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  • 影響發光劑標記技術中標記的因素

    影響標記的因素:1.發光劑的選擇。2.被標記蛋白質的性質:選用較高的純度和免疫學穩定性的抗原進行標記;抗體作為被標記物時,則要求具有較高的效價,應用提純的IgG來代替全血清。3.選擇正確的標記方法。4.原料比:IgG:發光劑:交聯劑的克分子比(mol:mol:mol)會影響結合物的發光效率。5.標記率:結合物中IgG與發光劑之間的克分子比。6.溫度:盡量選擇較低的溫度,以避免蛋白質在標記過程中活性的喪失。7.純化與保存:通過透析法、凝膠過濾法和鹽析沉淀法等進行純化。結合物一般可分裝保存在-70℃條件下,最好冷凍干燥保存。......閱讀全文

    影響發光劑標記技術中標記的因素

    影響標記的因素:1.發光劑的選擇。2.被標記蛋白質的性質:選用較高的純度和免疫學穩定性的抗原進行標記;抗體作為被標記物時,則要求具有較高的效價,應用提純的IgG來代替全血清。3.選擇正確的標記方法。4.原料比:IgG:發光劑:交聯劑的克分子比(mol:mol:mol)會影響結合物的發光效率。5.標記

    RAPD標記技術

    實驗概要運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(randomly ?amplifiled polymorphic ?DNA,隨機擴增的多態性DNA.)該RAPD技術建立于PCR基礎上,它是利用一系列(通常數百個)不同的隨機排列堿基順序的寡聚核苷酸單鏈(通常為十聚體)

    AFLP標記技術

    實驗概要AFLP也是通過限制性內切酶片段的不同長度檢測DNA多態性的一種DNA分子標記技術。但AFLP是通過PCR反應先把酶切片段擴增,然后把擴增的酶切片段在高分辨率的順序分析膠上進行電泳,多態性即以擴增片段的長度不同被檢測出來(附圖)。實驗中酶切片段首先與含有與其共同粘末端的人工接頭連接,連接后的

    RFLP標記技術

    實驗概要DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction ?Fragment Length ?Polymorphism,限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同品種(個體)基因組的限制性內切酶的酶

    免疫標記技術介紹

    免疫標記技術是指將抗原抗體反應與標記技術相結合,將已知的抗體或抗原標記上示蹤物質,通過檢測標記物,間接測定抗原-抗體復合物的一類實驗方法。常用的標記物有酶,熒光素,放射性核素,化學發光物質及膠體金等。

    親和標記技術的應用

    有人用親和標記技術直接鑒別結合部位的氨基酸殘基。其做法是將一化學性質活躍的側鏈連接到半抗原上,當此帶有側鏈的半抗原與相應抗體結合后,側鏈即與鄰近的氨基酸形成共價鍵,也就是說,結合部位鄰近的氨基酸殘基被標記了。也有人用疊氮基作側鏈連接到半抗原上,并與相應抗體結合,經紫外線照射后,疊氮基轉變成活化的硝基

    RAPD標記技術的原理

    RAPD標記(Random amplifiedpolymorphim DNA , RAPD)是由美國人Williams和Welsh等于1990年利用PCR技術發展起來的一種DNA多態性標記。它是利用隨機引物對目的基因組DNA進行PCR擴增,產物經電泳分離后顯色,分析擴增產物DNA片段的多態性,此即反

    常用單抗的標記技術

    目前動物用單抗,在動物疫病診斷和檢疫、妊娠檢測、性別鑒定等方面有廣泛的應用,大多以診斷試劑(盒)的形式提供,其中核心試劑為標記的單抗。下面將介紹最常用的幾種標記技術。1.酶標記(1)辣根過氧化物酶(HRP)標記辣根過氧化物酶(HRP)標記單抗和多克隆抗體的常用方法是過碘酸鈉法。其原理是HRP的糖基用

    免疫標記技術常用的標記物介紹

      常用的標記物有熒光素、酶、放射性核素及膠體金等。免疫標記技術具有快速、定性或定量甚至定位的特點,是應用最廣泛的免疫學檢測技術。  常用的免疫熒光素主要有:  1 .異硫氰酸熒光素 (FITC) ,最大吸收光譜為 490~495nm ,最大發射光譜為 520~530nm ,呈黃綠色熒光。  2 .

    關于免疫標記技術的簡介

      免疫標記技術指用熒光素、酶、放射性同位素或 電子致密物質等標記抗原或抗體進行的抗原 抗體反應。免疫標記技術不僅極大地提高了 抗原抗體反應的敏感性,以便對微量物質進 行定性或定量檢測,而且結合以顯微鏡或電 鏡技術,能對待測物進行精確的定位檢測。 免疫標記技術有三種基本類型:免疫熒光 法、免疫酶技術

    PCR-SSCP標記技術

    實驗概要日本Orita等研究發現,單鏈DNA片段呈復雜的空間折疊構象,這種立體結構主要是由其內部堿基配對等分子內相互作用力來維持的,當有一個堿基發生改變時,會或多或少地影響其空間構象,使構象發生改變,空間構象有差異的單鏈DNA分子在聚丙烯酰胺凝膠中受排阻大小不同.因此,通過非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(

    免疫金標記技術原理

    免疫金標記技術原理:膠體金顆粒表面負電荷與蛋白質的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結合。膠體金對蛋白質有很強的吸附功能,蛋白質等高分子被吸附到膠體金顆粒表面,無共價鍵形成,標記后大分子物質活性不發生改變。金顆粒具有高電子密度的特性。金標蛋白在相應的配體處大量聚集時,在顯微鏡下可見黑褐色顆粒或肉眼可見紅

    放射免疫標記技術

    一、放射免疫標記技術放射免疫標記技術是將同位素分析的高靈敏度與抗原抗體反應的特異性相結合,以放射性同位素作為示蹤物的標記免疫測定方法,由于此項技術具有靈敏度高 (可檢測出毫微克(ng)至微微克(pg),甚至毫微微克(fg)的超微量物質,特異性強(可分辨結構類似的抗原)、重復性強、樣品及試劑用量少

    免疫標記技術及其應用

    近二十幾年來,免疫學檢測的方法發展很快,特別是在使用標記了的抗原和抗體的分析技術以后,使檢測的敏感性和特異性都大大提高。繼20世紀50年代的免疫熒光(1FA)和60年代的放射免疫(RIA)分析技術之后,在70年代初期又建立了用酶來標記抗原或抗體的分析技術。 標記免疫技術是將某種可微量測定或超微量

    化學發光免疫分析方法中,化學發光劑的選擇有哪些考量因素?

    在化學發光免疫分析方法中,選擇化學發光劑時通常需要考慮以下因素:發光效率:發光劑的發光效率越高,產生的信號越強,檢測靈敏度就可能越高。穩定性:化學發光劑在儲存和反應過程中應保持穩定,不易分解或變質,以確保檢測結果的重復性和準確性。水溶性:良好的水溶性有助于與免疫反應體系中的其他成分均勻混合,提高反應

    免疫球蛋白標記技術_酶標記抗體

    免疫標記技術是用特定的物質標記抗原或抗體進行的抗原抗體反應。可借助各種儀器觀察結果或進行自動化測定,可在細胞、亞細胞、超微結構及分子水平上,對抗原抗體反應進行定性和定位研究;或應用各種液相和固相免疫分析方法,對液體中的抗原、半抗原或抗體進行定性和定量測定。實驗方法原理酶標記物包括酶標記抗原、酶標記抗

    固相時間分辨熒光免疫分析的標記技術及標記過程中...

    本研究利用BCPDA進行固相TRF IA研究,它克服了解離增強體系需增強溶液、易受環境銪離子污染、只能液相測量等缺點,簡化了測量步驟。結合BCPDA標記BSA,研究標記過程中的蛋白質含量測定。為TRF IA體系提供理論依據和實驗技術 。材料和方法1 材料1. 1 儀器 分光光度計,核酸蛋白檢測儀,

    分子發光分析法影響因素

    熒光量子產率 物質分子吸收輻射后,能否發生熒光取決于分子的結構。熒光強度的大小不但與物質的分子結構有關,也與環境因素有關。?1.熒光量子產率??又稱熒光效率 它表示物質發射熒光的能力,Φ越大,發射的熒光越強。由前面已經提到的熒光產生的過程中可以明顯地看出,物質分子的熒光產率必然由激發態分子之活化過程

    免疫分析法的標記技術

    基本原理:采用熒光素、同位素或酶等示蹤物質 標記抗體(或抗原)進行抗原 -抗體反應,通過對免疫復合物中的標記物的測定,達到對免疫反應進行監測的目的。標記免疫技術主要類型:放射免疫技術、酶免疫技術、熒光免疫技術、化學發光免疫技術 基本原理:利用化學或生物發光系統作為抗原抗體反應的指示系統,借以定量檢測

    免疫分析法的標記技術

    基本原理:采用熒光素、同位素或酶等示蹤物質 標記抗體(或抗原)進行抗原 -抗體反應,通過對免疫復合物中的標記物的測定,達到對免疫反應進行監測的目的。標記免疫技術主要類型:放射免疫技術、酶免疫技術、熒光免疫技術、化學發光免疫技術 基本原理:利用化學或生物發光系統作為抗原抗體反應的指示系統,借以定量檢測

    免疫分析法的標記技術

      基本原理:采用熒光素、同位素或酶等示蹤物質 標記抗體(或抗原)進行抗原 -抗體反應,通過對免疫復合物中的標記物的測定,達到對免疫反應進行監測的目的。  標記免疫技術主要類型:放射免疫技術、酶免疫技術、熒光免疫技術、化學發光免疫技術  放射免疫標記技術(RIA)  基本原理:根據抗原抗體特異性結合

    免疫分析法的標記技術

    基本原理:采用熒光素、同位素或酶等示蹤物質 標記抗體(或抗原)進行抗原 -抗體反應,通過對免疫復合物中的標記物的測定,達到對免疫反應進行監測的目的。標記免疫技術主要類型:放射免疫技術、酶免疫技術、熒光免疫技術、化學發光免疫技術 基本原理:利用化學或生物發光系統作為抗原抗體反應的指示系統,借以定量檢測

    常用的免疫標記技術有哪些

    免疫標記技術指用熒光素、酶、放射性同位素或 電子致密物質等標記抗原或抗體進行的抗原 抗體反應。免疫標記技術不僅極大地提高了 抗原抗體反應的敏感性,以便對微量物質進 行定性或定量檢測,而且結合以顯微鏡或電 鏡技術,能對待測物進行精確的定位檢測。 免疫標記技術有三種基本類型:免疫熒光 法、免疫酶技術和放

    膠體金標記技術在免疫學中的應用

    膠體金標記技術由于標記物的制備簡便,方法敏感、特異,不需要使用放射性同位素,或有潛在致癌物質的酶顯色底物,也不要熒光顯微鏡,它的應用范圍廣,除應用于光鏡或電鏡的免疫組化法外,更廣泛地應用于各種液相免疫測定和固相免疫分析以及流式細胞術等。1.液相免疫測定:將膠體金與抗體結合,建立微量凝集試驗檢測相應的

    免疫球蛋白標記技術

    酶標記抗體 熒光素標記抗體技術 125I標記單克隆抗體技術 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 酶標記物包括酶標記抗原、酶標記抗體和酶標記SPA等。酶標記物質量

    免疫熒光標記技術

    .原理免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。直接法:將標記

    免疫球蛋白標記技術

    實驗方法原理 酶標記物包括酶標記抗原、酶標記抗體和酶標記SPA等。酶標記物質量的好壞直接關系到免疫酶技術的成功與否,因此被稱為關鍵的試劑。酶標記物中最常用的是酶標記抗體,它是將酶與特異性抗體經適當方法連接而成。酶標記抗體的質量主要取決于純度好、活性強及親和力高的酶和抗體,其次要有良好的制備方法。目前

    多肽FRET熒光標記技術

    熒光標記所依賴的化合物稱為熒光物質。熒光物質是指具有共軛雙鍵體系化學結構的化合物,受到紫外光或藍紫光照射時,可激發成為激發態,當從激發態恢復基態時,發出熒光。熒光標記技術指利用熒光物質共價結合或物理吸附在所要研究分子的某個基團上,利用它的熒光特性來提供被研究對象的信息。熒光標記的無放射物污染,操作簡

    免疫分析法標記技術

      基本原理:采用熒光素、同位素或酶等示蹤物質 標記抗體(或抗原)進行抗原 -抗體反應,通過對免疫復合物中的標記物的測定,達到對免疫反應進行監測的目的。  標記免疫技術主要類型:放射免疫技術、酶免疫技術、熒光免疫技術、化學發光免疫技術  放射免疫標記技術(RIA)  基本原理:根據抗原抗體特異性結合

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