生物素化寡聚脫氧胸苷鏈親和素磁珠純化帶Poly(A)+RNA
用磁性微球代轉纖維索作為介質,這種方法比較常用且已商品化。試劑、試劑盒GTC 抽提緩沖液稀釋緩沖液 β-巰基乙醇無 RNase 水20XSSC0.5XSSC1XPBS。儀器、耗材親和素-磁珠 (SA-PMP)生物素標記的 oligo(dT) 探針磁架75℃ 水浴50 ml 無菌 Corex 離心管15 ml 螺旋蓋錐形離心管TissuemizerDM 或其他同類勻漿器BeckmanJ2-21 離心機或其他類似設備實驗步驟一 材料與設備1) 親和素-磁珠 (SA-PMP)2)GTC 抽提緩沖液:4moL/I, 異硫氰酸胍,25 mmol/L 檸檬酸鈉,pH:7.13) 生物素標記的 oligo(dT) 探針(50pmol/ul)4) 稀釋緩沖液:6XSSC,lmmol/L Tris-HCl,PH 7.4,10 mmoL/L EDTA,0.25% SDS5)β-巰基乙醇 (48.7%)6) 無 RNase 水7)20XSSC:67.......閱讀全文
生物素化寡聚脫氧胸苷鏈親和素磁珠純化帶-Poly(A)+RNA
試劑、試劑盒 GTC 抽提緩沖液 稀釋緩沖液 β-巰基乙醇 無 RNase 水 20XSSC 0.5XSSC 1XPBS。儀器、耗材 親和素-磁珠 (SA-PMP)生物素標記的 oligo(dT) 探針 磁架 75℃ 水浴50 ml 無菌 Corex 離心管 15 ml 螺旋蓋錐形離心管 Tissu
生物素化寡聚脫氧胸苷鏈親和素磁珠純化帶-Poly(A)+RNA
用磁性微球代轉纖維索作為介質,這種方法比較常用且已商品化。試劑、試劑盒GTC 抽提緩沖液稀釋緩沖液 β-巰基乙醇無 RNase 水20XSSC0.5XSSC1XPBS。儀器、耗材親和素-磁珠 (SA-PMP)生物素標記的 oligo(dT) 探針磁架75℃ 水浴50 ml 無菌 Corex 離心管1
生物素化寡聚脫氧胸苷鏈親和素磁珠純化帶-Poly(A)+RNA
生物素化寡聚脫氧胸苷-鏈親和素磁珠純化帶 Poly(A)+RNA ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 GTC 抽提緩沖液 ? 稀釋
寡聚脫氧胸苷纖維素純化帶-poly(-A)+RNA
試劑、試劑盒 NaOH.寡聚脫氧胸苷 (oligo(dT) ] 纖維素DEPC 處理的水1X 加樣緩沖液洗脫緩沖液 NaAc(pH5.2)乙醇 TE 緩沖液。。實驗步驟 一 材料與設備1 ) 5 mol/L NaOH2 ) 寡聚脫氧胸苷 (oligo(dT) ] 纖維素3) DEPC 處理的水4)
寡聚脫氧胸苷纖維素純化帶-poly(-A)+RNA
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 NaOH.寡聚脫氧胸苷 (oligo(dT) ] 纖維素 DEPC 處理的水 1X 加樣緩沖液 洗脫緩沖液 NaAc(pH5.2)
寡聚脫氧胸苷纖維素純化帶-poly(-A)+RNA
大多數哺乳動物的信使 RNA( mRNA) 都帶冇 poly( A)+ 尾 ,使用本方案可以將帶Poly ( A) +的 RNA 從總 RNA 中分離出來。試劑、試劑盒NaOH.寡聚脫氧胸苷 (oligo(dT) ] 纖維素DEPC 處理的水1X 加樣緩沖液洗脫緩沖液NaAc(pH5.2)乙醇TE
mRNA的提取及純化(磁珠法和親和柱層析法)
真核細胞的mRAN是單順反子,其最顯著的特征是具有5'端帽子結構和3'端的poly A的結構,此poly A結構為mRNA的提取提供了有效的途徑,人們利用堿基配對原理,采用寡聚T結構作為親和柱材料,當含mRNA的總RNA樣品流經寡聚T柱時,mRAN即被特異性的結合到柱上,從而可與
磁珠法提純mRNA
實驗概要真核細胞的mRAN是單順反子,其最顯著的特征是具有5'端帽子結構和3'端的poly A的結構,此poly A結構為mRNA的提取提供了有效的途徑,人們利用堿基配對原理,采用寡聚T結構作為親和柱材料,當含mRNA的總RNA樣品流經寡聚T柱時,mRAN即被特異性的結合到柱
親和層析--生物素/親和素純化
低耐壓:生物素瓊脂糖微球生物素瓊脂糖凝膠是用于純化或去除親和素或鏈霉親和素樣本的產品,生物素是通過間隔臂以多種共價結合的方式固定在基材上的,最大限度避免配基脫落。?這種結合非常緊密,可以應用于不可逆結合(如:從某個樣本中去除親和素組分)高耐壓:鏈霉親和素 HC 瓊脂糖微球?ABT Streptavi
怎樣從總RNA中提取mRNA
大多數真核細胞mRNA的3’端通常具有由20-30個腺苷酸組成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脫氧核糖核苷(OligoT)可以與之配對結合,這就是提取mRNA最基本的原理。具體到實驗手段上,現在磁珠法、纖維素柱層析法都有在用。磁珠法一般是用生物素標記OligoT,親和素標記磁珠(生物素和親和素間具有高
怎樣從總RNA中提取mRNA
大多數真核細胞mRNA的3’端通常具有由20-30個腺苷酸組成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脫氧核糖核苷(OligoT)可以與之配對結合,這就是提取mRNA最基本的原理。具體到實驗手段上,現在磁珠法、纖維素柱層析法都有在用。磁珠法一般是用生物素標記OligoT,親和素標記磁珠(生物素和親和素間具有高
鏈霉親和素磁珠(SA-magnetic-bead)性能比較研究
磁性聚合物微球兼具高分子微球特性和磁響應性,因此,廣泛應用于靶向給藥、生物診斷、催化劑制備、磁成像等領域。目前,大部分的生物分子是通過表面的氨基或者羧基與磁性微球表面的基團共價結合的方式直接固定化在磁性微球的表面。這種方法不僅復雜,還會使固定化的生物分子活性受到較大影響,例如抗體可能會失去與抗原的特
磁珠法分離純化DNA原理及其步驟
相關專題 磁珠法純化DNA主要是利用利息交換吸附材料吸附核酸,從而將核酸和蛋白質等其細胞中其他物質分離。本文主要概述了磁珠法純化DNA原理、核酸分離與純化的原則、核酸分離與純化的步驟。?磁珠法 純化DNA原理磁珠法核酸純化技術采用了納米級磁珠微珠,這種磁珠微珠的表面標記了一種官能團,能同核酸發生吸附
磁珠法分離純化DNA原理及其步驟
磁珠法純化DNA主要是利用利息交換吸附材料吸附核酸,從而將核酸和蛋白質等其細胞中其他物質分離。本文主要概述了磁珠法純化DNA原理、核酸分離與純化的原則、核酸分離與純化的步驟。磁珠法 純化DNA原理磁珠法核酸純化技術采用了納米級磁珠微珠,這種磁珠微珠的表面標記了一種官能團,能同核酸發生吸附反應。硅磁(
基于-AFLP-的轉錄表達譜分析(一)
實驗方法原理 實驗材料 Total RNA試劑、試劑盒 鏈霉親和素包被的磁珠洗滌緩沖液EDTA第一鏈緩沖液第二鏈緩沖液DTT4 dNTP 的混合物SuperScript II RNase HSTEXTris· ClRL緩沖液ATP PCR 緩沖液T4 多核苷酸激酶緩沖液加樣染料硅烷黏合硅烷溶
磁珠法分離純化DNA原理及其步驟
??? 磁珠法純化DNA原理??? 磁珠法核酸純化技術采用了納米級磁珠微珠,這種磁珠微珠的表面標記了一種官能團,能同核酸發生吸附反應。硅磁(Magnetic Silica Particle)就是指磁珠微珠表面包裹一層硅材料,來吸附核酸,其純化原理類型于玻璃奶的純化方式。離心磁珠是指磁珠微珠表
Poly(A)+RNA的分離純化
1)??????Poligo(dT)-纖維素層析法提取poly(A)+RNA裝柱與填柱1.??????取oligo(dT)-纖維素0.5~1.0 g,用0.1 mol/L NaOH重懸。2.??????用oligo(dT)-纖維素(0.5~1.0 ml柱體積)灌注DEPC處理過的一次性柱子(或塞以無
用大片段基因組-DNA-克隆直接篩選-cDNA實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 擴增緩沖液 DNA 聚合酶 DNaseI 限制性內切核酸酶 ATP 鏈霉親和素-磁珠結合緩沖液 T4DNA 連接酶
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試劑、試劑盒 擴增緩沖液DNA 聚合酶 DNaseI限制性內切核酸酶ATP鏈霉親和素-磁珠結合緩沖液T4DNA 連接酶熱穩定 DNA 聚合酶瓊脂糖凝膠BACDNA缺口平移緩沖液雜交液平末端 cDNACot1 基因組 DNA胞漿 poly(A)+RNAdNTP 溶液DNA 分子質量標志物寡
核酸分離與純化的原理及其方法學進展
?核酸的分離與純化技術是生物化學與分子生物學的一項基本技術。隨著分子生物學技術廣泛應用于生物學、醫學及其相關等領域,核酸的分離與純化技術也得到進一步發展。各種新方法、經完善后的傳統經典方法以及商品試劑方法的不斷出現,極大地推動了分子生物學的發展。現就核酸分離與純化的原理及其方法學進展作一綜述。核酸分
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核酸的分離與純化技術是生物化學與分子生物學的一項基本技術。隨著分子生物學技術廣泛應用于生物學、醫學及其相關等領域,核酸的分離與純化技術也得到進一步發展。各種新方法、經完善后的傳統經典方法以及商品試劑方法的不斷出現,極大地推動了分子生物學的發展。現就核酸分離與純化的原理及其方法學進展作一綜述。核酸分離
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用大片段基因組-DNA-克隆直接篩選-cDNA實驗
本方案使用克隆在 BAC 載體上的一段 500kb 的人基因組 DNA 連續序列,直接篩選與其互補的的 cDNA。但本方法也可適用于任意大小的基因組靶 DNA。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)上冊,作者:黃培堂。試劑、試劑盒擴增緩沖液DNA 聚合酶 DNaseI限制性內切核酸酶ATP鏈霉親和素
單鏈DNA文庫的SELEX篩選實驗
實驗方法原理 SELEX 技術除了可以使用 RNA 文庫以外,還可以使用單鏈 DNA 文庫進行篩選。單鏈 DNA 形成高級結構的豐富性也足夠用于對許多靶分子的篩選,而且 DNA 文庫具有更好的穩定性,操作也相對簡便。實驗材料 3' 引物鏈親和素磁珠儀器、耗材 電泳儀PCR 儀離心機凝膠成像儀
poly(A)+-RNA的制備實驗
實驗材料 RNA試劑、試劑盒 NaOH寡聚脫氧胸苷纖維素poly(A)樣品緩沖液LiClEDTATE乙酸鈉儀器、耗材 離心機分光光度計搖床實驗步驟 1. ?先用10 ml 5 mol/l NaOH清洗硅化的層析柱,然后用水沖洗。2. ?取0.5 g oligo(dT)纖維素干粉加1 ml 0.1 m
海貍生物攜磁珠和液體活檢樣本處理方案亮相2021-CACLP
分析測試百科網訊 2021年3月28日,第十八屆中國國際檢驗醫學暨輸血儀器試劑博覽會(簡稱“CACLP”)在重慶國際博覽中心召開。在本次展會上,海貍生物為觀眾帶來了多款納米磁珠和液體活檢樣本處理自動化解決方案。海貍生物展臺鏈霉親和素磁珠是利用鏈霉親和素-生物素(SA-Biotin)高效生物反應系
生物素親和素標記缺點
靈敏度生物素容易與蛋白質和核酸類等生物大分子結合,形成的生物素衍生物,不僅保持了大分子物質的原有生物活性,而且比恬度高,具多價性。此外,每個親和素分子有四個生物素結合部位,可同時以多價形式結合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此,BAS具有多級放大作用,使其在應用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。特異
生物素親和素系統介紹
生物素-親和素系統(Biotin-Avidin—System,BAS)是70年代末發展起來的一種新型生物反應放大系統。生物素與親和素之間高親合力的牢固結合以及多級放大效應,使BAS免疫標記和有關示蹤分析更加靈敏。BAS目前已廣泛用于抗原、抗體的定性、定量檢測及定位觀察研究。生物素(biotin,B)
poly(A)+-RNA的制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大多數的信使RNA(mRNA)都帶有poly(A)尾,而結構RNA沒有。使用本工作方案,可以將帶poly(A)的RNA從rRNA和tRNA中分離出來。 實驗材料
研究蛋白質RNA相互作用的新工具
近日,賽默飛世爾科技全新推出了一款Pierce Magnetic RNA-Protein Pull-Down Kit,讓研究人員能夠以末端標記的RNA作為誘餌,輕松富集蛋白質-RNA的相互作用。與抗體捕獲相比,這種方法的優勢在于脫硫生物素化的目標RNA能夠直接富集RBP(或復合物)。 蛋白