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  • 流式抗體選擇

    很多朋友面對各種各樣顏色的流式抗體,在選擇及搭配上就犯了難,在此我們需要了解下流式細胞儀的各個激發光及各個接收通道是如何工作的、常見的熒光素有哪些、這些熒光的特性是什么樣的。了解了這些,選擇抗體和搭配不同的顏色就變得非常簡單了。我們再回過頭來看看流式細胞儀的原理,熟悉一下流式細胞儀的光路系統。從這張圖中我們可以看到,激光照射細胞后會產生很多波長的信號,不同的透鏡和濾光片將不同的熒光素的熒光信號區分開,由不同的通道進行接收。光信號通過光電倍增管轉化為電信號,不同強弱的信號反應了細胞不同的物理或者化學性質。不同型號的流式細胞儀所配備的激光數目和接收通道可能是不同的,常見的是488激光器、此外還有紫外激光器、紫激光器以及紅激光器。通道的順序一般為488激光器先排序,紫外或紫激光器次之,紅激光器最后。來源于同一個激光器的信號,原則上按波長從短到長進行排序,當然也可以自定義通道順序。通道既可以以數字命名也可以以主要的熒光素進行命名。目前市......閱讀全文

    流式細胞儀多色染色與同型對照抗體選擇與搭配

    一、如何搭配流式抗體熒光標記流式抗體熒光標記搭配主要由3個因素決定的:流式細胞儀能檢測多少個通道需要同時檢測檢測多少個指標廠家的抗體有多少種熒光標記如果流式細胞儀的通道越多,那么同一份樣本能同時做的表面/胞內標志就越多A 、 如何根據流式細胞儀搭配流式抗體1) BD流式細胞儀(06版目錄第614頁)

    流式做簡標抗體一抗,二抗分別孵多長時間

    (1)單抗包被-抗原-酶標二抗-底物顯色。本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體,經洗滌后加入含有抗原之待測樣品,如待檢樣品中有相應抗原存在,即可與包被于固相載體上的特異性抗體結合,經保溫孵育洗滌后,即可加入酶標記特異性抗體,再經孵育洗滌后,加底物顯色進行測定,底物降解的量即為欲測抗原的量。(2)單

    流式做簡標抗體一抗,二抗分別孵多長時間

    (1)單抗包被-抗原-酶標二抗-底物顯色。本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體,經洗滌后加入含有抗原之待測樣品,如待檢樣品中有相應抗原存在,即可與包被于固相載體上的特異性抗體結合,經保溫孵育洗滌后,即可加入酶標記特異性抗體,再經孵育洗滌后,加底物顯色進行測定,底物降解的量即為欲測抗原的量。(2)單

    流式細胞術檢測血小板相關抗體在免疫性血小板

    ? ? 免疫性血小板減少癥(ITP) , 既往稱特發性血小板減少性紫癜, 是最常見的出血性疾病 ,為不明原因的刺激引發的免疫反應導致血小板破壞過多,超過骨髓代償性產生血小板的速率。 免疫性血小板減少癥因自身免疫缺陷或外來抗原 ( 如病毒、 幽門螺桿菌感染 等)作用, 產生抗血小板抗體 ( 主要包括P

    流式做簡標抗體一抗,二抗分別孵多長時間

    (1)單抗包被-抗原-酶標二抗-底物顯色。本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體,經洗滌后加入含有抗原之待測樣品,如待檢樣品中有相應抗原存在,即可與包被于固相載體上的特異性抗體結合,經保溫孵育洗滌后,即可加入酶標記特異性抗體,再經孵育洗滌后,加底物顯色進行測定,底物降解的量即為欲測抗原的量。(2)單

    流式中檢測細胞表面和細胞內蛋白表達水平的抗體有何...

    流式中檢測細胞表面和細胞內蛋白表達水平的抗體有何區別?抗體只是針對相應抗原的,至于是針對胞內還是胞膜對你檢測來說并無明顯影響,你只需要查清楚到底是針對哪一個部位的抗原的,應該是可以用同一種抗體進行檢測的,在流式操作時只需注意:如果是針對胞內,則需要加破膜劑,讓抗體能和相應抗原接觸,否則就不需要了。

    流式試劑

    >>>流式試劑貨號品名規格價格L0001Mouse anti-Human CD2 mAb,FITC50T/100T?800/1200?L0002Mouse anti Human CD3 mAb,FITC50T/100T?800/1200?L0003Mouse anti-Human CD3 mAb,P

    光譜流式與質譜流式之“爭-”

    質譜流式技術是近來年發明的一門新興技術,它利用金屬同位素標簽替代熒光標簽,并利用質譜對標簽進行定量,通過結合質譜和流式細胞技術,可以同時對單細胞進行超多參數、無需補償的測量,大大增強了評估復雜細胞系統和過程的能力,彌補了熒光流式的不足。其高通量、高靈敏度和高穩定性的特點尤其適合于免疫、腫瘤、血液、藥

    流式細胞術抗體的特異性驗證方法的局限性有哪些?

    流式細胞術抗體的特異性驗證方法存在以下一些局限性:細胞模型的局限性:在使用細胞系進行驗證時,細胞系可能不能完全代表體內細胞的真實情況,因為細胞在體外培養過程中可能會發生表型和基因表達的改變。抗原復雜性:某些抗原可能存在多種異構體、修飾形式或與其他分子的復合物,而驗證方法可能無法涵蓋所有這些情況,導致

    介紹一些常見的流式細胞術抗體的特異性驗證方法

    常見的流式細胞術抗體特異性驗證方法:免疫熒光染色共定位:使用該抗體與已知針對同一細胞結構或分子但標記不同熒光素的另一種抗體同時進行染色。通過觀察兩種熒光信號的共定位情況,如果高度重合,說明該抗體具有較好的特異性。競爭抑制實驗:在抗體染色前,先加入過量的未標記的相同抗原,然后再加入標記的抗體進行染色。

    介紹一些常見的流式細胞術抗體的特異性驗證方法

    以下是一些常見的流式細胞術抗體特異性驗證方法:免疫熒光染色對照實驗:陽性對照:使用已知高表達目標抗原的細胞或組織切片進行染色,觀察預期的陽性信號。陰性對照:選取已知不表達目標抗原的細胞或組織進行染色,應無明顯信號。同型對照:使用與實驗抗體同亞型、同熒光素標記但無特異性結合能力的同型抗體作為對照,排除

    流式熒光技術

    流式熒光技術又稱液態芯片技術(Luminex xMAP技術),其整和了熒光編碼微球、激光分析、應用流體學及高速數字信號處理等多項最新科技,是美國Luminex公司于上世紀末開發出的新一代高通量發光檢測技術。目前該技術已被廣泛應用于免疫分析、核酸研究、酶學分析、受體和配體識別等領域,并得到各權威機構和

    流式細胞術和流式細胞儀

    1、流式細胞儀(Flow Cytometer):是集光電子物理,光電測量,計算機,細胞熒光化學,單抗技術為一體的高科技細胞分析儀。2、流式細胞術(Flow? Cytometry):利用流式細胞儀對處于快速流動的細胞或生物顆粒進行多參數、快速(每秒可達1000-10000個)的定量分析和分選(純度可達

    一滴血做流式?guava微流式!

    完成一次常規流式實驗,至少要保證單個樣品1×106個細胞的上樣量(100μl)。這還不包括梯度樣品、平行對照、重復實驗,等等。難道需要開個細胞工坊整天生產細胞嗎?不,在實驗儀器日益精密化、小型化,實驗方法日益自動化、人性化的今天,一滴血(等同于10μl血液的細胞量)做流式已經不再是夢想,1,000,

    電壓變送器分直流式與交流式的區分

      電壓變送器是一種將被測交流電壓、直流電壓、脈沖電壓轉換成接線性比例輸出直流電壓或直流電流并隔離輸出模擬信號或數字信號的裝置。可以將被測交流電壓、直流電壓、脈沖電壓轉換成按線性比例輸出直流電壓或直流電流并隔離輸出模擬信號或數字信號。  電壓變送器分直流式和交流式:  交流式是一種能將被測交流電流(

    流式細胞技術與流式細胞儀

    摘要:流式細胞技術在細胞定量檢測方面是最先進檢測技術,流式細胞儀在臨床和科研領域得到廣泛運用。概述:分析細胞學是細胞定量分析的學科,流式細胞技術(Flow Cytometer ,FCM)是分析細胞中的一個重要領域,該技術為細胞學研究手段之一,能夠對細胞和細胞器及生物大分子進行高達每秒上萬個染色體的分

    流式細胞技術與流式細胞儀

    流式細胞技術?(Flow?Cytometer, FCM)是細胞學的研究手段之一。其能在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞,并能同時從一個細胞中測得多個參數。例如,采用雙激光的方法,研究者可進行核型分析和鑒定,分離純化某號染色體并構

    【技術指南】流式細胞儀和流式細胞術

    Jay Haron Ph. D.? ?jay.haron@gmail.com? ?BD Biosciences, San Diego, United States 引用 實驗材料和方法? 從1968年最早的商品化 流式細胞術(FC) 和熒光激活細胞分類

    流式細胞分析

    實驗概要流式細胞分析是指通過對細胞進行免疫熒光染色,經過流式細胞儀分選熒光細胞或分析熒光細胞所占總體細胞的比例。流式細胞分析可以檢測細胞周期分布、細胞亞群等,是一種強大的實驗工具。流式細胞分析操作過程視實驗目的而定,下面以碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)染色法流式細胞技術分析細胞周

    流式細胞技術

    流式細胞技術(flow cytometry,FCM)是一項集激光技術、光電測量技術、計算機技術、流體力學以及細胞免疫熒光化學技術、單克隆抗體技術為一體的新型高科技細胞分析技術。概括地說,流式細胞技術就是對處在快速直線流動狀態中的細胞或生物顆粒進行多參數的、快速的、準確的定性分析和分選的技術。該技術的

    流式細胞分析

    流式細胞分析是通過分析儀來看的,具體如下:(一)單參數直方圖  單參數直方圖是一維數據用得最多的圖形顯示形式,既可用于定性分析,又可用于定量分析,形同一般X-Y平面描圖儀給出的曲線。根據選擇放大器類型不同,橫坐標可以是線性標度或對數標度。用"信道"來表示,實質上是所測的熒光或散射光的強度。縱坐標一般

    流式細胞檢測

    技術原理?????? 流式細胞技術(flow cytometry,FCM)是利用流式細胞儀進行的一種單細胞定量分析和分選技術。是一種在液體系統中,測定單個細胞或細胞器的生物、物理和化學特性,并根據這些特性將所需要的細胞或細胞器進行定量分析和分選的技術。它是一種可以檢測細胞或者生物學顆粒的多種特性的技

    流式中的“門”

    流式操作者的一項必不可少的技能就是設門。設什么樣的門以及如何去設門,對于流式數據分析來說都是十分重要的。下面我們將給大家介紹幾種門的功能和用法。“閾值”門“閾值門”并不是真正意義上的門,但它在流式分析中非常重要,它決定了收集的有效粒子數目和流式細胞儀的工作效率,合適的閾值能有效的區分背景熒光和碎片。

    流式細胞術

    一.?流式細胞術概述流式細胞術(Flow?Cytometry,?FCM)是七十年代發展起來的高科學技術,它集計算機技術、激光技術、流體力學、細胞化學、細胞免疫學于一體,?同時具有分析和分選細胞功能。它不僅可測量細胞大小、內部顆粒的性狀,還可檢測細胞表面和細胞漿抗原、細胞內DNA、RNA含量等,可對

    如何選擇流式熒光

    這個問題有點不好說,每個熒光都有自己在某個波長的最大吸收峰,原則上最大吸收峰差的越遠補償越小,FITC PE APC 最常用的三個熒光,一般一管染三種抗體就選這三個顏色,便宜,而且好染。如果再加的話可以選PE-cy7或APC-cy7,個人覺得可以,一管不宜染太多種抗體,到時候很難分析,補償也大,結果

    流式細胞術和流式細胞分選技術的區別

    這個并不是什么區別的問題。分選就是在流式分析的基礎上在多加了一步而已,前面的步驟,原理都是一模一樣的。分選的機器也可以用來分析。分析技術,目前絕大多數都是液滴的形式。細胞通過檢測窗口以后,搜集了數據,一般的分析儀器就直接排到廢液箱了。而分選儀則繼續通過尺寸微小的口徑,并通過振動將液體流變成不連續的小

    流式細胞術和流式細胞分選技術的區別

    這個并不是什么區別的問題。分選就是在流式分析的基礎上在多加了一步而已,前面的步驟,原理都是一模一樣的。分選的機器也可以用來分析。分析技術,目前絕大多數都是液滴的形式。細胞通過檢測窗口以后,搜集了數據,一般的分析儀器就直接排到廢液箱了。而分選儀則繼續通過尺寸微小的口徑,并通過振動將液體流變成不連續的小

    流式細胞術和流式細胞分選技術的區別

    這個并不是什么區別的問題。分選就是在流式分析的基礎上在多加了一步而已,前面的步驟,原理都是一模一樣的。分選的機器也可以用來分析。分析技術,目前絕大多數都是液滴的形式。細胞通過檢測窗口以后,搜集了數據,一般的分析儀器就直接排到廢液箱了。而分選儀則繼續通過尺寸微小的口徑,并通過振動將液體流變成不連續的小

    流式細胞儀和流式細胞術指南篇2

    核酸插入染料溴化乙錠(EtBr) 和碘化丙啶(PI)能夠結合到DNA雙螺旋的大溝。4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)和Hoechst染料(有幾種常用的)則結合小溝。請注意, 一些染料 (例如碘化丙啶)也會結合到RNA發卡結構形成的溝中,因此如果要做DNA定量,需要用染料和RNA

    流式細胞術和流式細胞分選技術的區別

    分選就是在流式分析的基礎上在多加了一步而已,前面的步驟,原理都是一模一樣的。分選的機器也可以用來分析。分析技術,目前絕大多數都是液滴的形式。細胞通過檢測窗口以后,搜集了數據,一般的分析儀器就直接排到廢液箱了。而分選儀則繼續通過尺寸微小的口徑,并通過振動將液體流變成不連續的小液滴。然后根據上一步檢測的

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