一些熱穩定 DNA 聚合酶(Cioweetal. 1991; Bamesl992)。這些殘余的

    純化測序反應產物實驗

    試劑、試劑盒 甲酰胺核酸寡核苷酸儀器、耗材 ABI PRISM 3100Genetic Analyzer微量離心管DTR Gel Filtration Cartridges (Edge Biosystems)或相應的真空濃縮儀實驗步驟 一、材料1.緩沖液和溶液樣品上樣液所用的樣品上樣液取決于所用的設

    純化測序反應產物實驗

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 甲酰胺 核酸 寡核苷酸 儀器、耗材 ABI PRISM 3100Genetic An

    純化測序反應產物實驗

    電泳之前純化測序反應產物以去除多余的、尚未結合的染料終止子是非常必要的。離心柱可以是快速、有效地去除未結合的染料終止子。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒甲酰胺核酸寡核苷酸儀器、耗材ABI PRISM 3100Genetic Analyzer微量離心管DTR

    PCR-產物定量實驗

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 DNA 標準 TE PCR 產物 儀器、耗材 熒光計 金屬箔紙

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