高效液相色譜技術和經典常壓色譜相比有以下特點
1、HPLC分離、純化蛋白質的速度快。通常半小時左右可進行一次,大大縮短了純化蛋白質的時間; 2、分辯率高。一根長10cm的色譜柱可分離十幾種以上的物質; 3、適應面廣,靈活性強,幾乎所有的蛋白質根據它們的性質差別(等電點、疏水性、分子量、電荷分布等)都可以用不同HPLC方法進行分離提純; 4、靈敏度高。HPLC現已廣泛采用多種高靈敏度的檢測器,如紫外、熒光、電導等。熒光的靈敏度可達10-9g; 5、重復性好,在作分析蛋白質分析試驗時,誤差一般不超過5%。 因此,HPLC在蛋白質分離純化方面具有極其重要的位置。當然HPLC也有它的缺點,例如,儀器設備價格昂貴,雖然已有制備柱使用,但制備量還是受到限制,在某些方法中,由于使用有機溶劑,對蛋白質的活性會有一定影響。高效液相色譜儀是高效液相色譜的專用儀器,有很多種類,從類型看分為綜合型高效液相色譜儀和專用型儀器,從功能上分為分析型、制備型、分析和制備兼用型。......閱讀全文
高效液相色譜技術和經典常壓色譜相比有以下特點
1、HPLC分離、純化蛋白質的速度快。通常半小時左右可進行一次,大大縮短了純化蛋白質的時間; 2、分辯率高。一根長10cm的色譜柱可分離十幾種以上的物質; 3、適應面廣,靈活性強,幾乎所有的蛋白質根據它們的性質差別(等電點、疏水性、分子量、電荷分布等)都可以用不同HPLC方法進行分離提純;
高效液相色譜儀與經典液相色譜儀相比具有以下特點
一.高壓:流動相是液體,當它流經高效液相色譜儀的色譜柱時,會遇到很大的阻力。為了快速通過高效液相色譜儀的色譜柱,必須對載液施加高壓。二.高速:分析速度快,載液速度比傳統液相色譜快得多。一般來說,高效液相色譜儀樣品的分析可以在15-30分鐘內完成,有些樣品甚至可以在5分鐘內完成,通常不到1小時。三.高
高效液相色譜儀與經典液相色譜儀相比具有以下特點
一.高壓:流動相是液體,當它流經高效液相色譜儀的色譜柱時,會遇到很大的阻力。為了快速通過高效液相色譜儀的色譜柱,必須對載液施加高壓。二.高速:分析速度快,載液速度比傳統液相色譜快得多。一般來說,高效液相色譜儀樣品的分析可以在15-30分鐘內完成,有些樣品甚至可以在5分鐘內完成,通常不到1小時。三.高
超高效液相色譜相比高效液相色譜有哪些提升
超高效液相色譜(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)借助于HPLC(高效液相色譜)的理論及原理,涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術,增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。 超高效液相色譜法的原理與高效液相色譜法基本
超高效液相色譜相比高效液相色譜有哪些提升
超高效液相色譜(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)借助于HPLC(高效液相色譜)的理論及原理,涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術,增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。 超高效液相色譜法的原理與高效液相色譜法基本
超高效液相色譜相比高效液相色譜有哪些提升
超高效液相色譜(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)借助于HPLC(高效液相色譜)的理論及原理,涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術,增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。 超高效液相色譜法的原理與高效液相色譜法基本
高效液相色譜與氣相色譜相比有什么優點
液相測定范圍廣:液相色譜儀可檢測物質比較多,配備不同的檢測器,結合衍生實驗可以檢測絕大多數化合物。氣相色譜可檢測的物質只有易揮發物質,尤其是有機物測定有很好的效果。\x0d\x0a精密度高:常做實驗就可以知道,液相的精密度判定標準為RSD小于2%,而氣相是10%。說明氣相的實驗誤差很大,無法達到液相
高效液相色譜與氣相色譜相比有什么優點
1高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果,比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。? 2高靈敏度:紫外檢測器可達0.01ng,進樣量在μL數量級。3應用范圍廣:百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析,特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析,顯示出優勢
高效液相色譜與氣相色譜相比有哪些優點
氣相色譜的分析對象是在校溫下具有一定的揮發性、對熱穩定購物質。因此它只限于分析氣體和沸點低的化合物或揮發性的衍生物。而高效液相色譜由于以液體作為流動相,只要被分析的物質在選用的流動相中有一定的按解度,便可以分析,所以適用性廣,不受樣品揮發性和熱穩定性的限制,特別適合于那些沸點高、極性強、熱穩定性差的
高效液相色譜特點
①高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。 ②高速:分析速度快、載液流速快,較經典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小于1小時。 ③高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離
高效液相色譜法與氣相色譜相比液相色譜的優點
高效液相色譜法與氣相色譜相比液相色譜的優點 :與氣相色譜法相比,液相色譜法不受樣品揮發性和熱穩定性及相對分子質量的限制,只要求把樣品制成溶液即可,非常適合于分離生物大分子、離子型化合物,不穩定的天然產物以及其他各種高分子化合物等。此外,液相色譜的流動相不僅起到使樣品沿色譜柱移動的作用,而且與固定相一
高效液相色譜技術
高效液相色譜(HPLC:High Performance Liquid Chromatography )是化學、生物化學與分子生物學、醫藥學、農業、環保、商檢、藥檢、法檢等學科領域與專業最為重要的分離分析技術,是分析化學家、生物化學家等用以解決他們面臨的各種實際分離分析課題必不可缺少的工具。國際市場
色譜技術方法高效液相色譜
高效液相色譜 (HPLC)是目前應用最多的色譜分析方法,高效液相色譜系統由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩;進樣系統要求進樣便利切換嚴密;由于液體流動相粘度遠遠高于氣體,
經典的液相色譜的顯著特點有哪些
液相色譜法(HPLC)具有高壓、、高速、高靈敏度、高選擇性等特點,廣泛應用于醫藥、環保、石化、食品、化工等行業,是現在分離分析的重要方法1、高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。2、:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到佳分離效果,比工業精餾塔和
經典的液相色譜的顯著特點有哪些
液相色譜法(HPLC)具有高壓、、高速、高靈敏度、高選擇性等特點,廣泛應用于醫藥、環保、石化、食品、化工等行業,是現在分離分析的重要方法 1、高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。 2、:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到佳分離
與氣相色譜法相比液相色譜有哪些優點和不足
? 氣相色譜的分析對象是在校溫下具有一定的揮發性、對熱穩定購物質。因此它只限于分析氣體和沸點低的化合物或揮發性的衍生物。而液相色譜由于以液體作為流動相,只要被分析的物質在選用的流動相中有一定的按解度,便可以分析,所以適用性廣,不受樣品揮發性和熱穩定性的限制,特別適合于那些沸點高、極性強、熱穩定性差的
制備色譜和其他高效液相色譜有哪些區別
高效液相色譜和制備色譜不是同一個概念,兩者并沒有直接關聯,你搞混淆了。高效液相色譜是一種分析方法,制備色譜是一種分離純化手段。高效液相色譜把普通的色譜柱換成制備柱,就是制備液相色譜,兩者的區別在于一種以分析為目的,追求的是檢測精度,樣品承載量非常小;制備色譜以分離純化為目的,它追求的是樣品承載量,檢
高效液相色譜與超高效液相色譜條件有什么差異
原理是一致的。不同的地方一個是儀器,一個是色譜柱。后者超高效液相色譜,可以縮短檢測時間,節省時間,節省流動相,大大地提高了效率。先說色譜柱,超高效液相色譜柱的粒徑會更小,柱子也更短。如果說樣品流過液相色譜柱的感覺是流過滿是石頭的管路,那么超高效液相色譜柱就是裝滿了沙子的管路。一般液相色譜柱的粒徑是5
高效液相色譜的特點和應用介紹
高效液相色譜 (HPLC)是目前應用最多的色譜分析方法,高效液相色譜系統由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩;進樣系統要求進樣便利切換嚴密;由于液體流動相粘度遠遠高于氣體,
高效液相色譜的結構原理和特點
高效液相色譜儀主要由色譜泵及控制器、進樣器、色譜柱、檢測器和數據處理及控制五大部分組成,分離原理是一個物理過程,流動相攜帶著待分析化合物和其他一些共存物質流過色譜柱,利用不同物質在固定相上的保留時間不同,從而出峰時間不同而達到分離,利用保留時間定性,峰高或者峰面積定量,在將分離后的各個成分依次通過
液相色譜的分類和高效液相色譜用途
制備型加壓液相色譜,按照色譜柱和樣品量的大小,分為:(1)低壓液相色譜;(2)中壓液相色譜;(3)高壓液相色譜;(4)快速色譜。低壓、中壓與高壓液相色譜的壓力范圍之間會存在一定交疊,沒有統一、明確的標準。 1、快速色譜 柱壓通常為2bar(或30psi)左右,對于那些容易分離的簡單混
變性高效液相色譜技術
變性高效液相色譜 (denaturing high performance liquid chromatography, DHPLC)是一項在單鏈構象多態性 (SSCP)和變性梯度凝膠電泳 (DGGE)基礎上發展起來的新的雜合雙鏈突變檢測技術,可自動檢測單堿基替代及小片段核苷酸的插入或缺失。DHPL
高效液相色譜之高效反相液相色譜(一)
反相色譜(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式,任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分,這部分越大,一般保留值越高,在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式,在生物大分子的反相液相色
高效液相色譜之高效排阻液相色譜
高效液相色譜(High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC)又叫高壓、高速、近代液相色譜,通常叫做高效液相色譜。它是60年代中期才建立的一種高效快速分離化合物的方法,到了70年代后期才廣泛用于蛋白質的分離純化方面,現已成為分離純化蛋白質非常有效的方
高效液相色譜之高效反相液相色譜(二)
附:色譜柱操作說明,(以迪馬公司Diamonsil(TM)柱為例)1. 色譜柱常規參數訂貨號:Catalog.No. ? ? ? ? ? ? 產品ZL號 Serial No.出廠日期 ?Date填料 ?Column Paking ? ? 如,Diamonsil(TM)鉆石C18 5цm柱規格 Col
和氣相色譜法相比,高效液相色譜法有何優點
不受試樣的揮發性和熱穩定性限制,應用范圍廣;流動相種類多,源可通過流動相的優化達到高的分離效率;一般在啊室溫下分析即可,不需高柱溫。
高效液相色譜串聯質譜和高效液相色譜質譜法的區別
兩個的區別是質譜部分不同,串聯質譜的質譜部分是多級的,而后者是一級的。
高效液相色譜串聯質譜和高效液相色譜質譜法的區別
兩個的區別是質譜部分不同,串聯質譜的質譜部分是多級的,而后者是一級的。
分析型高效液相色譜和制備型高效液相色譜的區別
是的,兩者有關也沒關,制備液相一般是中藥用的,差別在于精密度和載樣量上,普通液相接上制備柱就是制備液相
高效液相色譜柱有哪些要求?
填充劑的要求 最常用的色譜柱填充劑為化學鍵合硅膠。反相色譜系統使用非極性填充劑,以十八烷基硅烷鍵合硅膠最為常用,辛基硅烷鍵合硅膠和其他類型的硅烷鍵合硅膠(如氰基鍵合硅烷和氨基鍵合硅烷等)也有使用。正相色譜系統使用極性填充劑,常用的填充劑有硅膠等。離子交換色譜系統使用離子交換填充劑;分子排阻色譜系統