有絲分裂(Feulgen染色)制片技術
實驗概要 1、通過本實驗的學習,初步掌握植物染色體制片,奠定細胞遺傳學研究的基本技術; 2、通過對植物根尖細胞的觀察,掌握有絲分裂過程中染色體的形態特征和動態變化; 3、掌握Feulgen染色方法。 實驗原理 有絲分裂(mitosis)是植物細胞分裂的主要方式,細胞分裂過程中,核內染色體準確地復制,并有規律地、均勻地分配到兩個子細胞中去,保證了植物細胞的遺傳性狀的一致。各種生長旺盛的植物組織中,如根尖組織、莖尖組織、居間分生組織、愈傷組織等,每天都有分裂高鋒時間,此時經預處理,固定、解離、染色和涂抹壓片等方法,在顯微鏡下可以觀察到處于有絲分裂各時期的細胞和染色體。 孚爾根染色法是鑒別細胞中DNA反應的組織化學方法。細胞內的DNA(通常位于核及染色體上)在1N HCl 60℃水解時部分地破壞了脫氧核糖與嘌呤堿之間的糖苷鍵而使嘌呤堿脫掉,從而使脫氧核糖的第一個碳原......閱讀全文
光學顯微鏡的使用、植物細胞有絲分裂的制片和觀察(2)
(三)固定用蒸餾水洗凈材料,再用卡諾固定液(用量應為材料體積的15倍以上)室溫下固定30~60分鐘。固定的材料如暫不制片,可經90%酒精→80%酒精→70%酒精(各半小時)浸泡進行轉換,最后置于70%酒精內放入0~4℃冰箱,約可保存半年。如保存時間太長,需重新固定后再用。(四)解離根尖、莖尖等體細胞
光學顯微鏡的使用、植物細胞有絲分裂的制片和觀察(1)
一、目的與要求1、掌握光學顯微鏡的構造及使用方法。2、掌握植物根尖細胞有絲分裂制片技術。3、掌握有絲分裂過程中染色體的形態特征和動態變化。二、實驗原理有絲分裂是植物細胞分裂的主要方式,細胞分裂過程中,核內染色體準確地復制,并有規律地、均勻地分配到兩個子細胞中去,使子細胞和母細胞的遺傳組成一樣,保證了
植物細胞有絲分裂觀察——染色觀察法
實驗材料蠶豆側根試劑、試劑盒結晶紫 醋酸洋紅 醋酸地衣紅 改良石炭酸品紅 鹽酸儀器、耗材鑷子 載玻片 吸水紙 顯微鏡 蓋玻片 酒精燈刀片中期 (metaphase)從染色體排列到赤道面上,到它們的染色單體開始分向兩極之前,這段時間稱為中期。有時把前中期也包括在中期之內。中期染色體在赤道面形成所謂赤道
植物染色體組型分析
實驗概要分析植物細胞有絲分裂中期染色體數目、大小、著絲粒位置和隨體等形態特征,學習染色體組型分析的方法。為遺傳育種研究提供細胞學證據。實驗原理各種生物染色體的形態,結構和數目都是相對穩定的。每一生物細胞內特定的染色體組成叫染色體組型。染色體組型分析也稱核型分析。通過一定的方法制得染色體有絲分裂的玻片
病理制片技術——組織石蠟切片
組織經石蠟包埋后制成的蠟塊,用切片機制成切片的過程為石蠟切片法。石蠟切片法現使用的切片機有平推式切片機、輪轉式切片機兩種。一、平推式切片機石蠟切片法1.切片前的準備:清洗過的載物片(或免清洗的),毛筆,鉛筆,小竹片,水槽,霧化器,攤片器,切片刀,刀架。2.切片制作步驟:刀架的粗削部放在頭端,在切片機
減數分裂制片技術
實驗概要1、了解植物生殖細胞的形成過程;?2、熟悉減數分裂各時期的特點,加深對減數分裂的認識;?3、掌握植物花粉母細胞的壓片技術和方法。實驗原理減數分裂(meiosis),又稱成熟分裂(maturation division)是在性母細胞成熟時,配子形成過程中所發生的一種特殊方式的有絲分裂。
果蠅唾腺染色體制片實驗_觀察法
實驗方法原理果蠅唾腺染色體是處于體細胞同源染色體的配對狀態,由于多次復制而不分開,因而形成具有1 000-4 000根染色體絲的巨大染色體,又稱為多線染色體.,本實驗利用剖離果蠅三齡幼蟲的唾腺,,壓制染色體玻片標本的方法,觀察多線染色體的特征。實驗材料果蠅試劑、試劑盒水醋酸洋紅儀器、耗材解剖針雙筒解
臂長決定有絲分裂染色體寬度
科技日報北京12月6日電 (實習記者張佳欣)有絲分裂染色體中DNA壓縮的大小和程度因生物而異。這是如何調控的,即什么因素控制著有絲分裂染色體的形成和尺寸,仍是一個謎。由日本早稻田大學、英國弗朗西斯·克里克研究所和日本癌癥研究基金會科學家組成的聯合團隊正在著手破解這一謎團。現階段研究結果發表在最新一期
臂長決定有絲分裂染色體寬度
科技日報北京12月6日電 (實習記者張佳欣)有絲分裂染色體中DNA壓縮的大小和程度因生物而異。這是如何調控的,即什么因素控制著有絲分裂染色體的形成和尺寸,仍是一個謎。由日本早稻田大學、英國弗朗西斯·克里克研究所和日本癌癥研究基金會科學家組成的聯合團隊正在著手破解這一謎團。現階段研究結果發表在最新一期
同源染色體在有絲分裂中的功能
同源染色體在有絲分裂中的功能與減數分裂中的功能不相同。在每個細胞經歷有絲分裂之前,親體細胞中的染色體會自身復制。但細胞內的同源染色體通常不會配對也不進行基因重組。相反,復制子或姐妹染色單體將沿著中期板排列,然后以與減數分裂II相同的方式分離, 即通過核有絲分裂紡錘體在它們的著絲粒處被拉開。即使在有絲
有關有絲分裂的染色體運動介紹
后期時兩組子染色體向兩極移動,而在有些細胞兩極也被推開更遠。關于這種運動的機制尚無定論。后期時著絲粒微管在向極的末端不斷解聚,因而逐漸變短。這可能是使染色體被拉向兩極的重要原因。因為在體外實驗中給模型細胞添加O以阻抑微管的解聚時,則染色體向兩極移動過程停止,反之,如果添加少量秋水仙素以促使微管解
病理制片技術——冷凍切片的制作
一、概述 冷凍切片是利用物理降溫的方法將新鮮的組織標本冷凍使其產生一定的硬度進行切片的技術方法。與石蠟切片相比,由于冷凍切片不需脫水包埋因此制片速度 快,是為手術進行中的臨床醫師提供病理診斷的良好方法。此外由于冷凍切片的標本是未經固定的新鮮組織,因此冷凍切片也是脂肪染色、酶
石蠟制片法(用于免疫組織化學,HE染色)
?石蠟制片法是將材料經固定、脫水、透明、浸蠟后包埋在石蠟里面進行切片的方法。此法適用范圍,制片手段完備,能將材料切成極薄的片子(可切至2-8微米左右),并能制成連續的片子,這是其它制片法難以達到的,因此在光學顯微鏡的制片技術上它是最常用的一種方法。除了一些經不住石蠟切片法中所應用的各種藥劑處理的材料
洋蔥根尖有絲分裂染色體標本制備及觀察實驗
實驗方法原理 有絲分裂是細胞均等增殖的過程,是體細胞分裂的主要方式.在有絲分裂過程中,細胞內每條染色體都能復制一份,然后分配到子細胞中,因此兩個子細胞與母細胞所含的染色體在數目、形態和性質上均是相同的,在各種生長旺盛的植物組織中均存在著有絲分裂。分生組織→固定→解離→染色→壓片→觀察(間期、早期、中
人外周血淋巴細胞的培養及染色體制片實驗
實驗方法原理外周血是制備動物染色體標本的重要材料之一,但通常情況下哺乳動物的外周血中是沒有分裂相的,其他動物如兩棲類外周血中也只是偶爾能見到分裂相。外周血中的小淋巴細胞幾乎都處于G1期或G0期,在人工離體培養的培養基中加入植物凝集素(photohemagglutinin,PHA)后,小淋巴細胞受刺激
人體外周血淋巴細胞培養及染色體制片
實驗概要學習和掌握人體微量血液體外培養制備染色體標本的方法。實驗原理人體的1ml 外周血中一般含有約1-3×106個小淋巴細胞,通常它們都處于間期的GO和G1期。在培養條件下給予藥物刺激時,經過53-72小時可在培養物中獲得大量的有絲分裂細胞,供染色體標本制備和分析之用。這種外周血培養方法是在1
人外周血淋巴細胞的培養及染色體制片實驗
實驗方法原理 外周血是制備動物染色體標本的重要材料之一,但通常情況下哺乳動物的外周血中是沒有分裂相的,其他動物如兩棲類外周血中也只是偶爾能見到分裂相。外周血中的小淋巴細胞幾乎都處于G1期或G0期,在人工離體培養的培養基中加入植物凝集素(photohemagglutinin,PHA)后,小淋巴細胞受刺
病理制片技術——常用試劑及染液的配制
1.試劑準備:蘇木精10 g,硫酸鋁鉀80 g,無水乙醇200 ml,蒸餾水2000 rnl,氧化汞3 g,冰乙酸40ml。2.配制步驟(1)將2000 ml蒸餾水注入一只3000 的大號三角燒瓶內,加入80 g硫酸鋁鉀后置電爐或電磁爐上加熱硫酸鋁鉀完全溶解。(2)將200 ml無水乙醇注入一只30
染色技術
由于微生物細胞含有大量水分(一般在80-90%以上),對光線的吸收和反射與水溶液的差別不大,與周圍背景沒有明顯的明暗差。所以,除了觀察活體微生物細胞的運動性和直接計算菌數外,絕大多數情況下都必須經過染色后,才能在顯微鏡下進行觀察。但是,任何一項技術都不是完美無缺的。染色后的微生物標本是死的,在染色過
染色技術
由于微生物細胞含有大量水分(一般在80-90%以上),對光線的吸收和反射與水溶液的差別不大,與周圍背景沒有明顯的明暗差。所以,除了觀察活體微生物細胞的運動性和直接計算菌數外,絕大多數情況下都必須經過染色后,才能在顯微鏡下進行觀察。但是,任何一項技術都不是完美無缺的。染色后的微生物標本是死的,在染
植物花粉母細胞減數分裂染色體制片與觀察
一、實驗目的了解高等植物小孢子母細胞減數分裂的過程,觀察減數分裂中染色體 ?的動態變化;學習并掌握植物細胞減數分裂染色體標本的制作方法。二、實驗材料玉米(Zea mays )2n=20、水稻(Oryza sativa )2n=24、蠶豆(Vicia faba )2n=12等作物的花藥,任選一種。
顯微制片試液
試液——封藏劑3.l??水合氯醛試液??為常用封藏液,也是透化劑。可使干縮的細胞膨脹而透明,并能溶解淀粉粒、樹脂、蛋白質、葉綠素及揮發油等,加熱后更為明顯。3.2??甘油醋酸試液(斯氏液)??為常用封藏液,專用于觀察淀粉形態,可使淀粉粒保持原形,便于測量其大小。3.3??甘油-乙醇溶液??封藏液,也
細胞分裂指數的實驗方法
實驗 用秋水仙素將細胞處理1~2小時后,按染色體制片法制片并染色,計算1000個細胞中分裂相的數目,重復3-4次取平均值,用百分比表示。 秋水仙素能抑制有絲分裂,破壞紡錘體,使染色體停滯在分裂中期。 注意事項 操作時動作要輕,以免使蓋片上的細胞脫落。 觀察時要掌握好分裂相標準,主要是確
洋蔥根尖有絲分裂染色體標本制備及觀察實驗_壓片法
實驗方法原理有絲分裂是細胞均等增殖的過程,是體細胞分裂的主要方式.在有絲分裂過程中,細胞內每條染色體都能復制一份,然后分配到子細胞中,因此兩個子細胞與母細胞所含的染色體在數目、形態和性質上均是相同的,在各種生長旺盛的植物組織中均存在著有絲分裂。?分生組織→固定→解離→染色→壓片→觀察(間期、早期、中
植物細胞的有絲分裂
植物細胞在進行生長發育過程中,不斷地進行細胞分裂,增加細胞的數目。植物細胞分裂的方式,最普遍、最常見的是有絲分裂。植物的根尖、莖尖分生組織和形成層,主要以有絲分裂方式進行分裂。 要做好這次實驗必須考慮到兩個問題:第一要掌握好細胞進行有絲分裂的時間,否則很難觀察到有絲分裂的全過程,有時甚至看不
有絲分裂實驗
實驗原理:細胞中的DNA受1NHC1,60℃水解作用以后,核酸中的嘌呤堿很快完全被除掉,使脫氧核糖中潛在的醛基獲得自由狀態。水解后,組織要經水洗再移至希夫(Schiff)試劑 中,希夫試劑 即同露出來的醛基發生反應,呈現紫紅色。這個反應是Feulgen在1942年提出來的,是DNA的一個特異性檢
植物細胞分裂和植物分生組織實驗
實驗方法原理1. ?了解植物細胞分裂的三種方式;認識分生組織在植物體上的位置及其類型。2. ?掌握植物細胞有絲分裂和減數分裂各時期的特征;掌握分生組織的結構特點。實驗材料洋蔥根尖鴨跖草大蒜苗永久制片油菜莖尖新鮮莖段胡桃刺槐枝條小麥幼莖試劑、試劑盒冰醋酸醋酸洋紅龍膽紫醋酸碘化鉀番紅水儀器、耗材顯微鏡水
細菌染色技術(單染技術與革蘭氏染色)
細菌 ?個體微小,普通光學顯微鏡下不易直接觀察,故常用染色技術使細菌細胞著色。包括細菌單染技術、細菌的革蘭氏染色技術、細菌的芽孢染色技術、細菌的莢膜染色技術和細菌的鞭毛染色技術 Ⅰ、細菌的單染技術 簡單染色通常只用一種染色劑,使細菌整個細胞染上顏色。但看不清結構。所以只便于檢查細菌的形態
臨時裝片的制作
一 目的:?1.學習并掌握臨時裝片的制作方法。2.完成基本實驗要求的基礎上,依自己的興趣,制作更多的臨時裝片二 背景知識1. 玻片標本類型:按照制作標本可保存的時間長短,可分為兩類。(1)臨時玻片標本:是實驗中觀察標本常采用的方法,保存時間不長久是本法的缺點。如:草履蟲形態及應激性、口腔上皮細胞、植
臨時裝片的制作
一 目的:? 1.學習并掌握臨時裝片的制作方法。2.完成基本實驗要求的基礎上,依自己的興趣,制作更多的臨時裝片二 背景知識1. 玻片標本類型:按照制作標本可保存的時間長短,可分為兩類。(1)臨時玻片標本:是實驗中觀察標本常采用的方法,保存時間不長久是本法的缺點。如:草履蟲形態及應激性、口腔上皮細胞