尿液蛋白質定量檢測操作
先做尿蛋白定性試驗,以適當稀釋標本。在試管中加入100μl標本,再加入1 ml三氯乙酸一麗春紅-S應用液,混勻后以3 000 r/min離心15分鐘,吸去上清液,倒置于潔凈濾紙上。在沉淀中加入0.2 mol/L氫氧化鈉溶液l ml,用560 nm波長測定其吸光度,查標準曲線的蛋白含量。......閱讀全文
尿液蛋白質定量檢測操作
先做尿蛋白定性試驗,以適當稀釋標本。在試管中加入100μl標本,再加入1 ml三氯乙酸一麗春紅-S應用液,混勻后以3 000 r/min離心15分鐘,吸去上清液,倒置于潔凈濾紙上。在沉淀中加入0.2 mol/L氫氧化鈉溶液l ml,用560 nm波長測定其吸光度,查標準曲線的蛋白含量。
尿液蛋白質定量檢測方法
麗春紅-S法 尿液標本中的蛋白質與麗春紅-S染料混勻后一起被三氯醋酸沉淀,將沉淀物溶解于堿性溶液中,此時溶液呈紫色,顯色深度與蛋白質濃度成正比。 試劑三氯乙酸-麗春紅-S試劑原液:稱取麗春紅-S 1.0 g,加入到1 000 ml 300 g/L三氯乙酸中溶解。 三氯乙酸-麗春紅-S試劑應
尿液蛋白質定量檢測試劑
蛋白沉淀液:稱取磷鎢酸7.5 g,加入30 ml蒸餾水、95%乙醇385 ml、濃鹽酸25 ml。 雙縮脲液:(1)稱取枸櫞酸鈉34.6 g,無水碳酸鈉20 g,加入120 ml蒸餾水使其溶解;(2)稱取硫酸銅3.46 g,加入20 ml蒸餾水使其溶解。將(1)、(2)混合,加入蒸餾水至200
蛋白質檢測和定量方法
蛋白質定量方法最早出現在20世紀50年代早期,當時物理學家和化學家進入生物學領域,并將他們的技術應用于蛋白質的分析和測量。 Lowry蛋白質分析是第一個確定溶液中蛋白質總水平的生化分析。不久之后,該測定通過其他測量方法引入,包括紫外(UV)系統和氨基酸分析。所有這些方法都能夠表征水中的蛋白質或非
蛋白質定量檢測方法——BCA法
BCA(Bicinchoninc acid procedure,4,4’-二羧-2,2’-二喹啉)法與Lowry法相似,主要差別在堿性溶液中,蛋白質使Cu2+轉變Cu+后,進一步以BCA 取代Folin試劑與Cu+結合產生深紫色,在波長562 nm有強的吸收。 它的優點在于堿性溶液中B
用尿液分析儀和化學定量法測定腦脊液糖和蛋白質
尿液自動分析儀已在臨床廣泛應用,有文獻報道用對腦脊液標本進行糖和蛋白質等項目進行測定。我們從1996年1月~1999年6月用尿液分析儀和常規的化學定量法同時測定臨床送檢的65例腦脊液標本的糖和蛋白質,發現兩法結果存在顯著差異。現報告如下。 1 材料與方法 1.1 尿液分析儀 美國泰
尿液蛋白質檢查的檢測方法及評價
1. 尿蛋白定性試驗為蛋白尿的過篩試驗。 (1)試帶法:利用pH指示劑的蛋白誤差原理。本法對清蛋白較敏感,對球蛋白的敏感性僅為清蛋白的1/100~1/50,且可漏檢本周蛋白。尿液pH值增高也可產生假陽性。本法快速、簡便、易于標準化,適于健康普查或臨床篩檢。 (2)加熱乙酸法:為傳統的經典方法
尿液蛋白質檢查檢測方法及評價
1.?尿蛋白定性試驗為蛋白尿的過篩試驗。(1)試帶法:利用pH指示劑的蛋白誤差原理。本法對清蛋白較敏感,對球蛋白的敏感性僅為清蛋白的1/100~1/50,且可漏檢本周蛋白。尿液pH值增高也可產生假陽性。本法快速、簡便、易于標準化,適于健康普查或臨床篩檢。(2)加熱乙酸法:為傳統的經典方法。加熱煮沸使
蛋白質定量檢測方法——紫外吸收法
大多數蛋白質在280nm波長處有特征的最大吸收,這是由于蛋白質中有酪氨酸,色氨酸和苯丙氨酸存在,可用于測定0.1~0.5mg/mL含量的蛋白質溶液。取9支試管分別標號,前8支試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液,1號試管不加標準蛋白溶液,最后一支試管加待測蛋白質溶液,而不加標準蛋白溶液,每支試管液體總
蛋白質定量檢測方法——酚試劑法
取6支試管分別標號,前5支試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液,最后一支試管加待測蛋白質溶液,不加標準蛋白溶液,在室溫下放置30分鐘,以未加蛋白質溶液的第一支試管作為空白對照,于650nm波長處測定各管中溶液的吸光度值。優點:靈敏度高,對水溶性蛋白質含量的測定很有效。缺點:①費時,要精確控制操作時間;
尿液蛋白質檢查
尿液蛋白為尿液化學成分檢查中最重要的項目之一。正常人的腎小球濾液中存在小分子量的蛋白質,在曲小管時絕大部分又被重吸收,因此終尿中的蛋白質含量很少,僅為30-130mg/24h。隨機一次尿中蛋白質為0.80mg/L。尿蛋白定性試驗呈陰性反應。當尿液中蛋白質超過正常范圍時稱為蛋白尿,含量大于0.1g/
蛋白質定量
Quantitative Determination of Peptides by Sulfhydryl (-SH) Groups?New?(Contributed by David Van Horn, Dept. of Chemistry, UC Berkeley Greg Bulaj, Dept
蛋白質的檢測和定量方法以及進展
國家標準物質資源平臺:蛋白質定量方法最早出現在20世紀50年代早期,當時物理學家和化學家進入生物學領域,并將他們的技術應用于蛋白質的分析和測量。 Lowry蛋白質分析是個確定溶液中蛋白質總水平的生化分析。不久之后,該測定通過其他測量方法引入,包括紫外(UV)系統和氨基酸分析。所有這些方法都能
蛋白質定量檢測方法——雙縮脲法
雙縮脲法是一個用于鑒定蛋白質的分析方法。雙縮脲試劑是一個堿性的含銅試液,呈藍色,由1%氫氧化鉀、幾滴1%硫酸銅和酒石酸鉀鈉配制。當底物中含有肽鍵時(多肽),試液中的銅與多肽配位,配合物呈紫色。可通過比色法分析濃度,在紫外可見光譜中的波長為540nm。鑒定反應的靈敏度為5-160mg/ml。鑒定反應蛋
蛋白質的檢測和定量方法以及進展
國家標準物質資源平臺:蛋白質定量方法早出現在20世紀50年代早期,當時物理學家和化學家進入生物學領域,并將他們的技術應用于蛋白質的分析和測量。 Lowry蛋白質分析是個確定溶液中蛋白質總水平的生化分析。不久之后,該測定通過其他測量方法引入,包括紫外(UV)系統和氨基酸分析。所有這些方法都能夠表征水中
尿液分析檢測
尿液中相應的化學成分使尿多聯試帶上各種含特殊試劑的膜塊發生顏色變化,顏色深淺與尿液中相應物質的濃度成正比;將多聯試帶置于尿液分析儀比色進樣槽,各膜塊依次受到儀器光源照射并產生不同的反射光,醫學教育|網搜集整理儀器接收不同強度的光信號后將其轉換為相應的電訊號,再經微處理器由下列公式計算出各測試項目的反
尿液蛋白質檢查(2)
二、尿液微量白蛋白測定1982年Viberti在研究糖尿病性腎病時,首先提出了微量白蛋白尿的概念,以區別于臨床蛋白尿,經后微量白蛋白尿這一概念界定為尿中白蛋白排出量在3.2-22.6mg/mmolGr(30-200mg/gGr),或排出率在20-200μg/min這一范圍內。即超過尿蛋白正常范圍的上
尿液蛋白質檢查(1)
尿液蛋白為尿液化學成分檢查中最重要的項目之一。正常人的腎小球濾液中存在小分子量的蛋白質,在曲小管時絕大部分又被重吸收,因此終尿中的蛋白質含量很少,僅為30-130mg/24h。隨機一次尿中蛋白質為0.80mg/L。尿蛋白定性試驗呈陰性反應。當尿液中蛋白質超過正常范圍時稱為蛋白尿,含量大于0.1g/L
基因分型定量檢測技術的操作流程
基因分型定量檢測系統的操作流程包括:寡核苷酸探針的合成、固定、雜交和檢測等四個步驟。該系統對于疾病的診斷、預后、病理分析、治療等具有重大意義。
蛋白質定量實驗
考馬斯亮藍蛋白質濃度分析法 堿性銅還原分析法 胺衍生法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 蛋白質分子中的芳香族氨基酸酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸殘基,其化學結構中
蛋白質定量實驗
試劑、試劑盒 考馬斯亮藍 G250乙醇磷酸實驗步驟 (1) 準備 100~1500 ug/ml 的標準品, 溶于 Bradford 法相兼容緩沖液中。對于較稀的樣品,可能通過增加樣品在試劑體積中的比率而擴大靈敏度(microBradfordassay:1~25ug/mL)。如果樣品與染料的比
蛋白質定量檢測方法——凱氏定氮法
凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉化為氨,隨水蒸氣蒸餾出來并為過量的硼酸液吸收,再以標準鹽酸滴定,就可計算出樣品中的氮量。由于蛋白質含氮量比較恒定,可由其氮量計算蛋白質含量,故此法是經典的蛋白質定
蛋白質定量檢測方法——考馬斯亮藍法
考馬斯亮藍顯色法的基本原理是根據蛋白質可與考馬斯亮藍G-250 定量結合。當考馬斯亮藍 G-250 與蛋白質結合后,其對可見光的最大吸收峰從 465nm 變為 595nm。在考馬斯亮藍 G-250 過量且濃度恒定的情況下,當溶液中的蛋白質濃度不同時,就會有不同量的考馬斯亮藍 G-250 從吸收峰為
促甲狀腺素(TSH)定量檢測操作規程
一:實驗操作【基本步驟】1.根據校準品 樣品 質控品數量在板架上放好微孔板2.加樣:每孔加入校準品 指控品或樣品50微升,然后再依次加入50微升酶結合物。3.溫育:蓋好蓋板膜,在震蕩器上震蕩片刻后,置37度水浴箱中溫育2小時。4.洗板:機洗或手洗。吸出或倒出反應液體,加入洗滌液五次(每次加入洗滌液后
蛋白質定量檢測方法——膠體金測定法
膠體金(colloidal gold)是氯金酸(chloroauric acid)的水溶膠,呈洋紅色,具有高電子密度,并能與多種生物大分子結合。 膠體金是一種帶負電荷的疏水膠體遇蛋白質轉變為藍色,顏色的改變與蛋白質有定量關系,可用于蛋白質的定量測定。
尿液常規檢測SOP
(一)檢測原理 通過肉眼觀察判斷尿外觀。透明度,可分為清晰透明、輕度混濁(霧狀)、混濁(云霧狀)、明顯混濁4個等級。 ? ? (二)方法學評價 ? ? 尿色和透明度判斷,受主觀因素影響。尿透明度還易受某些鹽類結晶的影響。臨床應用僅作參考。 (三)質量控制 1.使用新鮮尿
尿液常規檢測SOP
(一)檢測原理? 通過肉眼觀察判斷尿外觀。透明度,可分為清晰透明、輕度混濁(霧狀)、混濁(云霧狀)、明顯混濁4個等級。 (二)方法學評價 尿色和透明度判斷,受主觀因素影響。尿透明度還易受某些鹽類結晶的影響。臨床應用僅作參考。 (三)質量控制 1.使用新鮮尿尿放置時間過長,鹽類結晶析出、尿膽
尿液常規檢測SOP
(一)檢測原理? 通過肉眼觀察判斷尿外觀。透明度,可分為清晰透明、輕度混濁(霧狀)、混濁(云霧狀)、明顯混濁4個等級。 (二)方法學評價 尿色和透明度判斷,受主觀因素影響。尿透明度還易受某些鹽類結晶的影響。臨床應用僅作參考。 (三)質量控制 1.使用新鮮尿尿放置時間過長,鹽類結晶析出、尿膽
尿液常規檢測SOP
(一)檢測原理?? 通過肉眼觀察判斷尿外觀。透明度,可分為清晰透明、輕度混濁(霧狀)、混濁(云霧狀)、明顯混濁4個等級。?? (二)方法學評價?? 尿色和透明度判斷,受主觀因素影響。尿透明度還易受某些鹽類結晶的影響。臨床應用僅作參考。?? (三)質
定量的基本操作
?定量之前一般都會進行一些實驗操作,定量關系到標準溶液的配置與制備的問題。??? 容量法、比色法等利用標準溶液的制備,以及重量法中的物質之干燥、重量的測定,這些都是重要的基本操作。有共存物質的干擾而不能將水樣直接用于分析,對常常利用沉淀、過濾、離心分離、蒸餾、溶劑萃取、離子交換等方法除去干擾物質,或