RNAi具有的特征
①RNAi是轉錄后水平的基因沉默機制;②RNAi具有很高的特異性,只降解與之序列相應的單個內源基因的mRNA;③RNAi抑制基因表達具有很高的效率,表型可以達到缺失突變體表型的程度,而且相對很少量的dsRNA分子(數量遠遠少于內源mRNA的數量)就能完全抑制相應基因的表達,是以催化放大的方式進行的;④RNAi抑制基因表達的效應可以穿過細胞界限,在不同細胞間長距離傳遞和維持信號甚至傳播至整個有機體以及可遺傳等特點;⑤dsRNA不得短于21個堿基,并且長鏈dsRNA也在細胞內被Dicer酶切割為21 bp左右的siRNA,并由siRNA來介導mRNA切割。而且大于30 bp的dsRNA不能在哺乳動物中誘導特異的RNA干擾,而是細胞非特異性和全面的基因表達受抑和凋亡;⑥ATP依賴性:在去除ATP的樣品中RNA干擾現象降低或消失顯示RNA干擾是一個ATP依賴的過程。可能是Dicer和RISC的酶切反應必須由ATP提供能量。......閱讀全文
RNAi基因沉默方法
大約在十年前,2006年諾貝爾生理/醫學獎得主CraigMello和AndrewFire發現,他們能夠將短RNA 分子插入到線蟲中并沉默特定基因的表達。今天,研究人員也常常使用這種強大的RNA 干擾方法來研究哺乳動物系統中的特定基因功能。為了進行這種基因沉默實驗,研究人員通常需要依賴化學合成的RNA
RNAi表達載體構建
近年來的研究表明,一些短片斷的雙鏈RNA可以通過促使特定基因的mRNA降解來高效、特異的阻斷體內特定基因表達,誘使細胞表現出特定基因缺失的表型, 稱為RNA干擾(RNA interference,RNAi).siRNA(small interfering RNAs)就是這種短片斷雙鏈RNA分子,能夠
RNAi放大效應機制
由于在一些生物中RNAi的影響格外顯著,有人提出在RNAi 途徑中可能存在某個(信號)擴增的步驟。這種擴增可能是復制外源注入的dsRNA從而產生更多的siRNA ,也可能是直接擴增siRNA本身。這種擴增可能在RNA誘導沉默復合物(RISC)形成過程進行,作為RISC形成的補充,或者獨立于R
BLOCKiT-RNAi-Designer
Allows you to design synthetic siRNA, Stealth RNA, or shRNA molecules from nucleotide target sequences, or convert an siRNA molecule sequence into a S
RNAi原理圖解
The Mechanism of RNA Interference (RNAi)Long double-stranded RNAs (dsRNAs; typically >200 nt) can be used to silence the expression of target genes in
汽車檢具如何保養
隨著汽車檢具設計、精度的不斷提高。很多的汽車檢具都需要做更充分的保養來延長其使用壽命。下面,介紹一下汽車檢具保養的基本步驟與方法: 1.保證汽車檢具本身環境因素的干燥:存放溫度保證在零下10攝氏度到60攝氏度之間;濕度一定要在60%以下;微粒不能超過2%。 2.汽車檢具基本維護:保
光具座,支架,配件
光具座,支架,配件?OPM-SMAOPM-SMA是一個用于固定74系列準直透鏡和SMA905接頭光纖的裝置。OPM-SMA包括了外徑為1.5英寸的盤面,3/8-24螺紋可以用于透鏡和SMA 905接頭光纖的適配器。包含的一種特制適配器,可以固定SMA 905接頭的光纖,使其跟OPM-SMA的
具支試管的外形
具支試管是一種實驗室玻璃器皿,是在普通的試管的基礎上安一個支管,一個密封的具支試管相當于一個有單孔塞的普通試管。 實驗室常用氣體通過多個具支試管與液體同時反應,可以清楚地看到液體與氣體發生的化學變化,從而判定氣體的化學性質。
具支試管的作用
具支試管 具支試管 1.一個密封的具支試管相當于一個有單孔塞的試管。 2.洗氣。 3.組裝簡易的啟普發生器。 使用注意事項 (1)裝溶液時不超過試管容量的1/2,加熱時不超過試管容量的1/3。 (2)用滴管往試管內滴加液體時應懸空滴加,不得伸入試管口。 (3)取塊狀固體要用鑷子夾
為什么每個人的血液顏色不同,有的深而有的淺
血液對于人體而言就像黃金一樣,雖然它只占你身體重量的很小一部分,但卻發揮著物質傳遞和保持身體正常運轉的重要作用。而你在醫院里抽血的時候,可能會發現兩次抽血的血液顏色會有所不同,它們有時候顏色偏深紅,但有時候顏色偏淺紅。這是為什么呢?下面就讓我來為大家講一下其中的緣由。一、身體不同部位的血液顏色有很大
RNAi:制備siRNAs的方法
越來越多的研究人員開始采用小分子干擾RNA(small interfering RNAs,siRNAs)來抑制特定的哺乳動物基因表達。siRNA是一種短片斷雙鏈RNA分子,能夠以同源互補序列的mRNA為靶目標降解特定的mRNA,這個過程就是RNA干擾途徑(RNA interference p
Cell頭條:內源RNAi信號
來自加拿大麥吉爾大學的Mathieu Flamand 和Thomas F. Duchaine在7月20日《細胞》(Cell)雜志上發表了一篇題為“SnapShot: Endogenous RNAi Pathways”的文章。文章以概略圖加上主題內容簡介并推薦了10篇文獻,簡明扼要地概述了
-默沙東退出RNAi研究領域
盡管最近羅氏公司、賽諾菲兩個制藥巨頭宣布重返RNAi療法研究領域,默沙東公司卻做出相反的決定,宣布撤出這一研究領域。公司最近宣布將相關的 Sirna公司以1億7千5百萬美元的價格出售給Alnylam公司。這也是默沙東公司宣布進行研發部門重組后的又一個大動作。??????? 公司于2006年以
RNAi技術的應用特點
由于使用RNAi技術可以特異性剔除或關閉特定基因的表達,(長度超過三十的dsRNA會引起干擾素毒性)所以該技術已被廣泛用于探索基因功能和傳染性疾病及惡性腫瘤的治療領域。
RNAi實驗原理與方法
RNAi實驗原理與方法近年來的研究表明,將與mRNA對應的正義RNA和反義RNA組成的雙鏈RNA(dsRNA)導入細胞,可以使mRNA發生特異性的降解,導致其相應的基因沉默。這種轉錄后基因沉默機制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被稱為RNA干擾(
RNAi有哪些高效性
RNAi的高效性:dsRNA在Dicer作用下形成siRNA,siRNA解鏈與RISC形成復合物,這些RISC可專一性地與靶向的mRNA特異性結合。siRNA也有可能不與RISC結合,而是通過解鏈直接靶向結合mRNA。根據RISC結合位點或單鏈siRNA結合位點在RdRP作用下可形成新的dsRNA,
RNAi表達載體構建(二)
(2)、序列同源性分析:?將潛在的序列和相應的基因組數據庫(人,或者小鼠,大鼠等等)進行比較,排除那些和其他編碼序列/EST同源的序列.例如使用BLAST( www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/)選出合適的目標序列進行合成.并非所有符合條件的siRNA都一樣有效,其原因還不清楚
RNAi的機理與應用
RNAi 技術的機理與應用 關于 RNAi 技術 RNA 干擾(RNA interference,RNAi)是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈 RNA( double-stranded RNA,dsRNA) 誘發的、同源 mRNA 高效特異性降解的現象。 RNAi 受到追捧的
RNAi片段siRNA設計原則
RNAi target selection rules:Targeted regions on the cDNA sequence of a targeted gene should be located 50-100 nt downstream of the start codon (ATG).S
RNAi表達載體構建(一)
近年來的研究表明,一些短片斷的雙鏈RNA可以通過促使特定基因的mRNA降解來高效、特異的阻斷體內特定基因表達,誘使細胞表現出特定基因缺失的表型, 稱為RNA干擾(RNA interference,RNAi).siRNA(small interfering RNAs)就是這種短片斷雙鏈RNA分
RNAi的生物特性介紹
1、RNAi抑制轉座子活性兩方面的證據提示轉座子活性的抑制與siRNA有關 ① 發現蠕蟲mut-7 基因參與RNAi 并且與轉座子的轉座抑制有關; ② 在果蠅中,參與RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突變將導致該基因引起的基因沉默的缺失,同時提高了反轉錄轉座子活性。 2、R
RNAi引起的基因敲除
RNAi引起的基因敲除:由于少量的雙鏈RNA就能阻斷基因的表達,并且這種效應可以傳遞到子代細胞中,所以RNAi的反應過程也可以用于基因敲除。
RNAi實驗原理與方法
實驗概要進行RNAi實驗實驗原理通過生化和遺傳學研究表明,RNA干擾包括起始階段和效應階段(inititation ?and effector steps)。在起始階段,加入的小分子RNA被切割為21-23核苷酸長的小分子干擾RNA片段(small ?interfering RNAs, siRNAs
RNAi的發現和起源
首次發現dsRNA能夠導致基因沉默的線索來源于線蟲Caenorhabditis elegans的研究。>1995年,康乃爾大學的Su Guo博士和>Kemphues在試圖阻斷秀麗新小桿線蟲(C. ?elegans)中的par-1基因時,發現了一個意想不到的現象。她們本是利用反義RNA技術特異性地阻斷
RNAi及基因沉默原理
RNA 干擾(RNAinterference,RNAi)是由雙鏈RNA (double-strandedRNA,dsRNA) 引發的轉錄后基因靜默機制。其原理是:RNaseIII 核酶家族的Dicer,與雙鏈RNA 結合,將其剪切成21 - 25nt 及3'端突出的小干擾RNA (small
RNAi:制備siRNAs的方法
??越來越多的研究人員開始采用小分子干擾RNA(small interfering RNAs,siRNAs)來抑制特定的哺乳動物基因表達。siRNA是一種短片斷雙鏈RNA分子,能夠以同源互補序列的mRNA為靶目標降解特定的mRNA,這個過程就是RNA干擾途徑(RNA interference pat
為什么有的電容充電快,而有的電容充電相對慢一點
電容充電快慢與電路的時間常數有關。時間常數一般用希臘字母“τ”來表示,τ=RC,??R是充電電阻,C是充電電容,R和C越大,充電越慢,R和C越小,充電越快。τ在電路中反映電路中響應變化的快慢,時間常數越小,則電路響應變化越快,反之則越慢。 時間常數表示過渡反應的時間過程的常數。指該物理量從最大值衰減
韓國召回鎳超標鍋具
6月26日,韓國食品藥品安全處(MFDS)發表消息稱:株式會社EUGENETOSCO(位于仁川市南洞區)生產銷售的食品用器具類“火鍋(小號)”產品中檢出鎳超標,命令其停止銷售并召回該產品。 該產品中檢出鎳1.4mg/L,在韓國,該類產品中的標準為0.1mg/L以下。 召回對象:2016年6月
所有的菌都能保存嗎
菌種保存的原理是預防或減緩DNA 復制時自發突變導致菌種退化,因此要創造代謝不活潑的狀態,而菌種保存時使菌種進入休眠態(孢子、芽孢),并創造干燥、低溫、缺氧、缺營養的環境,創造的環境越接近此狀態,所保存的菌種的時間就越長,所以從原理上講,所有菌種都可用這種方法保存, 但需要注意的是,苛刻菌(如流感
電動法蘭閘閥具有的優點
電動法蘭閘閥動作力距大,電動閥門開關動作速度可以調整,結構簡單,易維護,動作過程中因氣體本身的緩沖特性,不易因卡住而損壞,電動法蘭閘閥響應靈敏,安全可靠,很多對控制要求高的廠專為氣動儀表控制元件設置壓縮空氣站。電動的就是要電,并能控制其流量的裝置。 電動法蘭閘閥具有以下優點: 一、閥