啟動子捕獲的概念和方法
中文名稱啟動子捕獲英文名稱promoter trapping定 義用于確定基因組DNA啟動子區域的一項技術。用做檢測的載體含有報道基因可作表達的標記,但缺乏啟動子,將擬檢測的DNA序列克隆入這種載體的適當位置,導入細胞或個體,從報道基因表達的程度可分析出啟動子的存在與否及其強弱。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)......閱讀全文
啟動子捕獲的概念和方法
中文名稱啟動子捕獲英文名稱promoter trapping定 義用于確定基因組DNA啟動子區域的一項技術。用做檢測的載體含有報道基因可作表達的標記,但缺乏啟動子,將擬檢測的DNA序列克隆入這種載體的適當位置,導入細胞或個體,從報道基因表達的程度可分析出啟動子的存在與否及其強弱。應用學科生物化學與
外顯子捕獲的概念和方法
外顯子捕獲(exon trapping) 是構建一種載體,從其插入片段中識別和回收外顯子序列,從而克隆目的基因。捕獲外顯子的載體pETV—SD是一種反轉錄病毒穿梭載體,即可在不同種生物中如大腸桿菌和酵母,細菌和哺乳動物細胞等進行復制的載體。因為凡是有內含子和外顯子的基因在轉錄后都要經過RNA剪接,這
啟動子的的概念和特性
啟動子是RNA 聚合酶識別、結合和開始轉錄的一段DNA 序列,它含有RNA 聚合酶特異性結合和轉錄起始所需的保守序列,多數位于結構基因轉錄起始點的上游,啟動子本身不被轉錄。但有一些啟動子(如tRNA啟動子)位于轉錄起始點的下游,這些DNA序列可以被轉錄。啟動子的特性最初是通過能增加或降低基因轉錄速率
啟動子封堵的概念
中文名稱啟動子封堵英文名稱promoter occlusion定 義上游啟動子對下游啟動子的阻礙作用。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),基因表達與調控(二級學科)
啟動子清除的概念
聚合酶轉錄時,首先結合到啟動子上,找到特異結合位點,激活后起始轉錄。 特異性結合的聚合酶-啟動子復合物連接緊密,如果轉錄要延長需要聚合酶的前進,只有脫離結合的啟動子才可以。聚合酶離開結合的啟動子以延伸轉錄產物的過程就叫啟動子清除。
基因捕獲技術的概念
基因捕獲技術是最具應用前景的基因克隆方法之一。利用該技術建立的隨機插入突變的突變體文庫,可用于尋找、鑒定和研究大量未知功能和已知功能的活化基因,它是繼自然突變、物理突變和化學突變之后發展起來的新的分子生物學方法。基因捕獲載體是帶有報告基因和/或選擇標記基因的不完整的基因表達載體;這些載體所帶的基因只
雄蛾捕獲量的概念
中文名稱雄蛾捕獲量英文名稱catches of male moths定 義誘捕器捕獲雄蛾的數量。應用學科生態學(一級學科),化學生態學(二級學科)
克隆啟動子的方法
隨著基因工程的發展,常常需要構建一種能高水平表達異源蛋白質的表達載體。啟動子對外源基因的表達水平影響很大,是基因工程表達載體的重要元件。因此研究啟動子的克隆方法,對研究基因表達調控和構建表達載體至關重要。迄今為止,國外尚未見到有關啟動子克隆方法的綜述性報道,國內僅孫曉紅等曾就啟動子的結構、分類、克隆
克隆啟動子的方法
隨著基因工程的發展,常常需要構建一種能高水平表達異源蛋白質的表達載體。啟動子對外源基因的表達水平影響很大,是基因工程表達載體的重要元件。因此研究啟動子的克隆方法,對研究基因表達調控和構建表達載體至關重要。迄今為止,國外尚未見到有關啟動子克隆方法的綜述性報道,國內僅孫曉紅等曾就啟動子的結構、分類、克隆
加帽的概念和方法
加帽是在催化劑N-甲基咪唑(NMI)的催化下,通過脫水乙酸酐對5’羥基的乙酰化完成。當合成完成時,寡核苷酸通過琥珀酸酯仍連于固相載體上,堿基的環外基團仍攜有保護基團。
基因捕獲的方法原理
基因捕獲的方法酷似以報告基因為誘餌來捕獲基因。其基本過程是將一含報告基因的DNA 載體隨機插入基因組,從而產生內源基因失活突變,并通過報告基因的表達激活提示插入突變的存在,及突變內源基因表達特點。通過篩選得到的插入突變的ES 細胞克隆經囊胚注射轉化為基因突變動物模型,進而分析表型來研究突變基因功能。
脫核的概念和方法
又稱脫核。是指人工將核從細胞中除去。(1)利用離心力使海膽卵的核或變形蟲的核靠向一邊,然后把細胞從中心部切成兩段,再用微量吸管將核吸出;(2)用紫外線或射線照射核的部位,把核殺死;(3)對于傘藻(Acet-alularia)那種的大形細胞,因核位于細胞的一端,所以可把核所在的那一端的細胞部分切去。去
外植的概念和方法
中文名稱外植英文名稱explantation定 義把活組織從原生長處移植到體內其他部位或體外進行培養的方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞培養與細胞工程(二級學科)
細胞治療的概念和方法
細胞治療是指給機體輸入細胞制劑,以激活或增強機體的特異性免疫應答。(1)細胞疫苗?包括腫瘤細胞疫苗(如滅活瘤苗、異構瘤苗等)、基因修飾的瘤苗和樹突狀細胞疫苗等。(2)干細胞移植?干細胞具有自我更新能力和多種分化潛能,在適當條件下可被誘導分化為多種細胞組織,如臍帶血、外周血、骨髓等。(3)過繼免疫細胞
啟動子的特性和功能介紹
啟動子是RNA?聚合酶識別、結合和開始轉錄的一段DNA?序列,它含有RNA 聚合酶特異性結合和轉錄起始所需的保守序列,多數位于結構基因轉錄起始點的上游,啟動子本身不被轉錄。但有一些啟動子(如tRNA啟動子)位于轉錄起始點的下游,這些DNA序列可以被轉錄。啟動子的特性最初是通過能增加或降低基因轉錄速率
捕獲包被法檢測抗體和捕獲包被法檢測抗體
?? 捕獲包被法(亦稱反向間接法)ELISA,首要用于血清中某種抗體亞型成分(如IgM)的測定。以目前常用的IgM測定為例,因血清中針對某種抗原的特異性IgM和IgG同時存在,則后者可攪擾IgM的測定。因此先將一切血清IgM(包括異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再測定特異性I
微萃取方法的概念和應用
微萃取是另一種形式的液 - 液萃取技術,采用0.001-0.01范圍的相比率值(V)進行萃取過程。與傳統的液 - 液萃取相比,它采用小體積有機溶劑。微萃取提供的回收率較差,但是在有機相中的欲測物質的濃縮大大地增高。此外,使用的溶劑量也大大地減少。在容量瓶中進行萃取,可以選擇比水密度低的有機溶劑,結果
末端分析的概念和產業方法
中文名稱末端分析英文名稱terminal analysis定 義常指蛋白質肽鏈兩端氨基酸的分析。對于N端分析有三種方法:桑格-庫森法、丹璜酰法和埃德曼降解法,后者可連續測入,并可自動化操作;對于C端分析,主要用外肽酶,如一些羧肽酶,將肽鏈的羧基末端氨基酸切下分析。應用學科生物化學與分子生物學(一級
合成化學的概念和方法
合成化學是化學的一個重要分支,主要研究如何通過化學反應和方法,將簡單的起始原料轉化為具有特定結構和性能的復雜化合物。合成化學的重要性體現在多個方面:創造新物質:為人類提供了各種各樣的新材料,如藥物、高分子材料、催化劑等,推動了科技進步和社會發展。解決實際問題:例如合成新型藥物來治療疾病,研發高性能材
儀器分析方法的概念和種類
儀器分析方法:以物質的物理和物理化學性質為基礎的分析方法稱物理和物理化學分析法。這類方法都需要較特殊的儀器,通常稱為儀器分析方法。最主要的儀器分析方法有以下幾種:1、光學分析法根據物質的光學性質所建立的分析方法。主要包括:分子光譜法、分光分析法、分子熒光及磷光分析法;原子光譜法,如原子發射光譜法、原
分子標記的概念和方法特點
分子標記(Molecular Genetic Markers)是以個體間遺傳物質內核苷酸序列變異為基礎的遺傳標記,是 DNA 水平遺傳多態性的直接的反映。與其他幾種遺傳標記——形態標記、同工酶標記、細胞標記相比,DNA 分子標記具有的優越性有:大多數分子標記為共顯性,對隱性的農藝性狀的選擇十分便利;
翻滾啟動子的功能和應用特點
中文名稱翻滾啟動子英文名稱flip-flop promoter定 義可顛倒的啟動子。最早見于沙門氏菌的兩種鞭毛蛋白基因的交替表達。這些基因都受一個可以顛倒的DNA片段控制,在一個順式作用因子的調節下,這個片段從不同的方向驅動不同基因的表達,后來發現奇異變形桿菌的氯霉素抗性基因和珠蛋白基因等基因的表
信使RNA的啟動子和轉錄因子
一定義:酶識別、結合、開始轉錄的一段DNA序列。強啟動子2秒鐘啟動一次轉錄,弱啟動子10分鐘一次。 二原核生物:大腸桿菌在起點上游約-10堿基對處有保守序列TATAAT,稱為pribnow box,有助于局部解鏈。在其上游還有TTGACA,稱為-35序列,提供RNA聚合酶識別的信號。 三真核
增強子捕獲的方法特點
中文名稱增強子捕獲英文名稱enhancer trapping定 義用于確定DNA序列中是否包含增強子功能的一項技術。用做檢測的載體含有啟動子和報道基因可作表達的標記,但缺乏增強子,將擬檢測的DNA序列克隆入這種載體的適當位置,導入細胞或個體,從報道基因表達的程度可分析出增強子的存在與否及其強弱。應
細胞培養概念和方法
細胞培養(英語:cell culture)是一種現代生物學技術,是將真核生物或原核生物細胞培養在受控制的狀態下,使其生長。這項技術的發展與方法,與組織培養或器官培養關系密切。細胞培養的例行步驟包括解凍細胞、換盤、分盤、換細胞培養液、結凍細胞等步驟。細胞培養分為兩大類:貼壁培養(adherent cu
檢驗儀器的基礎概念和維護方法
??? 檢驗技術在人類生產生活中有著廣泛的應用,是各行各業進行檢測、診斷的重要工具。現代化檢驗儀器的誕生和使用,更是大大提高了工作效率,保證了檢驗質量。不過,人們的日常使用和保養影響著檢驗儀器的度和壽命,因此使用者需要掌握檢驗儀器相關的基礎知識,并了解一些保養維護方面的知識。? 檢驗儀器的基礎概念
非組蛋白的概念和檢測方法
非組蛋白主要是指與特異DNA序列相結合的蛋白質,所以又稱序列特異性DNA結合蛋白(sequence specific DNA binding protein)。利用凝膠延滯實驗(gel retardation assay),可以在細胞抽提物中進行檢測。首先制備一段帶有放射性標記的已知特異序列的DNA
免疫的概念和種類及獲得方法
免疫(Immunity), 所謂“免疫”,顧名思義即免除瘟疫(古代的瘟疫指各種疫病)。免疫是指機體免疫系統識別自身與異己物質,并通過免疫應答排除抗原性異物,以維持機體生理平衡的功能。1、天然免疫:個體與生俱有,一般為非特異性免疫,如吞噬細胞的作用。2、獲得性免疫1)自動獲得性免疫:一般免疫時間長。可
酶免疫測定的概念和方法
酶免疫測定(enzyme immunoassay,EIA),是將酶催化作用的高效性與抗原抗體反應的特異性相結合的一種微量分析技術。酶標記抗原抗體后形成的酶標記物,既保留抗原或抗體的免疫活性,又保留酶的催化活性。當酶標記物與待測樣品中相應的抗原或抗體相互作用時,可形成酶標記抗原抗體復合物。利用復合物上
反乳化作用的概念和方法
乳狀液的分散相小液珠聚集成團,形成大液滴,最終使油水兩相分層析出的過程。破乳方法可分為物理機械法和物理化學法。物理機械法有電沉降、過濾、超聲等;物理化學法主要是改變乳液的界面性質而破乳,如加入破乳劑。