線粒體分離實驗—從組織中分離線粒體
實驗材料肝臟試劑、試劑盒MS儀器、耗材勻漿器實驗步驟1. 取出肝臟，注意不要弄破膽囊。放進一置于冰上的燒杯中，剪去任何結締組織。稱其質量后放回燒杯中。用鋒利的剪刀、手術刀或剃須刀片將之切成 1~2 mmol/L 的薄片，用勻漿緩沖液（1x MS) 沖洗兩次以去除大部分的血。轉移至勻漿器中。加入足夠的勻漿緩沖液，制備 1:10 的勻漿。1 x MS（勻漿緩沖液）210 mmol/L 甘露醇70 mmol/L 蔗糖5 mmol/L Tris-HCl，pH 7.51 mmol/L EDTA，pH 7.52. 在一較冷的房間里，使研杵以 500 r/min 的速度轉動進行勻漿，直到僅留下結締組織。通常需要 2~6 次研磨。3. 將勻漿轉至離心管中，用少量緩沖液清洗勻漿器內壁并加至離心管中（如果后面要進行標志酶檢測，還要留下一些勻漿），1300 g 離心 10 分鐘以沉淀末破碎的細胞。細胞核、細胞質膜和結締組織纖維。4. 將上清移至干凈試......閱讀全文
Cell－Metab：治療男性不育？從線粒體入手！
男性的不育癥狀可能是由線粒體中的DNA突變導致的。對此，Max Planck研究所的科學家們通過提高線粒體中的整體DNA的水平，成功地恢復存在不育癥狀小鼠的睪丸功能以及精細胞的質量。 全球范圍內大概有9%的男性與女性存在無法生育的問題。其中有40%-50%是由于男性不育導致的。而男性的不育癥狀
線粒體電鏡照片觀察實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 線粒體同內質網一樣，除原核細胞和哺乳動物成熟的紅細胞外，其他所有細期線粒體(mitochodri)。一個細胞中線粒體的數目、形狀和大小常因細胞和生理狀況等不同而有較大的差別，如某種海藻中只有一個線粒體，玉米根品中有100~300
線粒體的活體染色實驗
實驗方法原理活體染色是應用無毒或毒性較小的染色劑真實地顯示活細胞內某些結構而又很少影響細胞生命活動的一種染色方法。詹納斯綠 B是線垃體的專一性活體染色劑。線粒體中細胞色素氧化酶使染料保持氧化狀態呈藍綠色，而在周圍的細胞質中染料被還原，成為無色狀態。實驗材料兔子試劑、試劑盒顯微鏡手術器材解剖盤平皿載玻
線粒體電鏡照片觀察實驗
實驗材料 兔子試劑、試劑盒 詹納斯綠B染液Ringer氏液儀器、耗材 顯微鏡載玻片蓋玻片實驗步驟 一、線粒體的光鏡切片觀察1. ?用詹納斯綠B染色的兔肝細胞光鏡切片，肝細胞中的線粒體呈藍綠色的顆粒。二、線粒體的電鏡照片觀察1. ?不同細胞中線粒體的形態和數目不同。線粒體的外形多樣，如圓形、橢圓形、啞
線粒體電鏡照片觀察實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 線粒體同內質網一樣，除原核細胞和哺乳動物成熟的紅細胞外，其他所有細期線粒體(mitochodri)。一個細胞中線粒體的數目、形狀和大小常因細胞和生理狀況等不同而有較大的差別，如某種海藻中只有一個線粒體，玉米根品中有100~300
線粒體電鏡照片觀察實驗
實驗方法原理線粒體同內質網一樣，除原核細胞和哺乳動物成熟的紅細胞外，其他所有細期線粒體(mitochodri)。一個細胞中線粒體的數目、形狀和大小常因細胞和生理狀況等不同而有較大的差別，如某種海藻中只有一個線粒體，玉米根品中有100~3000 個，而海膽卵母細胞中線粒體多達30 萬個;在光學顯微鎮粒
線粒體電鏡照片觀察實驗
電子顯微鏡常用的有透射電鏡（transmissionelectronmicroscope，TEM）和掃描電子顯微鏡。與光鏡相比電鏡用電子束代替了可見光，用電磁透鏡代替了光學透鏡并使用熒光屏將肉眼不可見電子束成像。實驗方法原理線粒體同內質網一樣，除原核細胞和哺乳動物成熟的紅細胞外，其他所有細期線粒體(
離體線粒體的氧化作用和磷酸化作用實驗
實驗方法原理當供給植物組織充足的氧氣時，植物細胞可使底物完全氧化。以葡萄糖為呼吸底物完全氧化時，最后生成CO2，吸收的O2被還原成水，并且每克分子葡萄糖的氧化產生38克分子ATP：其中大部分ATP是通過稱為氧化磷酸化作用形成的，這也是細胞內形成可利用能量的主要過程，現在可以肯定三羧酸循環及其與之相偶
離體線粒體的氧化作用和磷酸化作用實驗
實驗方法原理當供給植物組織充足的氧氣時，植物細胞可使底物完全氧化。以葡萄糖為呼吸底物完全氧化時，最后生成CO2，吸收的O2被還原成水，并且每克分子葡萄糖的氧化產生38克分子ATP： 其中大部分ATP是通過稱為氧化磷酸化作用形成的，這也是細胞內形成可利用能量的主要過程，現在可以肯定三羧酸循環及其與之相
離體線粒體的氧化作用和磷酸化作用實驗
實驗方法原理?當供給植物組織充足的氧氣時，植物細胞可使底物完全氧化。以葡萄糖為呼吸底物完全氧化時，最后生成CO2，吸收的O2被還原成水，并且每克分子葡萄糖的氧化產生38克分子ATP：其中大部分ATP是通過稱為氧化磷酸化作用形成的，這也是細胞內形成可利用能量的主要過程，現在可以肯定三羧酸循環及其與之相
利用病毒從水中分離出氫
據美國物理學家組織網4月12日(北京時間)報道，美國麻省理工學院的研究人員利用病毒將氫從水中分離出來，在將水變成氫燃料的漫漫征程中邁出了關鍵一步。相關研究發表在最新出版的《自然—納米技術》(Nature Nanotechnology)雜志上。 麻省理工學院材料化學家安琪拉·貝爾徹領導的
人體血清如何從全血中分離
分離血清有多種方法，而且不同實驗室有不同的方法。可以靜脈抽血后放置在離心機2000-2500轉/分，離心1-2分鐘后取出試管置37度水浴箱內靜置4-5分鐘，取出試管，用玻璃小滴棒輕輕將纖維蛋白剝離管邊，再離心沉淀2000-2500轉/分，1-2分鐘，即得血清。
從革蘭氏陽性菌中分離RNA
? ? ? ? ? ? 實驗材料 10 ml 細菌培養物 試劑、試劑盒 DEPC 處理的水 ?裂解緩沖液 ?酚
從單個核細胞中分離T細胞
從單個核細胞中分離T細胞1）用玫瑰花結形成試驗分離E＋細胞1．制備AET-綿羊紅細胞1）在刻度離心管中，用無菌的含5％小牛血清的Hanks液洗滌綿羊紅細胞3次，每次離心500×g 10分鐘。2）吸凈上清液，測量紅細胞比容。輕擊試管分散紅細胞，加入4倍紅細胞比容量、新鮮制備的AET溶液，混勻。室溫中反
從革蘭氏陽性菌中分離RNA
實驗材料 10 ml 細菌培養物試劑、試劑盒 DEPC 處理的水 裂解緩沖液 酚氯仿異戊醇 5mol LNaCl 冰冷的無水乙醇 70% 乙醇 DNA 酶消化緩沖液 TE 緩沖液儀器、耗材 離心機 帶微探頭的超聲儀實驗步驟 一 材料與設備1)10 ml 細菌培養物，2)DEPC 處理的水。3) 裂解
植物線粒體制備及其亞結構分級分離實驗（一）
實驗材料?黃化苗試劑、試劑盒?勻漿緩沖液清洗緩沖液Percoll 梯度溶液儀器、耗材?分光光度計實驗步驟 在選好植物材料和勻漿緩沖液后，接下來關鍵的因素包括勻漿方法、緩沖液的 pH、使用的緩沖液與植物組織之間的比例、研磨時間及溫度等（見注釋 5) 。3.1 勻漿根據植物組織的不同可以采取不同的勻漿方
植物線粒體制備及其亞結構分級分離實驗（二）
3.5 純度鑒定可以通過各種細胞器標志性酶的活性來確定線粒體的污染程度。過氧化物酶體可以鑒定過氧化氫酶、羥基丙酮酸還原酶或者乙二醇氧化酶的活性；葉綠體可以用葉綠素含量，白色體可以用類胡蘿卜素的含量或堿性焦磷酸酶的活性；乙二醛循環體可以用異檸檬酸裂解酶的活性；內質網可以用對抗霉素 A 不敏感的細胞
中間絲的分離方法實驗——從培養的細胞中分離Ⅰ~Ⅲ型中間絲
實驗材料細胞試劑、試劑盒蛋白酶抑制劑裂解緩沖液解聚緩沖液組裝緩沖液儀器、耗材勻漿器實驗步驟1. 從培養皿或瓶中吸去培養基并用 5 ml 含蛋白酶抑制劑的冰冷的 PBS 洗細胞。2. 每 75cm2?瓶或培養皿用 1 ml 冰冷的裂解緩沖液 5 分鐘裂解細胞。裂解緩沖液：在 PBS 中加入：1% Tr
綠色葉片植物葉線粒體RNA的分離
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用差速離心，將線粒體從其他亞細胞結構中分離出來，再用蔗糖梯度離心進一步純化得到線粒體。用核糖核酸酶 A 處理從中去除葉綠體 RNA，然后加入高濃度硫氰酸胍滅活核糖核酸酶 A，硫氰酸胍作為一種蛋白變性劑可非常有效的滅活核糖核
綠色葉片植物葉線粒體RNA的分離
實驗方法原理 利用差速離心，將線粒體從其他亞細胞結構中分離出來，再用蔗糖梯度離心進一步純化得到線粒體。用核糖核酸酶 A 處理從中去除葉綠體 RNA，然后加入高濃度硫氰酸胍滅活核糖核酸酶 A，硫氰酸胍作為一種蛋白變性劑可非常有效的滅活核糖核酸酶 A。通過 CsCl 梯度離心，線粒體 RNA 沉
凋亡中線粒體功能評價實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 CMXRos 儲存液PBS實驗步驟 1. 使用前用 DMSO 配置 1 mmol/L 的 CMXRos 儲存液，建議活細胞使用濃度 25~40 mol/L，后續將固定的細胞使用濃度為 50~200 mmol/L。為減少假象，熒光染料濃度應盡可能低。2. 如是貼壁細胞，將細
凋亡中線粒體功能評價實驗
△ψm的顯微分析 △ψm的流式細胞計量術分析 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
凋亡中線粒體功能評價實驗
△ψm的顯微分析 △ψm的流式細胞計量術分析 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
線粒體基因
線粒體基因：mtDNA，線狀、環狀，能單獨復制，同時受核基因控制。哺乳動物：無內含子，有重疊基因突變率高。
線粒體作用
⑴若將純化的正常的線粒體與純化的細胞核在一起保溫，并不導致細胞核的變化。但若將誘導生成PT孔道的線粒體與純化的細胞核一同保溫，細胞核即開始凋亡變化。⑵細胞死亡調節蛋白不論是抑制死亡的bcl-2家族還是促進細胞死亡的Bax家族均以線粒體作為靶細胞器。bcl-2蛋白的C端的疏水肽段能插入線粒體外膜。事實
高爾基體的分離實驗_從大鼠肝臟中分離高爾基復合體
實驗材料雄大鼠試劑、試劑盒勻漿緩沖液儀器、耗材Polytron 勻漿器實驗步驟1. 將按要求進用標準食物和飲水的雄大鼠（約 250 g) ，用斷頭和放血的方法處死。2. 切下肝臟（10~13 g ) 并用刀片切碎。3. 用一只 Polytron 勻漿器（20 ST 或 10 ST；Brinkman
從外周血淋巴細胞(PBls)中分離RNA
[器材和試劑]● 30m1Corex管，酸洗并硅化● 預冷離心機和吊桶式轉頭● Ficoll(Amersham Biosciences)● 冰冷磷酸鹽緩沖液(PBS)，pH 7．4● 裂解緩沖液：5mol/L單巰基氰酸胍，10mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)，50mmol/L Tris—HCl，
我國成功從廢棄油泥中分離出原油
2012年張亮博士到大慶考察油田，希望改善石油開發所帶來的污染 變廢為寶的成功瞬間 “我們的實驗是成功的，工藝是可行的，我們實現了泥沙分離、土地還原的目標！謝謝大家！”張亮博士眼含熱淚向大家鞠躬，感謝團隊成員的辛苦努力。2010年10月，在江蘇省鎮江市的一個實驗廠房里，一股黑色的、粘稠的液體
從人關節軟骨中分離軟骨祖細胞
試劑和材料：1.?骨關節炎患者行膝蓋關節半切開手術時未累及的部分；2.?鏈霉蛋白酶消化培養基：DMEM/F12（1：1）、5%的FBS、抗壞血酸 50μg/ml、葡萄糖 1mg/ml、慶大霉素（50mg/ml），0.2%（終濃度100μg/ml）、鏈霉蛋白酶 70U/ml、HEPES 10mmol/
從成體昆蟲中分離活細菌的方法
Isolation of live bacteria from adult insectsHoracio M Frydman , hfrydman@princeton.edu, Associate ResearcherRelated Journal & Article InformationManu