流式抗體選擇
很多朋友面對各種各樣顏色的流式抗體，在選擇及搭配上就犯了難，在此我們需要了解下流式細胞儀的各個激發光及各個接收通道是如何工作的、常見的熒光素有哪些、這些熒光的特性是什么樣的。了解了這些，選擇抗體和搭配不同的顏色就變得非常簡單了。我們再回過頭來看看流式細胞儀的原理，熟悉一下流式細胞儀的光路系統。從這張圖中我們可以看到，激光照射細胞后會產生很多波長的信號，不同的透鏡和濾光片將不同的熒光素的熒光信號區分開，由不同的通道進行接收。光信號通過光電倍增管轉化為電信號，不同強弱的信號反應了細胞不同的物理或者化學性質。不同型號的流式細胞儀所配備的激光數目和接收通道可能是不同的，常見的是488激光器、此外還有紫外激光器、紫激光器以及紅激光器。通道的順序一般為488激光器先排序，紫外或紫激光器次之，紅激光器最后。來源于同一個激光器的信號，原則上按波長從短到長進行排序，當然也可以自定義通道順序。通道既可以以數字命名也可以以主要的熒光素進行命名。目前市......閱讀全文
流式抗體選擇
很多朋友面對各種各樣顏色的流式抗體，在選擇及搭配上就犯了難，在此我們需要了解下流式細胞儀的各個激發光及各個接收通道是如何工作的、常見的熒光素有哪些、這些熒光的特性是什么樣的。了解了這些，選擇抗體和搭配不同的顏色就變得非常簡單了。我們再回過頭來看看流式細胞儀的原理，熟悉一下流式細胞儀的光路系統。從這張
怎么選擇流式抗體？
我們開始流式實驗時，首先要選擇抗體，必然要涉及到熒光的選擇，盡量使這些熒光的補償值降到zui低。?1，我們需要了解我們用的流式細胞儀的硬件設施（激光，濾光片）??2，選擇合適的熒光染料，盡量利用到你的儀器上的所有激光，這樣可以使這些熒光交叉可能性達到zui小。一般四種顏色或以下的比較好選，常用：FI
怎么選擇流式抗體
我們開始流式實驗時，首先要選擇抗體，必然要涉及到熒光的選擇，盡量使這些熒光的補償值降到zui低。?1，我們需要了解我們用的流式細胞儀的硬件設施（激光，濾光片）??2，選擇合適的熒光染料，盡量利用到你的儀器上的所有激光，這樣可以使這些熒光交叉可能性達到zui小。一般四種顏色或以下的比較好選，常用：FI
怎么選擇流式抗體？
我們開始流式實驗時，首先要選擇抗體，必然要涉及到熒光的選擇，盡量使這些熒光的補償值降到zui低。?1，我們需要了解我們用的流式細胞儀的硬件設施（激光，濾光片）??2，選擇合適的熒光染料，盡量利用到你的儀器上的所有激光，這樣可以使這些熒光交叉可能性達到zui小。一般四種顏色或以下的比較好選，常用：FI
流式抗體（熒光抗體）細胞染色步驟與注意
染色緩沖液（BSA）的配制：PBS含有1% FBS和0.09% NaN3，置于冰上或4度冰箱備用。準備單細胞懸液：淋巴組織、骨髓、血液或培養的細胞。用冰染色緩沖液洗細胞2次，離心細胞，用冰染色緩沖液重懸細胞，使終濃度為2×107細胞/ml。各取50ul（106細胞）細胞懸液到2個圓底的Ep管中。根據
流式抗體染色不避光會怎樣
流式抗體熒光標記搭配主要由3個因素決定的： 流式細胞儀能檢測多少個通道 需要同時檢測檢測多少個指標 廠家的抗體有多少種熒光標記 如果流式細胞儀的通道越多，那么同一份樣本能同時做的表面/胞內標志就越多 A、 如何根據流式細胞儀搭配流式抗體 1） BD流式細胞儀 BD流式試劑選擇及應用
eBioscience流式抗體常見問題與解答
1、eBioscience公司提供了哪些抗體？ ?A：物種——人、小鼠、大鼠、非人靈長類、犬類等。檢測指標——包括細胞表面標記（CD分子，膜骨架，趨化因子受體）和胞內指標（細胞因子，核內轉錄因子）。抗體標記——生物素標記抗體，親和純化抗體以及直標熒光素抗體。eB抗體的直標熒光素有（括號內是發射光波長
使用eBioscience流式抗體的常見問題
Q. 是否能渦旋震蕩抗體或重組蛋白？我們不推薦震蕩蛋白或抗體溶液，這會改變產品的特性。通常在運輸過程中，液體有可能已經分散在管子中。推薦使用之前，瞬時離心，這樣抗體會沉到管底，以達到標示的體積。Q. 我能渦旋震蕩已經標記了抗體的細胞樣品嗎？可以，短時震蕩能保持細胞的最佳狀態。Q. 標記了tandem
免疫組化抗體選擇要點及流式抗體選擇常識
一抗的選擇要點1.選擇單克隆還是多克隆抗體？由一種B細胞產生的單一特異性抗體叫做單克隆抗體，單克隆抗體能目標明確地與單一特異抗原決定簇結合，就像導彈精確地命中目標一樣。另一方面，即使是同一個抗原決定簇，在機體內也可以由好幾種B細胞產生抗體，形成抗體混雜物，稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應中，一般單克隆
熒光分選細胞時，流式抗體用什么稀釋
抗體是加到細胞懸液當中的。根據細胞的情況，緩沖液也是不一樣的。活細胞，固定的細胞差別都很大。抗體是不用事先稀釋的，直接加入細胞懸液
如何選擇合適的流式細胞術抗體？
選擇合適的流式細胞術抗體可以考慮以下幾個方面：特異性：確保抗體能夠特異性識別目標抗原，避免與其他相似抗原發生交叉反應。可以查閱相關文獻、產品說明書以及其他研究人員的使用經驗。克隆號：不同克隆號的抗體可能在性能上有所差異。有些克隆號的抗體經過廣泛驗證和應用，可能更可靠。熒光素標記：根據流式細胞儀的配置
質譜流式細胞術抗體應用研究
CyTOF?質譜流式細胞術——The Scientist雜志評選出的2011年十大創新技術。 CyTOF質譜流式細胞術，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體或者染料）標記或識別細胞表面和內部的信號分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用感應耦合等離子質譜（ICP-MS）觀察單個細胞的原
用流式細胞術檢測血小板相關抗體
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 一種能夠通過胎盤存在于血小板表面的免疫球蛋白，被稱為血小板相關抗體（PA-IgG）。 實驗材料 羊 F（ab+）2 2 IgG-PE
流式細胞儀分選細胞，怎樣選擇抗體
有這么幾個原則：盡量使用已經用熒光素標記好的單克隆抗體。如果是單色實驗，熒光素的亮度越強越好，比如標記了APC的抗體就要比標記了pacific blue的在相同抗原量，抗體用量相同的情況下，要亮很多如果是多色實驗，除了不要使用光譜重疊度高的熒光素以外，還要搭配染色指數。簡單的說，就是用亮度強的熒光素
流式封閉抗體報告單怎么看
懷孕之后胎兒是屬于外來物質，會受到免疫細胞的攻擊導致孕婦流產，但是有了封閉抗體的存在，母體會自動將胎兒列為自身物質，保證了寶寶的健康成長，如果孕婦該抗體缺乏的話，是要及時檢查治療的，那流式封閉抗體報告單怎么看?流式封閉抗體報告單怎么看 1、封閉抗體的檢測是做兩管，都是染T亞群(CD3、CD4、
用流式細胞術檢測血小板相關抗體
實驗方法原理一種能夠通過胎盤存在于血小板表面的免疫球蛋白，被稱為血小板相關抗體（PA-IgG）。實驗材料羊 F（ab+）2 2 IgG-PE抗體血樣試劑、試劑盒洗滌緩沖液儀器、耗材流式細胞儀實驗步驟一、試劑洗滌緩沖液（PBS/EDTA/BSA），PBS 緩沖液，含 10 mmol/L EDTA 和
用流式細胞術檢測血小板相關抗體
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 一種能夠通過胎盤存在于血小板表面的免疫球蛋白，被稱為血小板相關抗體（PA-IgG）。 實驗材料 羊 F（ab+）2 2 IgG-PE
如何評估流式細胞術抗體的特異性？
以下是一些評估流式細胞術抗體特異性的方法：查閱文獻和產品說明書：許多抗體供應商會在產品說明書中提供關于抗體特異性的詳細信息，包括經過驗證的細胞類型和應用。同時，查閱相關的科學文獻，了解其他研究人員在類似實驗中使用該抗體的情況和結果。交叉反應性測試：使用已知表達相關抗原和不表達相關抗原的細胞系或組織進
常見的流式細胞術抗體特異性驗證方法
常見的流式細胞術抗體特異性驗證方法：免疫熒光染色共定位：使用該抗體與已知針對同一細胞結構或分子但標記不同熒光素的另一種抗體同時進行染色。通過觀察兩種熒光信號的共定位情況，如果高度重合，說明該抗體具有較好的特異性。競爭抑制實驗：在抗體染色前，先加入過量的未標記的相同抗原，然后再加入標記的抗體進行染色。
常見的流式細胞術抗體特異性驗證方法
以下是一些常見的流式細胞術抗體特異性驗證方法：免疫熒光染色對照實驗：陽性對照：使用已知高表達目標抗原的細胞或組織切片進行染色，觀察預期的陽性信號。陰性對照：選取已知不表達目標抗原的細胞或組織進行染色，應無明顯信號。同型對照：使用與實驗抗體同亞型、同熒光素標記但無特異性結合能力的同型抗體作為對照，排除
流式細胞檢測中抗體信號弱，累覺不愛，啥原因？
1、抗體儲存確保你的抗體保存在4℃并且避光。如果抗體結合了熒光素，那么千萬不要冷凍保存，因為這可能會導致熒光抗體的沉淀和聚集。還有，要確保抗體沒有過期。2、稀釋你是不是一直在用廠家推薦的量做實驗？你可能需要進行抗體滴定找到最佳抗體用量。3、儀器--濾光片設置確保流式機器配置有合適的、能夠檢測到你所用
如何優化流式細胞術抗體的特異性驗證實驗？
以下是一些優化流式細胞術抗體特異性驗證實驗的建議：多種方法結合：不要僅僅依賴于一種驗證方法，而是綜合使用多種，如免疫熒光染色對照、競爭抑制實驗、敲除細胞株驗證、交叉反應檢測等，以從不同角度評估抗體特異性。優化細胞模型：除了常用的細胞系，考慮使用原代細胞或更接近體內生理狀態的 3D 細胞培養模型，以提
流式做簡標抗體一抗，二抗分別孵多長時間
(1)單抗包被-抗原-酶標二抗-底物顯色。本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體，經洗滌后加入含有抗原之待測樣品，如待檢樣品中有相應抗原存在，即可與包被于固相載體上的特異性抗體結合，經保溫孵育洗滌后，即可加入酶標記特異性抗體，再經孵育洗滌后，加底物顯色進行測定，底物降解的量即為欲測抗原的量。(2)單
流式做簡標抗體一抗，二抗分別孵多長時間
(1)單抗包被-抗原-酶標二抗-底物顯色。本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體，經洗滌后加入含有抗原之待測樣品，如待檢樣品中有相應抗原存在，即可與包被于固相載體上的特異性抗體結合，經保溫孵育洗滌后，即可加入酶標記特異性抗體，再經孵育洗滌后，加底物顯色進行測定，底物降解的量即為欲測抗原的量。(2)單
流式做簡標抗體一抗，二抗分別孵多長時間
(1)單抗包被-抗原-酶標二抗-底物顯色。本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體，經洗滌后加入含有抗原之待測樣品，如待檢樣品中有相應抗原存在，即可與包被于固相載體上的特異性抗體結合，經保溫孵育洗滌后，即可加入酶標記特異性抗體，再經孵育洗滌后，加底物顯色進行測定，底物降解的量即為欲測抗原的量。(2)單
流式做簡標抗體一抗，二抗分別孵多長時間
(1)單抗包被-抗原-酶標二抗-底物顯色。本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體，經洗滌后加入含有抗原之待測樣品，如待檢樣品中有相應抗原存在，即可與包被于固相載體上的特異性抗體結合，經保溫孵育洗滌后，即可加入酶標記特異性抗體，再經孵育洗滌后，加底物顯色進行測定，底物降解的量即為欲測抗原的量。(2)單
流式檢測膜蛋白表達的變化用多克隆抗體出結果的機會...
流式檢測膜蛋白表達的變化用多克隆抗體出結果的機會大嗎？流式的抗體和WB的抗體是不同的（有部分可以通用），多抗一般是大的變性蛋白為抗原制備的，而WB的中被檢測蛋白就是變性狀態，所以很吻合，而流失中一般蛋白還是保持了天然構象，所以產生的多抗可能不太好，而需要用很小特定的決定簇為抗原制備單克隆抗體。
流式做簡標抗體一抗，二抗分別孵多長時間
(1)單抗包被-抗原-酶標二抗-底物顯色。本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體，經洗滌后加入含有抗原之待測樣品，如待檢樣品中有相應抗原存在，即可與包被于固相載體上的特異性抗體結合，經保溫孵育洗滌后，即可加入酶標記特異性抗體，再經孵育洗滌后，加底物顯色進行測定，底物降解的量即為欲測抗原的量。(2)單
流式做簡標抗體一抗，二抗分別孵多長時間
(1)單抗包被-抗原-酶標二抗-底物顯色。本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體，經洗滌后加入含有抗原之待測樣品，如待檢樣品中有相應抗原存在，即可與包被于固相載體上的特異性抗體結合，經保溫孵育洗滌后，即可加入酶標記特異性抗體，再經孵育洗滌后，加底物顯色進行測定，底物降解的量即為欲測抗原的量。(2)單
流式做簡標抗體一抗，二抗分別孵多長時間
(1)單抗包被-抗原-酶標二抗-底物顯色。本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體，經洗滌后加入含有抗原之待測樣品，如待檢樣品中有相應抗原存在，即可與包被于固相載體上的特異性抗體結合，經保溫孵育洗滌后，即可加入酶標記特異性抗體，再經孵育洗滌后，加底物顯色進行測定，底物降解的量即為欲測抗原的量。(2)單