轉基因食品檢測技術——核酸雜交技術
核酸雜交技術的基本原理是兩條 DNA 鏈之間可以通過堿基配對而形成氫鍵,通常核酸雜交的檢測過程主要包括以下幾個步驟:將單鏈的目的 DNA 結合到膜上,然后加入單鏈、標記過的探針 DNA,在一定的溫度條件和離子濃度下使探針分子與目標 DNA 分子堿基配對,再洗去未結合的標記探針,檢測探針和目標 DNA 形成的雜合分子。由此可以看出,一個核酸雜交檢測有三個關鍵因素:探針 DNA、目的 DNA 和信號檢測。把握好這三個因素,核酸雜交技術可以達到高特異性和高靈敏度的水平。......閱讀全文
轉基因食品檢測技術——核酸雜交技術
核酸雜交技術的基本原理是兩條 DNA 鏈之間可以通過堿基配對而形成氫鍵,通常核酸雜交的檢測過程主要包括以下幾個步驟:將單鏈的目的 DNA 結合到膜上,然后加入單鏈、標記過的探針 DNA,在一定的溫度條件和離子濃度下使探針分子與目標 DNA 分子堿基配對,再洗去未結合的標記探針,檢測探針和目標 DNA
核酸探針雜交檢測技術介紹
一、核酸探針預雜交預雜交的目的是用非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其他高分子化合物(Denhart’s溶液)將待測核酸分子中的非特異性位點封閉,以避免這些位點與探針的非特異性結合。雜交反應是使單鏈核酸探針與固定在膜上的待測核酸單鏈在一定溫度和條件下進行復性反應的過程。雜交
轉基因食品檢測技術
轉基因食品是指利用生物技術,將外源基因轉移到動物、植物或微生物等其他物種中,從而改造生物的遺傳特性,使其在性狀、營養品質等方面向人類所需的目標轉變,由這些轉基因生物為直接食品或原料加工生產的食品就是轉基因食品。自1983年世界第一例轉基因作物馬鈴薯問世以來,目前各國已經試種的轉基因植物超過4500種
核酸雜交的技術原理
其原理是核酸變性和復性理論。即雙鏈的核酸分子在某些理化因素作用下雙鏈解開,而在條件恢復后又可依堿基配對規律形成雙鏈結構。雜交通常在一支持膜上進行,因此又稱為核酸印跡雜交。根據檢測樣品的不同又被分為DNA印跡雜交(Southern blot hybridization )和RNA印跡雜交(Northe
核酸雜交技術的概述
DNA或RNA先轉移并固定到硝酸纖維素或尼龍膜上,與其互補的單鏈DNA或RNA探針用放射性或非放射性標記。在膜上雜交時,探針通過氫鍵與其互補的靶序列結合,洗去未結合的游離探針后,經放射自顯影或顯色反應檢測特異結合的探針。
核酸分子雜交技術應用
核酸分子雜交作為一項基本技術,已應用于核酸結構與功能研究的各個方面。核酸分子雜交具有很高的靈敏度和高度的特異性,因而該技術在分子生物學領域中已廣泛地使用于克隆基因的篩選、酶切圖譜的制作、基因組中特定基因序列的定性、定量檢測和疾病的診斷等方面。因而它不僅在分子生物學領域中具有廣泛地應用,而且在臨床診斷
核酸分子雜交技術簡介
核酸分子雜交(簡稱雜交,hybridization)是核酸研究中一項最基本的實驗技術。互補的核苷酸序列通過Walson-Crick堿基配對形成穩定的雜合雙鏈DNA或RNA分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。
核酸雜交的技術操作步驟
(1)制備樣品:首先需要從待檢測組織樣品提取DNA或RNA。DNA應先用限制性內切酶消化以產生特定長度的片段,然后通過凝膠電泳將消化產物按分子大小進行分離。一般來說DNA分子有其獨特的限制性內切酶圖譜,所以經酶切消化和電泳分離后可在凝膠上形成特定的區帶。再將含有DNA片段的凝膠進行變性處理后,直接轉
熒光定量PCR技術檢測食品轉基因
當前,國際社會對轉基因食品檢測技術路線主要有兩條:一是對外源基因表達產物蛋白質進行檢測;二是直接檢測外源基因DNA。隨檢測手段不斷提高,對食品轉基因檢測已從定性提高到定量水平 。對外源基因表達產物蛋白質檢測常用方法有酶聯免疫法(ELISA)、蛋白質印跡法(Westernblot)等,這些檢測方法大多
人工轉基因技術和人工雜交技術的區別
人工轉基因技術和人工雜交技術是兩個概念,植物雜交技術是自體基因重組過程,不改變繁殖特性,但有組合優質基因的幾率,基本不會產生變異基因,即沒有剝奪其基本特性的作物。它可通過原生質體之間的融合、細胞自體細胞重組、自體遺傳物質自由組合轉移、自體染色體工程技術獲得,不改變植物的遺傳特性,可以提高優質率水
核酸分子雜交技術的基本介紹
由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。 (1)靈敏度高、特異性強; (2)用于 DNADNA和RNARNA的定性、定量檢測。
四維核酸雜交技術介紹
四維核酸雜交技術[?1?](4DH),即在傳統核酸雜交三維空間(XYZ:表征DNA片段的長度、堿基組成和堿基的排列)的基礎上引入溫度作為第四位參數所構成的四維溫度空間平臺上建立的核酸雜交技術。背景 基因組(genome)是指人類細胞中所有遺傳信息的總和。基因組信息是由脫氧核糖核酸(又稱為DNA)攜帶
四維核酸雜交技術介紹
定義 四維核酸雜交技術[ 1 ](4DH),即在傳統核酸雜交三維空間(XYZ:表征DNA片段的長度、堿基組成和堿基的排列)的基礎上引入溫度作為第四位參數所構成的四維溫度空間平臺上建立的核酸雜交技術。 背景 基因組(genome)是指人類細胞中所有遺傳信息的總和。基因組信息
四維核酸雜交技術簡介
定義 四維核酸雜交技術[?1?](4DH),即在傳統核酸雜交三維空間(XYZ:表征DNA片段的長度、堿基組成和堿基的排列)的基礎上引入溫度作為第四位參數所構成的四維溫度空間平臺上建立的核酸雜交技術。 背景 基因組(genome)是指人類細胞中所有遺傳信息的總和。基因組信息是由脫氧核糖核酸(又稱為DN
四維核酸雜交技術介紹
定義 四維核酸雜交技術[ 1 ](4DH),即在傳統核酸雜交三維空間(XYZ:表征DNA片段的長度、堿基組成和堿基的排列)的基礎上引入溫度作為第四位參數所構成的四維溫度空間平臺上建立的核酸雜交技術。 背景 基因組(genome)是指人類細胞中所有遺傳信息的總和。基因組信息
關于核酸分子雜交技術的特點和技術介紹
1、特點 (1)靈敏度高、特異性強; (2)用于 DNADNA和RNARNA的定性、定量檢測。 2、用途 (1)檢測特異 DNADNA序列的拷貝數、特定DNADNA區域的限制性內切酶圖譜,判定基因的缺失、插入、重排現象; (2)特異基因克隆的篩選; (3)核酸序列的初略分析; (4
關于核酸分子雜交技術的基本介紹
由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。
基因診斷技術核酸雜交的相關介紹
是從核酸分子混合液中檢測特定大小的核酸分子的傳統方法。核酸雜交反應是一對一的反應,即膜上有一個被檢測分子時,相應就有一個標記的探針分子與它雜交。其原理是核酸變性和復性理論。即雙鏈的核酸分子在某些理化因素作用下雙鏈解開,而在條件恢復后又可依堿基配對規律形成雙鏈結構。雜交通常在一支持膜上進行,因此又
分子雜交技術的核酸探針標記法
核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據是否使用放射性標記物的與否,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針;根據是否存在互補鏈,可分為單鏈和雙鏈探針;根據放射性標記物摻入情況,可分為均勻標記和末端標記探針。下面將介紹各種類型的探針及標記方法。 分子生物研究中,最常用的探針即為雙鏈DNA
核酸突變檢測技術
基因突變是指由于DNA堿基對的置換、增添或缺失而引起的基因結構的變化,亦稱點突變。它的分類方式包括1)根據基因結構的改變方式,基因突變可分為堿基置換突變和移碼突變兩種類型;2)根據遺傳信息的改變方式,基因突變又可以分為同義突變、錯義突變和無義突變三種類型。基因突變的檢測方法:從基因突變的性質來看,檢
醫用核酸分子雜交儀的技術指標
·采用導流雜交技術,提高雜交效率,簡化操作步驟,縮短雜交時間; ·高速熱循環系統,采用先進熱電制冷技術,快速加熱和冷卻; ·彩色LCD顯示器,可對雜交過程中的溫控變化進行實時監控; ·機械升降臺代替手工密封,實現密封自動化; ·壓力平衡系統,減少雜交過程試劑的損耗。
核酸分子雜交技術的基本原理
由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。 具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補還原成雙鏈。雜交的雙方是待測核酸序列
試論轉基因食品檢測技術研究進展
【摘 要】隨著科學技術的迅猛發展,轉基因食品大量出現,并且大量涌入市場。轉基因食品到底對人們的健康有沒有影響,至今還沒有一個定論,因此,對轉基因食品的檢測受到了世界各國衛生組織機構的廣泛關注。? 隨著現代科技的快速發展,以基因工程為代表的現代生物技術也取得了令人注目的成績,特別是與人們生活密
簡述核酸分子雜交技術的基本原理
具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補還原成雙鏈。雜交的雙方是待測核酸序列及探針(probe),待測核酸序列可以是克隆的基因征段,也可以是未克隆化的基因組DNA和細胞總RNA。核酸探針是指用放射性核素、生物素或其他活性物質標記的,能與特定的核酸序列發生
核酸雜交技術(Northern-Blot、Southern-Blot和探針標記)
(一)Southern Blot原理:將待檢測的DNA分子用/不用限制性內切酶消化后,通過瓊脂糖凝膠電泳進行分離,繼而將其變性并按其在凝膠中的位置轉移到硝酸纖維素薄膜或尼龍膜上,固定后再與同位素或其它標記物標記的DNA或RNA探針進行反應。如果待檢物中含有與探針互補的序列,則二者通過堿基互補的原理進
研究突破核酸檢測技術瓶頸
大連理工大學物理學院先進光學與光纖傳感技術團隊的彭偉教授和張揚副教授與中國計量大學合作,發展了一種基于傾斜光纖布拉格光柵(TFBG)的超靈敏核酸檢測系統,相關成果近日發表在《生物傳感器與生物電子學》。核酸作為攜帶和傳遞生物信息的重要遺傳物質,廣泛應用于病毒生物標志物的檢測。對核酸進行準確量化不僅為護
核酸檢測革命:rpa技術原理
重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。本專題為大家詳細介紹RPA的原理、引物設計、疑難解答以及在致病菌檢測、病毒檢測以及癌癥研究中的靈活應用。 自PCR技術誕生以來已經有三十年了,從經典PCR
熒光原位雜交技術檢測植物基因組中整合的轉基因片段...
實驗材料核苷酸 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒冰水 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?8-羥基喹啉 ? ?
熒光原位雜交技術檢測植物基因組中整合轉基因片段實驗
實驗材料核苷酸試劑、試劑盒冰水8-羥基喹啉秋水仙素固定劑酶解緩沖液儀器、耗材載玻片玻璃蓋玻片解剖針及鑷子實驗步驟原位雜交的基本操作方法(圖 14 .2 ) 演化自 Southern 雜交:標底是玻片上的染色體和細胞核,探針是帶標記的待測 DNA 序列 [ 本書中即是轉基因和對照,圖 14.3(a)
Southern雜交技術
?SOUTHERN BLOT1. Run the gel as normal. Often for genomic southerns it is desirable to run long gels (18cm) over 4-6hrs.2. Photograph the gel with a r