PCR產物電泳做膠回收不也得到純化的目的
PCR產物純化試劑盒去除的是PCR反應體系中的離子、dNTP、引物以及聚合酶，收集其中的DNA片段。這只適合于幾乎沒有非特異性條帶的PCR產物的收集。如果你的PCR產物具有非特異性條帶，那么一定需要使用膠回收試劑盒。......閱讀全文
PCR產物電泳結果分析
基因組樣品的模板量摸一個濃度吧，這個模板濃度不太合適。PCR產物以smear的形式出現，要么是樣本降解，要么就是完全沒有特異的擴增。要通過PCR篩選基因敲除的小鼠，最基本的要求就是引物特異性好，擴增效率高。不然沒法篩選的。如果這對引物之前篩選過，你可以換換模板，重新合成下引物就行，如果完全沒有用于篩
PCR產物的電泳鑒定
一、準備工作1、實驗器具與材料：（1）移液槍：10ul（2）吸頭：20ul（3）吸頭臺：放置200ul和20ul的吸頭一個（4）三角燒瓶：50ml一個（5）瓊脂糖2、實驗器具的處理與準備（1） 塑料制品：（包括吸頭等）送至高壓3次，試驗前將槍頭放入吸頭臺。（2）電泳板及電泳槽：用自來水沖洗干凈備用3
PCR產物電泳結果分析
基因組樣品的模板量摸一個濃度吧，這個模板濃度不太合適。PCR產物以smear的形式出現，要么是樣本降解，要么就是完全沒有特異的擴增。要通過PCR篩選基因敲除的小鼠，最基本的要求就是引物特異性好，擴增效率高。不然沒法篩選的。如果這對引物之前篩選過，你可以換換模板，重新合成下引物就行，如果完全沒有用于篩
PCR產物的電泳檢測
PCR產物的電泳檢測時間一般為48h以內，有些最好于當日電泳檢測，大于48h后帶型不規則甚致消失。常見問題如下：????一、假陰性，不出現擴增條帶????PCR反應的關鍵環節有①模板核酸的制備，②引物的質量與特異性，③酶的質量及，?④PCR循環條件。尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。????模板
PCR產物電泳結果分析
基因組樣品的模板量摸一個濃度吧，這個模板濃度不太合適。PCR產物以smear的形式出現，要么是樣本降解，要么就是完全沒有特異的擴增。要通過PCR篩選基因敲除的小鼠，最基本的要求就是引物特異性好，擴增效率高。不然沒法篩選的。如果這對引物之前篩選過，你可以換換模板，重新合成下引物就行，如果完全沒有用于篩
PCR產物的電泳鑒定
一、準備工作1、實驗器具與材料：（1）移液槍：10ul（2）吸頭：20ul（3）吸頭臺：放置200ul和20ul的吸頭一個（4）三角燒瓶：50ml一個（5）瓊脂糖2、實驗器具的處理與準備（1） 塑料制品：（包括吸頭等）送至高壓3次，試驗前將槍頭放入吸頭臺。（2）電泳板及電泳槽：用自來水沖洗干凈備用3
PCR產物電泳結果分析
第一步我們先來看看第二泳道，我們能看見兩條電泳帶，一般的質粒在跑完電泳之后都會出現這種情況，因為質粒是很容易開的接著會變成線性或者是半線性和半環狀的，環狀的會比線性的跑的快。2第二步我們再看下電泳帶上面那條淺的也就是開鏈的質粒，再它的下面就是環狀的質粒，不過這也不打緊，一般情況都是這樣的。3接著我們
PCR產物電泳嚴重拖帶
有可能是你的膠點樣孔不整齊，就是你做膠的時候膠沒有凝固好，你可以試試重新做塊膠。PCR拖帶產生原因有很多，不知道樓主屬于哪一種：1、退火溫度較低，可以提高2到3度2、Mg離子濃度一般的PCR在1.5mM就可以了，不知樓主用的多少3、模板濃度較高或者含有其他PCR抑制劑，建議稀釋下模板4、延伸時間一般
PCR－產物電泳銀染實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理聚丙烯酰胺凝膠（PAG）是由丙烯酰胺單體和交聯劑亞甲基雙丙烯酰胺，在引發劑過硫酸胺（AP）提供自由基和催化劑四甲基乙二胺（TEMED）的作用下聚合而成。丙烯酰胺可由天然光線誘發聚合，所以其水溶液應貯藏在棕色瓶中，置低溫 4℃ 更佳。由于其水溶液穩定性
PCR－產物電泳銀染實驗
常用的核酸電泳法有兩種。①水平電泳：瓊脂糖凝膠，紫外光下判斷條帶。此法經濟省時，但分辨率較低。②垂直電泳：聚丙烯酰胺凝膠，可見光下判斷條帶。此法相對費力，但分辨率較高。分辨率高是聚丙烯酰胺電泳法被優先用于克隆性基因重排條帶判斷的關鍵。在聚丙烯酰胺凝膠上較寬彌散被判斷為假陽性（陰性）的條帶，在瓊脂糖膠
PCR－產物電泳銀染實驗
實驗方法原理 聚丙烯酰胺凝膠（PAG）是由丙烯酰胺單體和交聯劑亞甲基雙丙烯酰胺，在引發劑過硫酸胺（AP）提供自由基和催化劑四甲基乙二胺（TEMED）的作用下聚合而成。丙烯酰胺可由天然光線誘發聚合，所以其水溶液應貯藏在棕色瓶中，置低溫 4℃ 更佳。由于其水溶液穩定性較差，通常 2 個月內用完為好。
PCR產物的電泳檢測時間
一般為48h以內，有些最好于當日電泳檢測，大于48h后帶型不規則甚致消失。?假陰性，不出現擴增條帶 PCR反應的關鍵環節有①模板核酸的制備，②引物的質量與特異性，③酶的質量及，?④PCR循環條件。尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。 模板：①模板中含有雜蛋白質，②模板中含有Taq酶抑制劑，③
PCR產物的電泳檢測時間
PCR產物的電泳檢測時間一般為48h以內，有些最好于當日電泳檢測，大于48h后帶型不規則甚致消失。常見問題如下：一、假陰性，不出現擴增條帶PCR反應的關鍵環節有①模板核酸的制備，②引物的質量與特異性，③酶的質量及，④PCR循環條件。尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。模板：①模板中含有雜蛋白質，②
PCR產物電泳嚴重拖帶怎么辦
1、退火溫度較低，可以提高2到3度2、Mg離子濃度一般的PCR在1.5mM就可以了，不知樓主用的多少3、模板濃度較高或者含有其他PCR抑制劑，建議稀釋下模板4、延伸時間一般1kb/min，時間太短可能會延伸不完全5、循環數太高也可能引起拖帶，考慮平臺期，30－35循環應該足夠了
pcr產物酶切后電泳不出條帶
如果是空的什么也沒有，可以考慮：1、PCR產物有問題；2、電泳跑反了或者跑久了，DNA跑出了膠；3、制膠的問題，如忘加EB等，或加EB等時膠溫度過高。其中PCR產物問題可以考慮原因：引物是否正確、程序設置的退火溫度是否過高、樣本提取等原因。
PCR擴增產物的電泳分析
凝膠電泳分瓊脂糖電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳兩種。一、瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳是一種非常簡便、快速、最常用的分離純化和鑒定核酸的方法。瓊脂糖是從海藻中提取的一種線狀高聚物。根據瓊脂糖的溶解溫度，把瓊脂糖分為一般瓊脂糖和低熔點瓊脂糖。低熔點瓊脂糖熔點為62～65℃，溶解后在 37℃下維持液體狀態約數小
PCR新手指南系列：PCR產物電泳條帶分析
PCR擴增后一般進行瓊脂糖凝膠電泳分析，電泳后一般有以下幾種條帶：1、引物帶。引物濃度過高或是擴增效率不是特別高時都會有，一般不呈現為細帶，為發散狀；如果目的擴增產物帶和引物帶都很亮，可以考慮適當降低引物量。2、引物二聚體帶。比引物跑得慢一點，條帶清晰，但如果擴增產物小于100bp時，產物與引物二聚
PCR技術（九）：PCR擴增產物的電泳分析
凝膠電泳分瓊脂糖電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳兩種.一、瓊脂糖凝膠電泳: 瓊脂糖凝膠電泳是一種非常簡便、快速、最常用的分離純化和 鑒定核酸的方法.瓊脂糖是從海藻中提取的一種線狀高聚物.根據瓊脂糖的溶解溫度， 把瓊脂糖分為一般瓊脂糖和低熔點瓊脂糖.低熔點瓊脂糖熔點為62～65℃，溶解后在 37℃下維持液體
PCR新手指南系列：PCR產物電泳條帶分析
PCR擴增后一般進行瓊脂糖凝膠電泳分析，電泳后一般有以下幾種條帶：1、引物帶。引物濃度過高或是擴增效率不是特別高時都會有，一般不呈現為細帶，為發散狀；如果目的擴增產物帶和引物帶都很亮，可以考慮適當降低引物量。2、引物二聚體帶。比引物跑得慢一點，條帶清晰，但如果擴增產物小于100bp時，產物與引物二聚
PCR產物跑電泳為什么跑不出孔
膠有沒有制好、膠槽的方向、電泳緩沖液、電壓電流。如果PCR確定有東西，就是上面4個東西的問題。
瓊脂糖凝膠電泳回收PCR產物
一．原理 DNA片斷的分離與回收是基因工程操作中的一項重要技術，例如可收集特定酶切片斷用于克隆或制備探針，回收PCR產物用于再次鑒定等。回收實驗中兩個最重要的技術指標是純度和回收率：前者未達標時會嚴重影響以后的酶切、連接、標記等酶參與的反應；后者不理想時往往會大大增加前期的工作量。 本實驗采
瓊脂糖凝膠電泳檢查PCR產物
1. 用0.5X或1XTBE制備2%（W/V）瓊脂糖凝膠，加入適量的溴化乙錠。2. 瓊脂糖凝膠的長度與寬度應該與PCR擴增管數量相適應，每一擴增管應有相應的一個電泳泳道，凝膠厚度為3~5 mm，一般用三只梳子形成三排加樣孔。3. 將PCR擴增管從PCR擴增儀中取出，用加樣器吸取擴增后的反應液，加入相
DNA測序電泳前測序PCR產物的處理
1. 加入12 μl的TSR于離心管中，劇烈振蕩，讓其充分溶解DNA沉淀，稍離心。 2. 將溶液轉移至蓋體分離的0.2 ml PCR管中，稍離心。 3. 在PCR儀上進行熱變性(95℃ 2 min)，冰中驟冷，待上機。
瓊脂糖凝膠電泳檢查PCR產物
1. 用0.5X或1XTBE制備2%（W/V）瓊脂糖凝膠，加入適量的溴化乙錠。2. 瓊脂糖凝膠的長度與寬度應該與PCR擴增管數量相適應，每一擴增管應有相應的一個電泳泳道，凝膠厚度為3~5 mm，一般用三只梳子形成三排加樣孔。3. 將PCR擴增管從PCR擴增儀中取出，用加樣器吸取擴增后的反應液，加入相
PCR產物跑電泳為什么跑不出孔
膠有沒有制好、膠槽的方向、電泳緩沖液、電壓電流。如果PCR確定有東西，就是上面4個東西的問題。。
PCR擴增產物的電泳分析1
凝膠電泳分瓊脂糖電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳兩種。一、瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳是一種非常簡便、快速、最常用的分離純化和鑒定核酸的方法。瓊脂糖是從海藻中提取的一種線狀高聚物。根據瓊脂糖的溶解溫度，把瓊脂糖分為一般瓊脂糖和低熔點瓊脂糖。低熔點瓊脂糖熔點為62～65℃，溶解后在 37℃下維持液體狀態約
PCR擴增產物的電泳分析2
2）染色劑：核酸電泳后，需經染色后才能顯現出帶型，最常用的是溴化乙錠染色法，其次是銀染色。溴化乙錠(ethidium bromide，EB)是一種熒光染料，EB分子可嵌入核酸雙鏈的堿基對之間，在紫外線激發下，發出紅色熒光。根據情況可在凝膠電泳液中加入終濃度為 0.5ug/ml的EB，有時亦可
瓊脂糖凝膠電泳檢查PCR產物
1. ?用0.5X或1XTBE制備2%（W/V）瓊脂糖凝膠，加入適量的溴化乙錠。 2. ?瓊脂糖凝膠的長度與寬度應該與PCR擴增管數量相適應，每一擴增管應有相應的一個電泳泳道，凝膠厚度為3~5 mm，一般用三只梳子形成三排加樣孔。 3. ?將PCR擴增管從PCR擴增儀中取出，用加樣器吸取擴增后的
PCR產物電泳條帶為什么被“劈開”了
PCR產物電泳條帶為什么被“劈開”了說明不是引物之間形成二聚體,而是第一對引物的設計有問題（特異性很差）.如果一定要擴增那個區,建議引物的位置向兩邊放一放.如果你沒有好的設計軟件,建議到Primer3去試試（目前最好的免費引物設計）.如果還是不行,把序列發給我,我幫你設計（我有專業軟件,ABI pr
PCR產物的電泳檢測可能出現那些問題
一般為48h以內，有些最好于當日電泳檢測，大于48h后帶型不規則甚致消失。假陰性，不出現擴增條帶PCR反應的關鍵環節有：①模板核酸的制備。②引物的質量與特異性。③酶的質量及。④PCR循環條件。尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。模板：①模板中含有雜蛋白質。②模板中含有Taq酶抑制劑。③模板中蛋白質