PCR假陽性產生原因分析
假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。產生的原因有：①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有：操作輕柔，防止靶序列吸入加樣槍內或濺出離心管外造成污染；除酶及不能耐高溫的物質外，所有試劑或器材高壓消毒；離心管及加樣槍頭等一次性使用。必要時，可在加標本前，將反應管和試劑用紫外光照射，以破壞存在的核酸。......閱讀全文
PCR假陽性產生原因分析
假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。產生的原因有：①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有：操作輕柔，防止
化學發光假陽性本底產生的原因分析
近期收到有小伙伴提問，關于如何解決發光試劑盒研發過程中的本底偏高和假陽性問題。解決問題最重要的是了解問題產生的原因，本微信平臺分類匯總了化學發光試劑產生假陽性本底的原因，由于問題本身并沒有很具體的描述，因此本文也只廣泛的匯總，不包含具體的項目或者方法學方面的內容。希望對大家的工作有所幫助。抗原/抗體
化學發光假陽性本底產生的原因分析
?近期收到有小伙伴提問，關于如何解決發光試劑盒研發過程中的本底偏高和假陽性問題。解決問題最重要的是了解問題產生的原因，本微信平臺分類匯總了化學發光試劑產生假陽性本底的原因，由于問題本身并沒有很具體的描述，因此本文也只廣泛的匯總，不包含具體的項目或者方法學方面的內容。希望對大家的工作有所幫助。? ?
PCR假陽性的原因分析及解決辦法
假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。產生的原因有：①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有：操作輕柔，防止
PCR－反應出現假陽性結果原因
1 ) 引物設計不合適： 選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而，在進行PCR擴增時，擴增出的PCR產物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出現假陽性。需重新設計引物。 2 ) 靶序列或擴增產物的交叉污染： 這種污染有兩種原因： 一是整個基因組或大片段的交叉污染，導致假
PCR儀PCR結果出現假陽性是什么原因？
假陽性假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。產生的原因有：①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有：操作輕柔
尿妊娠試驗假陽性原因分析
絨毛膜促性腺激素（hCG）是由胎盤絨毛膜滋養層細胞產生的一種具有促性腺發育的糖蛋白激素，由α和β兩個亞基組成。? ? 其中α亞基與垂體分泌的卵泡刺激素（FSH）、黃體生成素（LH）和促甲狀腺激素（TSH）的α亞基相似，β亞基則是特異的，因此一般用β-hCG 抗體來測定標本中的β-hCG。? ? 尿妊
基因擴增PCR的擴增結果假陽性的原因
出現的PCR擴增條帶與目的靶序列條帶一致,有時其條帶更整齊,亮度更高。?引物設計不合適:選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性,因而在進行PCR擴增時,擴增出的PCR產物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出現假陽性。需重新設計引物。?靶序列或擴增產物的交叉污染:這種污染有兩種原因:一是整個
PCR拖尾及假陽性的原因及對策
拖尾 現象：產物在凝膠上呈Smear狀態。 原因： 1.模板不純 2.Buffer不合適 3.退火溫度偏低 4.酶量過多 5.dNTP、Mg2+濃度偏高 6.循環次數過多 對策： 1.純化模板 2.更換Buffer 3.適當提高退火溫度 4.適量用酶 5.適當降低dNTP
PCR假陰性的原因分析
PCR的假陽性問題是在PCR誕生之初就被深刻認識到了，同時由于造成假陽性的因素相對單一，因此假陽性并不是困惑檢驗工作的主要原因。如果一個項目只是陽性率高敏感性好的話，那么可以認為其陰性結果具備很高的可排除性，仍然有相當的臨床適用價值。但PCR的假陰性在檢驗工作中仍很嚴重，并且用些因素經常被人忽略，嚴
PCR假陰性的原因分析
PCR的假陽性問題是在PCR誕生之初就被深刻認識到了，同時由于造成假陽性的因素相對單一，因此假陽性并不是困惑檢驗工作的主要原因。如果一個項目只是陽性率高敏感性好的話，那么可以認為其陰性結果具備很高的可排除性，仍然有相當的臨床適用價值。但PCR的假陰性在檢驗工作中仍很嚴重，并且用些因素經常被人忽略，嚴
PCR假陰性的原因分析
PCR假陽性問題是在PCR誕生之初就被深刻認識到了，同時由于造成假陽性的因素相對單一，因此假陽性并不是困惑檢驗工作的主要原因。如果一個項目只是陽性率高敏感性好的話，那么可以認為其陰性結果具備很高的可排除性，仍然有相當的臨床適用價值。但PCR的假陰性在檢驗工作中仍很嚴重，并且用些因素經常被人忽略，嚴重
什么是PCR假陽性？
假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。產生的原因有：①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有：操作輕柔，防止
導致尿HCG假陽性的原因分析
HCG檢測應以血β-HCG檢查為準。尿妊娠試驗有時候受其他的因素影響，比如其他的一些激素，比如LH激素有時就可與試紙反應，導致假陽性;還有甲狀腺系列的激素也有可能對它有影響。有時候無法確定到底是什么干擾因素導致的假陽性。總之尿試紙條檢測的干擾因素要比血β-HCG要多一些。?HCG是胎盤絨毛膜滋養層細
導致尿HCG假陽性的原因分析
HCG檢測應以血β-HCG檢查為準。尿妊娠試驗有時候受其他的因素影響，比如其他的一些激素，比如LH激素有時就可與試紙反應，導致假陽性;還有甲狀腺系列的激素也有可能對它有影響。有時候無法確定到底是什么干擾因素導致的假陽性。總之尿試紙條檢測的干擾因素要比血β-HCG要多一些。 HCG是胎盤絨毛膜滋
導致尿HCG假陽性的原因分析
應以血HCG檢查為準。尿妊娠試驗有時候受其他的因素影響，比如其他的一些激素，比如LH激素有時就可與試紙反應，導致假陽性;還有甲狀腺系列的激素也有可能對它有影響。有時候無法確定到底是什么干擾因素導致的假陽性。總之尿試紙條檢測的干擾因素要比血B-HCG要多一些。?HCG是胎盤絨毛膜滋養層細胞產生的一種具
什么是菌落pcr假陽性
利用菌落作為模板進行PCR擴增，驗證該菌落里是否帶有目標片段。但是由于PCR是一個級聯放大的過程，所以即使菌落中不含有目標片段，而是菌落表面沾有一部分之前連接，轉化中用的目標DNA，也會導致PCR獲得擴增條帶，從而誤認為這個菌落已經帶有了目標片段，稱之為假陽性。可以通過提質粒酶切，或者測序驗證，排除
酶免法檢測HBeAg假陽性原因分析
我們在應用酶免法檢測乙型肝炎病毒血清學標志物時，發現有時會出現單項HBeＡg(+)或HBeAg(＋)、抗－HBs(+)等罕見模式。為慎重起見再將標本離心后復檢 HBeAg, 結果為陰性。為此我們特做如下實驗。取10份 HBeAg 陰性的獻血員的不抗凝血液，每份分兩管，一管靜置0.5h、1h、2h；另
PCR的假陽性和假陰性如何解釋
假陽性假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。產生的原因有：①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有：操作輕柔
PCR實驗中假陽性和假陰性的防治
1，標本采集必須合格，否則不做。2，嚴格按照操作規程，避免人為實驗誤差。3，用于操作的各種儀器，加樣器，必須通過審核驗收，儀器選貴的，進口的！4，最主要的就是試劑，選擇公認的，優質試劑
PCR假陰性的原因
假陰性是指不出現特異擴增帶。可能原因：引物設計不合理，酶失活或酶量不足，模板量太少，退火溫度不合適，循環次數過少，產物未及時電泳檢測等。解決方法有：重新設計引物，增加酶量或調換酶，增加模板量，調整退火溫度，增加循環次數，及時檢測擴增產物，一般在 48h 以內進行。
PCR假陰性的原因
造成PCR假陰性的原因是復雜的，也是多樣的。主要有： 1.PCR儀本身的質量問題。PCR儀設計原理上的差異和經常出現的質量問題（如：溫控不準等）給臨床帶來了諸如非特異性擴增（假陽性）、擴增效率下降(假陰性）等問題. 2.離心機問題。離心機的質量或使用不正確，造成離心標本模板沒有分離出來造成假陰性，竊
HBsAg假陽性和假陰性原因分析之ELISA法和金標法
ELISA法ELISA法假陰性原因1、標本用肝素或EDTA等抗凝處理易造成HBsAg檢測結果假陰性，肝素抗凝血漿會增加OD值,可能與高濃度肝素具有強大的負電荷,能吸附酶標記物不易洗脫有關；EDTA、酶抑制劑可抑制ELISA系統中的辣根過氧化物酶活性，造成假陰性。2、標本保存不當,在冰箱內保存過久的標
導致PCR假陽性的污染源
?PCR反應的特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產生。一、標本交叉污染源：收集標本的容器：標本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染；吸樣槍：標本核酸模板在提取過程中，由于污染導致標本間污染；氣溶膠：zui可能
菌落pcr會出現假陽性結果嗎
最近做酶切連接轉化，最后做鑒定時，以菌落為模板進行PCR時可以見到有目的條帶;當把菌落接種到LB液擴菌后，以菌液為模板進行PCR時卻什么東東都沒有?請問會是什么原因啊?多多指教啊!建議重新以菌落為模板進行PCR檢測，再重新以菌液為模板進行PCR檢測，因為菌落或者菌液PCR假陽性的幾率還是比較高的。但
ELISA法測梅毒抗體假陽性原因分析及對策
梅毒血清學試驗對梅毒的診斷有很大的價值，但它存在著一定的假陽性和假陰性情況，其結果一定要結合病史和臨床、體格檢查綜合分析考慮。近年來梅毒在我國的發病率呈上升趨勢。梅毒是由梅毒螺旋體感染引起的一種性傳播性疾病之一，可侵犯全身各臟器，幾乎可以引起全身所有組織器官的損害和病變，導致功能障礙。梅毒螺旋體抗體
尿液分析儀檢測出現假陽性的原因
假陽性。即尿液分析儀潛血反應陽性，鏡檢陰性，其常見原因有： （1）血紅蛋白（Hb） 尿液分析儀潛血反應既能與完整的RBC發生陽性反應，也可與RBC溶解釋放的Hb發生陽性反應，而顯微鏡只能檢出尿中未溶解的RBC。健康人尿中Hb含量極微，定性為陰性。疾病時，尿中Hb有兩個來源：一是發生血管內溶血，血
PCR儀產生彌散（smear）條帶原因分析
*在PCR反應體系中第一鏈產物的含量過高 *減少引物的用量 *優化PCR反應條件/減少PCR的循環次數 *在用DNase處理被DNA污染的RNA樣品時，其產生的寡核苷酸片段會產生非特異性擴增，一般會顯示為彌散背景。
造成PCR假陰性的原因
PCR的假陰性在檢驗工作中仍很嚴重，并且用些因素經常 被人忽略，嚴重的影響了PCR的使用。可以想象一種假陽性和假陰性都很高的項目，有什么樣的診斷價值。造成PCR假陰性的原因是復雜 的，也是多樣的。主要有：1.PCR儀本身的質量問題。PCR儀設計原理上的差異和經常出現的質量問題（如：溫控不準等）給臨床
造成PCR假陰性的原因
PCR的假陰性在檢驗工作中仍很嚴重，并且用些因素經常 被人忽略，嚴重的影響了PCR的使用。可以想象一種假陽性和假陰性都很高的項目，有什么樣的診斷價值。造成PCR假陰性的原因是復雜 的，也是多樣的。主要有：1.PCR儀本身的質量問題。PCR儀設計原理上的差異和經常出現的質量問題（如：溫控不準等）給臨床