細胞培養概念和方法
細胞培養(英語:cell culture)是一種現代生物學技術,是將真核生物或原核生物細胞培養在受控制的狀態下,使其生長。這項技術的發展與方法,與組織培養或器官培養關系密切。細胞培養的例行步驟包括解凍細胞、換盤、分盤、換細胞培養液、結凍細胞等步驟。細胞培養分為兩大類:貼壁培養(adherent culture)又稱單層培養、懸浮培養(suspension culture)。最早的實驗室常態性動物細胞培養,始于1950年代。不過早在19世紀,便已經有人提出將活體細胞從原先的組織中分離出來的概念。......閱讀全文
啟動子捕獲的概念和方法
中文名稱啟動子捕獲英文名稱promoter trapping定 義用于確定基因組DNA啟動子區域的一項技術。用做檢測的載體含有報道基因可作表達的標記,但缺乏啟動子,將擬檢測的DNA序列克隆入這種載體的適當位置,導入細胞或個體,從報道基因表達的程度可分析出啟動子的存在與否及其強弱。應用學科生物化學與
電穿孔的方法概念和應用特點
電穿孔(Electroporation)也叫電轉染,是通過高強度的電場作用,瞬時提高細胞膜的通透性,從而吸收周圍介質中的外源分子。這種技術可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病毒顆粒等導入原核和真核細胞內。電轉化相對其它物理和化學轉化方法,是一種有價值和有效的替代方法。
免疫的概念和種類及獲得方法
免疫(Immunity), 所謂“免疫”,顧名思義即免除瘟疫(古代的瘟疫指各種疫病)。免疫是指機體免疫系統識別自身與異己物質,并通過免疫應答排除抗原性異物,以維持機體生理平衡的功能。1、天然免疫:個體與生俱有,一般為非特異性免疫,如吞噬細胞的作用。2、獲得性免疫1)自動獲得性免疫:一般免疫時間長。可
非組蛋白的概念和檢測方法
非組蛋白主要是指與特異DNA序列相結合的蛋白質,所以又稱序列特異性DNA結合蛋白(sequence specific DNA binding protein)。利用凝膠延滯實驗(gel retardation assay),可以在細胞抽提物中進行檢測。首先制備一段帶有放射性標記的已知特異序列的DNA
外顯子捕獲的概念和方法
外顯子捕獲(exon trapping) 是構建一種載體,從其插入片段中識別和回收外顯子序列,從而克隆目的基因。捕獲外顯子的載體pETV—SD是一種反轉錄病毒穿梭載體,即可在不同種生物中如大腸桿菌和酵母,細菌和哺乳動物細胞等進行復制的載體。因為凡是有內含子和外顯子的基因在轉錄后都要經過RNA剪接,這
檢驗儀器的基礎概念和維護方法
??? 檢驗技術在人類生產生活中有著廣泛的應用,是各行各業進行檢測、診斷的重要工具。現代化檢驗儀器的誕生和使用,更是大大提高了工作效率,保證了檢驗質量。不過,人們的日常使用和保養影響著檢驗儀器的度和壽命,因此使用者需要掌握檢驗儀器相關的基礎知識,并了解一些保養維護方面的知識。? 檢驗儀器的基礎概念
物種豐富度的概念和檢測方法
物種豐富度即系統中物種的數目,是最簡單、最直觀的群落物種多樣性測度方法,進而反映生物多樣性。在研究實踐中,常用單位面積內的物種數目(密度)或一定數量的生物個體中(或生物量中)的物種數目。這兩種方法的應用范圍各有側重,前者多用于植物群落物種多樣性的調查,而后者則主要用于水域物種多樣性的研究。除此之外,
反乳化作用的概念和方法
乳狀液的分散相小液珠聚集成團,形成大液滴,最終使油水兩相分層析出的過程。破乳方法可分為物理機械法和物理化學法。物理機械法有電沉降、過濾、超聲等;物理化學法主要是改變乳液的界面性質而破乳,如加入破乳劑。
酶免疫測定的概念和方法
酶免疫測定(enzyme immunoassay,EIA),是將酶催化作用的高效性與抗原抗體反應的特異性相結合的一種微量分析技術。酶標記抗原抗體后形成的酶標記物,既保留抗原或抗體的免疫活性,又保留酶的催化活性。當酶標記物與待測樣品中相應的抗原或抗體相互作用時,可形成酶標記抗原抗體復合物。利用復合物上
細胞培養方法
一、準備工作 準備工作對開展細胞培養異常重要,工作量也較大,應給予足夠的重視,推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養箱及其他儀器的檢查與調試,具體內容可參閱有關文獻。 二、取材
細胞培養方法
1、收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快聯系。2、收到細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。因路途耽擱等因素,細胞會有部分脫落。請在超凈臺中將培養瓶里的培養基吸出一部分,保留大約5-6ml左右在培養瓶里。將培養瓶置于37℃培養箱中培養,蓋子微微擰松。吸出的培養基可以
細胞培養方法
細胞培養方法:1.玻璃吸管和玻璃培養瓶的消毒:高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時以上;2.無菌工作臺先清洗后用75%酒精擦拭干凈,紫外線照射40分鐘以上;各種培養板照射3小時以上;3.培養基(pH7.2)和血清配制好后要做無菌試驗:將血清按10%加入培養基內,用無菌的玻璃離心管或玻
細胞培養方法
一、準備工作? 準備工作對開展細胞培養異常重要,工作量也較大,應給予足夠的重視,推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養箱及其他儀器的檢查與調試,具體內容可參閱有關文獻。?二、取
細胞培養細胞凍存的基本概念
細胞凍存是將細胞放在低溫環境,減少細胞代謝,以便長期儲存的一種技術。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一,起到了細胞保種的作用
原代細胞培養和傳代培養的方法
原代培養 原理 將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用 EDTA 或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖這一過程稱原代培養。 儀器、材料及試劑 儀器:培養箱(調整至 37℃),培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸
細胞培養和轉染
第三章 細胞培養和轉染?1. 細胞培養(HEK293T)?1) 顯微鏡下觀察細胞,細胞生長狀態良好,去上清;?2) 加入預熱的PBS 3ml, 溫柔地清洗細胞,棄去PBS;?3) 用胰蛋白酶消化細胞,通常75cm2 培養瓶的貼壁細胞用3ml 胰蛋白酶于37oC?處理5min;?4) 待細胞脫落后,加
放射分析法的概念和主要方法
利用放射性核素及核射線對各種元素或化合物進行體外分析(主要是定量分析)的各種方法,統稱放射分析。?主要方法有:放射分析法、放射化學分析、活性分析、激發X射線熒光分析法、穆斯堡爾共振譜、正電子堙沒法、核磁共振法等。
分批補料式培養的概念和方法
分批補料式培養是指先將一定量的培養液裝入反應器,在適宜的條件下接種細胞,進行培養,使細胞不斷生長,產物不斷形成,而在此過程中隨著營養物質的不斷消耗,不斷地向系統中補充新的營養成分,使細胞進一步生長代謝,直到整個培養結束后取出產物。
環境溫度的概念和測量方法
環境溫度是表示環境冷熱程度的物理量,測量方法有干球溫度法、濕球溫度法、黑球溫度法。
秩和檢驗效能評估方法的概念和用途
秩和檢驗效能評估方法主要是用于評估秩和檢驗在特定條件下正確檢測出差異的能力。以下是關于秩和檢驗效能評估方法的一些介紹:一、模擬研究法建立數據模型:根據實際問題設定數據生成模型,確定總體分布類型、參數取值、樣本量大小以及處理效應等。例如,可以假設總體為偏態分布,設定不同的均值和標準差,同時確定兩組數據
細胞學標記的概念和方法特點
細胞遺傳標記(Cytological Genetic Markers )是指對處理過的動物個體染色體數目和形態進行分析,主要包括:染色體核型和帶型及缺失、重復、易位、倒位等。一個物種的核型特征即染色體數目、形態及行為的穩定是相對的,故可作為一種遺傳標記來測定基因所在的染色體及在染色體上的相對位置,染
半縮酮的基本概念和制備方法
半縮醛醛和醇在酸的催化下,醛的羰基被醇的羥基加成,原有的羰基碳上連接有一個醇羥基和一個醚鍵。一般來說半縮醛都是不穩定的,要么繼續生成縮醛,要么分解重新回到醛和醇。半縮醛是一類同一碳上連有一個羥基,一個烷氧基和一個氫的有機化合物。半縮醛由醛與醇發生親核加成反應生成,烷氧基來自醇,其它部分來自醛。一般的
常用的分離方法萃取的概念和應用
萃取,又稱溶劑萃取或液液萃取,亦稱抽提,是利用系統中組分在溶劑中有不同的溶解度來分離混合物的單元操作。即,是利用物質在兩種互不相溶(或微溶)的溶劑中溶解度或分配系數的不同,使溶質物質從一種溶劑內轉移到另外一種溶劑中的方法。廣泛應用于化學、冶金、食品等工業,通用于石油煉制工業。另外將萃取后兩種互不相溶
免疫組化的概念和常用方法
概念和常用方法介紹1、定義用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究,這種技術稱為免疫組織化學(immunohistochemistry)技術或免疫細胞化學(immunocytochemistry)技術。2、原理根據抗原抗體反應和化學顯色原
基因共轉染的概念和方法介紹
基因工程中將兩個以上的基因同時導入感受態真核細胞的方法,稱作共轉化(cotransformation,也稱共轉染)。將目的基因表達載體DNA 和標記基因表達載體DNA 混合后共同轉移到靶細胞中,分別使用標記基因與目的基因對應的選擇劑進行兩次篩選,最后可得到復合轉導的轉化子。在磷酸鈣沉淀物中,兩種物理
界面張力儀的概念和測量方法
界面是指兩相接觸的約幾個分子厚度的過渡區,如其中一相為氣體,這種界面通常稱作為表面。嚴格說表面應是液體和固體與其飽和蒸汽之間的界面,但習慣上把液體或固體與空氣的界面稱為液體或固體的表面。常見的界面有:氣-液界面,氣-固界面,液-液界面,液-固界面,固-固界面。與表面張力不同,處在界面層的分子,一方面
界面張力儀的概念和測量方法
界面是指兩相接觸的約幾個分子厚度的過渡區,如其中一相為氣體,這種界面通常稱作為表面。嚴格說表面應是液體和固體與其飽和蒸汽之間的界面,但習慣上把液體或固體與空氣的界面稱為液體或固體的表面。常見的界面有:氣-液界面,氣-固界面,液-液界面,液-固界面,固-固界面。與表面張力不同,處在界面層的分子,一方面
免疫學標記的概念和方法特點
免疫學標記(Immune Genetic Markers)是以動物的免疫學特征為遺傳標記,主要指:紅細胞抗原、白細胞抗原、胸腺細胞抗原等。早在1900年,Ehrlich和Morgenroth指出山羊紅細胞表面存在抗原,并證明這些抗原具有個體差異;20世紀80年代初,人們轉向白細胞抗原的研究,即主要組
形態學標記的概念和方法特點
形態標記(Morphological Markers)是指肉眼可見的或儀器測量動物的外部特征 (如毛色、體型、外形、皮膚結構等),以這種形態性狀、生理性狀及生態地理分布等待征為遺傳標記,研究物種間的關系、分類和鑒定。形態學標記研究物種是基于個體性狀描述,得到的結論往往不夠完善,且數量性狀很難剔除環境
淀粉酶的概念和制備方法介紹
淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶類總稱,通常通過淀粉酶催化水解織物上的淀粉漿料,由于淀粉酶的高效性及專一性,酶退漿的退漿率高,退漿快,污染少,產品比酸法、堿法更柔軟,且不損傷纖維。淀粉酶的種類很多,根據織物不同,設備組合不同,工藝流程也不同,所用的退漿方法有浸漬法、堆置法、卷染法、連續洗等,由于淀粉酶退漿