BioTechniques：無細胞表達究竟哪家強？
無細胞表達系統讓研究人員能夠快速生成蛋白質，從而受到人們的青睞。來自真核細胞的裂解物能夠對蛋白質進行翻譯后修飾，但不同翻譯系統的細微差別也會導致蛋白生產的變化。無細胞表達究竟哪家強？亞利桑那州立大學的研究人員近日在《BioTechniques》上發表了他們的比較結果。 在目前的無細胞蛋白合成而言，大腸桿菌仍然是首選。不過，由于對人類和哺乳動物蛋白及其翻譯后修飾的興趣日益增加，真核系統也逐漸受到人們的歡迎。此外，對于某些技術，如mRNA展示和核酸可編程的蛋白芯片（NAPPA），研究人員傾向于使用真核表達系統來研究蛋白質互作。 在這項研究中，研究人員比較了市場上三種常用的真核無細胞表達系統：麥胚提取物（WGE，Promega）、兔網織紅細胞裂解物（RRL，Promega）和HeLa細胞裂解物（HCL、賽默飛世爾）。 對于每個系統，研究人員定量了環狀質粒和線性DNA所產生的螢光素酶蛋白的量。這些DNA模板的5’非翻譯區（UT......閱讀全文
研究揭示SAMHD1蛋白重要細胞學新功能
來自吉林大學第一醫院的聲音：讓我們再一次領先于世界! 吉林大學白求恩第一醫院艾滋病與病毒研究所再次傳來喜訊：該團隊在世界上首次證明人SAMHD1蛋白具有調控內源逆轉錄轉座子活性的能力，成功揭示了SAMHD1蛋白在人體內的一大重要細胞學功能。這一重大發現已于九月十二日以在線發表的形式刊登在世
Cell－Biolabs細胞研究、細胞信號通路和蛋白質生物學簡介
核心專業領域：1.細胞分析??????特色CytoSelect?細胞分析試劑可用于血管生成、自噬、細胞粘附、細胞遷移、細胞轉化、細胞活性、細胞吞噬等研究，無需人工進行細胞計數，分析方案操作簡易，快速產生結果。此外，還有腫瘤細胞分離和敏感性分析產品。?2.氧化應激分析??????抗氧化劑分析、脂質過氧
通過凝膠電泳測定λ噬菌體原種和裂解物中DNA
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本方案闡述了一種快速估計 λ 噬菌體原種中 DNA 含量的方法。該方法首先可用于發現原種和裂解物中的噬菌體顆粒的得率是否能滿足大量純化的需要，其次可用于檢測純化過程，以找到出問題步驟。
技術和方案18－染色質免疫沉淀
試劑、試劑盒甲醛甘氨酸TBS蛋白酶抑制劑裂解緩沖液免疫共沉淀洗脫液TESTE儀器、耗材超聲波粉碎儀實驗步驟1.培養要分析的細胞。每一個樣品，需要在三角瓶中培養 50~100ml 細胞至 OD600 大約為 1。2.甲醛處理細胞交聯蛋白質和 DNA。加甲醛到細胞中至終濃度為 1%(37% 的甲醛按 1
用于激酶分析的細胞裂解實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 培養
用于激酶分析的細胞裂解實驗
實驗方法原理 實驗材料 培養細胞（貼壁貼壁細胞在100 mm 組織培養板中約 70% 生長成片／懸浮細胞濃度 為 10^6 細胞／ml）試劑、試劑盒 PBS裂解緩沖液蛋白酶抑制劑儲存液儀器、耗材 微量離心機實驗步驟 1. 用預冷的 PBS 洗細胞 2 次，將最后的洗液盡可能吸盡。2. 加入 0.
用于激酶分析的細胞裂解實驗
實驗材料培養細胞（貼壁貼壁細胞在100 mm 組織培養板中約 70% 生長成片／懸浮細胞濃度 為 10^6 細胞／ml）試劑、試劑盒PBS裂解緩沖液蛋白酶抑制劑儲存液儀器、耗材微量離心機實驗步驟1. 用預冷的 PBS 洗細胞 2 次，將最后的洗液盡可能吸盡。2. 加入 0.75 ml 裂解緩沖液重懸
哺乳動物細胞抽提物中熒光素酶的測定實驗
實驗材料 用感興趣的 DNA 轉染的哺乳動物培養細胞試劑、試劑盒 細胞裂解緩沖液熒光素酶測定緩沖液熒光素溶液不含鈣鹽和鎂鹽的磷酸鹽緩沖液儀器、耗材 熒光光度計和光度計測置管橡膠棒實驗步驟 材料緩沖液和溶液貯存液稀釋到適當濃度。細胞裂解緩沖液25 mmol/L 雙甘氨肽（pH7.8)15 mmol/L
哺乳動物細胞抽提物中熒光素酶的測定
單細胞凝膠電泳實驗可應用于： （1）快速檢測單細胞DNA損傷； (2)遺傳毒性生物監測; (3)確定精子細胞中DNA片段化的程度。實驗方法原理螢光素酶是理想的報告基因，因為哺乳動物細胞中不含內源性螢光素酶，一旦轉錄完成立刻就生成功能性的螢光素酶，同時在所有的化學發光反應中，它的光產物具有最高的量子效
哺乳動物細胞抽提物中熒光素酶的測定
哺乳動物細胞抽提物中熒光素酶的測定實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 螢光素酶是理想的報告基因，因為哺乳動物細胞中不含內源性螢光素酶，一旦轉錄完成立刻就生成功能性的螢光素酶，
王紅陽院士研究發現關鍵蛋白影響肝癌細胞轉移
肝癌是一種預后很差的常見癌癥，我國是肝癌高發國家，每年約有11萬人死于這種疾病。肝細胞癌（HCC）是原發性肝癌的主要類型，也是惡性程度最高的腫瘤之一，其最顯著的特點是發生轉移和形成門靜脈癌栓（PVTT）。 第二軍醫大學、河南科技大學等機構的科學家們對HCC進行了深入研究。他們發現，蛋白Merl
百人博士兩篇文章：如何研究細胞關鍵蛋白
來自中科院上海生科院生化與細胞所的研究人員利用多種細胞蛋白分析手段發現了兩種關鍵細胞蛋白的作用機理，這兩種蛋白分別是C末端Src激酶(C-terminal Src kinase，Csk)和細胞極性封閉蛋白Occludin。研究論文分別發表在《Proteomic》和《Developmental C
英國研究發現蛋白質“開關”可切斷癌細胞供血
英國一項最新研究發現，通過調控一種信號蛋白，可阻止前列腺癌癌變組織周圍的新血管形成，從而切斷癌細胞的營養供給通路，抑制腫瘤生長及癌變擴散。 英國諾丁漢大學、布里斯托爾大學等機構的研究人員在10日出版的《致癌基因》雜志上報告說，他們對血管內皮生長因子進行了研究，這是一種信號蛋白，能以兩種形式存在
研究顯示一種蛋白可用來簡單鑒別干細胞
???? 美國研究人員發現，一種特定蛋白也許可用來區分干細胞和干細胞分化的細胞，從而使從各種組織中分離干細胞變得簡單。?? ?????? 干細胞能分化成其他細胞，但并非一蹴而就，而是分多個階段完成并在這個過程中逐漸失去干細胞的特性。干細胞第一階段分化的是祖細胞。美國約翰斯·霍普金斯大學的尼古拉斯
《癌癥細胞》－易慶等－骨髓瘤C反應蛋白研究
來自美國德克薩斯大學安德森癌癥中心和復旦大學生科院遺傳工程國家重點實驗室的研究人員發現了骨髓瘤中CRP（C-反應蛋白）可以促進腫瘤細胞的生長和存活，從而證明CRP可以作為一種潛在的癌癥治療靶標，這一研究成果公布在癌癥研究權威雜志《癌癥細胞》（Cancer Cell）（Cell雜志出版社出版的10種期
JBC：脫氧血紅蛋白研究助力紅細胞疾病治療
近日，刊登在國際雜志Journal of Biological Chemistry上的一篇研究論文中，來自維克森林大學（Wake Forest）的研究人員通過研究揭示，脫氧血紅蛋白的確可以誘發亞硝酸鹽轉化為一氧化氮，該過程往往會影響血流和機體的凝血。 研究者Kim-Shapiro說道，紅細胞中
定量質譜研究食管癌細胞異常蛋白表達和修飾
定量蛋白質組學技術已成為當前大規模蛋白質鑒定的重要手段。本研究以高侵襲性的食管癌細胞SHEEC和食管上皮細胞SHEE為目標，分別采用輕、重穩定同位素進行細胞蛋白氨基酸標記（SILAC），通過多維液相色譜分離結合高分辨質譜，鑒定了兩種細胞蛋白質組。共鑒定了7000多個蛋白質，并對其中3000多個蛋白質
最新研究：線粒體蛋白OPA1可以促進脂肪細胞褐變
在哺乳動物中，白色脂肪組織儲存能量，而棕色脂肪組織通過解偶聯蛋白1介導的產熱作用將能量轉化為熱量。意大利帕多瓦大學的研究團隊發現，線粒體內膜中視神經萎縮癥蛋白1（OPA1）可促進脂肪細胞自主褐變，這種促進作用是通過影響尿素循環產生的。該研究成果于近日發表在《Nature Metabolism》上
生化與細胞所研究發現TDP43蛋白積聚的機制
3月30日，美國The FASEB Journal在線發表了中科院上海生命科學研究院生化與細胞所胡紅雨課題組的研究論文。該論文闡明了TDP-43蛋白的降解片段TDP-35是其在細胞質內形成包涵體的主要原因，并且包涵體的形成引起該蛋白質參與RNA加工功能的改變。 肌萎縮側索硬化癥(Amy
制備DNA測序模板實驗——小量裂解物中制備λ噬菌體DNA
實驗材料重組λ噬菌體試劑、試劑盒DNA酶ⅠRNA酶ⅠPEGSMSDSEDTA異丙醇乙酸鈉TE儀器、耗材巴斯德吸管試管離心機實驗步驟1. ?在新鮮配制的λ頂層瓊脂糖和λ瓊脂糖平板上，通過在平板上裂解適于λ噬菌體生長的大腸桿菌菌株，制備重組λ噬菌體毒種原液。2. ?取700 μl 毒種液加入無菌的1.5
細菌內毒素檢測
實驗方法原理 鱟是一種海洋節肢動物，血液中含有一種變形細胞，此細胞的裂解物可與微量細菌內毒素起凝膠反應，即細胞裂解物中的一種酶被內毒素激活，使細胞裂解物中蛋白質形成凝膠。鱟試驗具有快速、簡便、靈敏等優點。實驗材料?鱟試劑試劑、試劑盒?生理鹽水無菌水內毒素儀器、耗材?安瓶習慣水浴箱實驗步驟 一、材料?
細菌內毒素檢測實驗_鱟試驗法
實驗方法原理鱟是一種海洋節肢動物，血液中含有一種變形細胞，此細胞的裂解物可與微量細菌內毒素起凝膠反應，即細胞裂解物中的一種酶被內毒素激活，使細胞裂解物中蛋白質形成凝膠。鱟試驗具有快速、簡便、靈敏等優點。??實驗材料鱟試劑試劑、試劑盒生理鹽水無菌水內毒素儀器、耗材安瓶習慣水浴箱實驗步驟一、材料?1.
4.5－體外轉錄與體外翻譯耦聯的快速反應系統
TNT 耦聯網織紅細胞裂解物系統乂可以分為：TNTT7 系統、TNTSP6 系統和 TN 下 PCR 系統。其屮，TNTT7 系統可以從線狀和環狀 DNA 中翻譯蛋白質，SP6 系統只能使用環狀 DNA 進行翻譯，而 PCR 模板可使用 TNTPCR 系統迸行翻譯實驗材料質粒 DNA 模板試劑、試劑
透化細胞和退化細胞器中測定比活性實驗1
從標記的細胞或者細胞裂解物中提取ATP實驗步驟1.從標記細胞提取ATP1)? 備下列材料：本實驗用到的所有溶液必須用Mlli - Q純化的水或它的等價物配制。冰冷的4%高氣酺（v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m乙烷32p標記的細胞帶螺帽的聚丙烯離心管測量范圍PH4~8的PH試紙小心：高氣酸■
細胞凋亡研究
前言:細胞凋亡是細胞程序性死亡中最具特征性的一種。它在生物發展，體內平衡，甚至在不同的疾病，例如：癌癥，的發病機制都扮演著重要的角色。在過去的幾十年里，科學家們對細胞凋亡進行了廣泛的研究。細胞凋亡的過程中，細胞會有不同的形態變化。同時，細胞膜(plasma membrane)，線粒體(mitocho
血糖研究熱門靶標：糖化白蛋白研究
白蛋白是一類球蛋白，最常見的是血清白蛋白。白蛋白家族的所有蛋白質都是水溶性的，在濃鹽溶液中有一定的溶解性。白蛋白通常存在于血漿中，與其他血液蛋白的不同之處在于它們沒有糖基化。含有白蛋白的物質，如蛋清，稱為類白蛋白。許多血液轉運蛋白是進化相關的，包括血清白蛋白，甲胎蛋白，維生素D結合蛋白等。糖化白蛋白
體外轉錄與體外翻譯耦聯的快速反應系統
實驗材料 質粒 DNA 模板試劑、試劑盒 無核酸酶污染的水 [35S] 標記的甲硫氧酸 TNT 快速超級混合液 T7TNTPCR 增強液儀器、耗材 一 70°C 冰箱 冰浴 微量移液器 離心機 水浴槽 聚丙烯酰胺凝膠電泳裝置實驗步驟 ―、材料與設備1) 無核酸酶污染的水。2)[35S] 標記的甲硫氧
體外轉錄與體外翻譯耦聯的快速反應系統
? ? ? ? ? ? 實驗材料 質粒 DNA 模板 試劑、試劑盒 無核酸酶污染的水 [35S] 標記的甲硫氧酸 TN
研究揭示了由人巨細胞病毒所表達的蛋白質
新的發現揭示了人類巨細胞病毒或HCMV的令人意外的、復雜的蛋白編碼能力，且該發現是人們了解該病毒如何在感染中操縱人類細胞所邁出的第一步。HCMV的基因組是在20多年前首次被測序的，但研究人員如今還對這種常見病原體的蛋白質組――即一整套表達蛋白――進行了研究。人們已知HCMV是一種獲得了驚人成功的
成都生物所在沼液生產單細胞蛋白飼料研究中獲進展
厭氧消化是有機廢棄物資源化利用的重要技術，而含有高濃度氨氮的沼液處理是沼氣和生物天然氣產業發展的難題。沼液利用和處理方式有作為肥料還田利用和當作廢水達標處理排放。沼液中的氨氮來自于有機廢棄物中的蛋白氮，蛋白氮來自于種植階段使用的肥料氮，而肥料氮是合成氨廠花費大量天然氣能源將空氣中的氮氣轉化得到的