凋亡中線粒體功能評價實驗
△ψm的顯微分析 △ψm的流式細胞計量術分析 實驗材料 細胞 試劑、試劑盒 CMXRos 儲存液 PBS 實驗步驟 1. 使用前用 DMSO 配置 1 mmol/L 的 CMXRos 儲存液,建議活細胞使用濃度 25~40 mol/L,后續將固定的細胞使用濃度為 50~200 mmol/L。為減少假象,熒光染料濃度應盡可能低。2. 如是貼壁細胞,將細胞在蓋玻片上于培養皿中培養 24~......閱讀全文
凋亡中線粒體功能評價實驗
△ψm的顯微分析 △ψm的流式細胞計量術分析 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
凋亡中線粒體功能評價實驗
△ψm的顯微分析 △ψm的流式細胞計量術分析 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
凋亡中線粒體功能評價實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 CMXRos 儲存液PBS實驗步驟 1. 使用前用 DMSO 配置 1 mmol/L 的 CMXRos 儲存液,建議活細胞使用濃度 25~40 mol/L,后續將固定的細胞使用濃度為 50~200 mmol/L。為減少假象,熒光染料濃度應盡可能低。2. 如是貼壁細胞,將細
凋亡中線粒體功能評價實驗_△ψm的顯微分析
實驗材料細胞試劑、試劑盒CMXRos 儲存液PBS實驗步驟1. 使用前用 DMSO 配置 1 mmol/L 的 CMXRos 儲存液,建議活細胞使用濃度 25~40 mol/L,后續將固定的細胞使用濃度為 50~200 mmol/L。為減少假象,熒光染料濃度應盡可能低。2. 如是貼壁細胞,將細胞在蓋
凋亡中線粒體功能評價實驗_△ψm的流式細胞計量術分析
實驗材料細胞試劑、試劑盒CMXRos 熒光染料PBS實驗步驟1. 按“△ψm?的顯微分析” 用 CMXRos 熒光染料培養約 5X105?細胞。2. 用 pH 7.2 的 PBS 將細胞洗 2 次,在水平搖床上用 4% 甲醛-PBS 溶液室溫溫育細胞沉淀 15 分鐘,用以固定。固定細胞在進行流式細胞
簡述細胞凋亡與線粒體的結構與功能的關系
如果線粒體有大量PT孔道形成,細胞ATP濃度很快下降,則在致凋亡的蛋白酶被活化前細胞就壞死了。而如果PT孔道的誘導生成是一種比較緩和與持續的狀態,在細胞ATP濃度下降前專一的蛋白酶被激活;而另一方面ΔΨm的耗散產生的超氧陰離子則導致細胞死亡。細胞凋亡是一把雙刃劍。一方面是機體發育的正常過程,另一
細胞凋亡線粒體通路相關介紹
線粒體通路,即通過線粒體釋放凋亡酶激活因子激活 Caspase。線粒體是細胞生命活動控制中心,它不僅是細胞呼吸鏈和氧化磷酸化的中心,而且是細胞凋亡調控中心。此通路由含BH3 結構域的Bcl-2 家族成員(Bid、 Bad、 Bim、 Harikari 、Noxa等)與另外的結合在線粒體外膜面或存在于
線粒體介導的凋亡過程介紹
當線粒體的膜電位下降,線粒體膜通透性增加,線粒體內促凋亡因子(例如:當線粒體的膜電位下降,線粒體膜通透性增加,線粒體內促凋亡因子(例如:Cyt C、AIF、SMAC/DIABLO、HTRA2/OMI、ENDOG)釋放到胞質中。Cyt? C釋放到胞內以后,與Apaf-1相互作用,在ATP和dATP的協
關于細胞凋亡的線粒體作用的介紹
⑴若將純化的正常的線粒體與純化的細胞核在一起保溫,并不導致細胞核的變化。但若將誘導生成PT孔道的線粒體與純化的細胞核一同保溫,細胞核即開始凋亡變化。 ⑵細胞死亡調節蛋白不論是抑制死亡的bcl-2家族還是促進細胞死亡的Bax家族均以線粒體作為靶細胞器。bcl-2蛋白的C端的疏水肽段能插入線粒體外
線粒體的功能
能量轉化 線粒體是真核生物進行氧化代謝的部位,是糖類、脂肪和氨基酸最終氧化釋放能量的場所。線粒體負責的最終氧化的共同途徑是三羧酸循環與氧化磷酸化,分別對應有氧呼吸的第二、三階段。細胞質基質中完成的糖酵解和在線粒體基質中完成的三羧酸循環在會產還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicot
線粒體的功能
主要功能:1,能量轉化線粒體是真核生物進行氧化代謝的部位,是糖類、脂肪和氨基酸最終氧化釋放能量的場所。線粒體負責的最終氧化的共同途徑是三羧酸循環與氧化磷酸化,分別對應有氧呼吸的第二、三階段。2,三羧酸循環糖酵解中生成的每分子丙酮酸會被主動運輸轉運穿過線粒體膜。進入線粒體基質后,丙酮酸會被氧化,并與輔
如何證明線粒體與凋亡細胞息息相關
線粒體在細胞凋亡過程中最重要的一點在于它可釋放能夠激活Caspases的蛋白。在無細胞的體系中,自發的、可以由Bcl-2抑制的染色質聚集和DNA片段化依賴于線粒體的存在,進而發現實際上是依賴于Cyto-c從線粒體中的釋放。從線粒體釋放的Cyto-c與Apaf-1、Procaspase 9結合在一起形
線粒體在細胞凋亡中有哪些關鍵作用
線粒體屬于內源性caspase-induced凋亡途徑中的中心細胞器。其中第一個線粒體源的凋亡促進因子cytc的釋放將會在細胞質中招募apaf1和caspase9,形成凋亡復合體,凋亡復合體中caspase9相互活化,最終活化多種效應caspase(3等)。第二個發現的線粒體凋亡因子smac,在凋亡
細胞凋亡檢測實驗——線粒體膜勢能的檢測
實驗方法原理線粒體在細胞凋亡的過程中起著樞紐作用,多種細胞凋亡刺激因子均可誘導不同的細胞發生凋亡,而線粒體跨膜電位的下降,被認為是細胞凋亡級聯反應過程中最早發生的事件,它發生在細胞核凋亡特征(染色質濃縮、DNA 斷裂)出現之前,一旦線粒體DYmt 崩潰,則細胞凋亡不可逆轉。?線粒體跨膜電位的存在,使
細胞凋亡檢測操作流程三JC1檢測凋亡細胞線粒體膜電...
細胞凋亡檢測操作流程三--JC-1檢測凋亡細胞線粒體膜電位改變凋亡檢測操作流程??三、JC-1檢測凋亡細胞線粒體膜電位改變BD? MitoScreen (JC-1)線粒體膜電位檢測試劑盒(551302):組分描述JC-1(染料)4瓶,每瓶用于25個樣本。凍干粉,使用前稀釋至儲存液(Stock Sol
線粒體的功能作用
⑴若將純化的正常的線粒體與純化的細胞核在一起保溫,并不導致細胞核的變化。但若將誘導生成PT孔道的線粒體與純化的細胞核一同保溫,細胞核即開始凋亡變化。⑵細胞死亡調節蛋白不論是抑制死亡的bcl-2家族還是促進細胞死亡的Bax家族均以線粒體作為靶細胞器。bcl-2蛋白的C端的疏水肽段能插入線粒體外膜。事實
人線粒體促凋亡蛋白(SMAC)ELISA試劑盒
人線粒體促凋亡蛋白(SMAC)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)?原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗人?SMAC/Diablo?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?SMAC與單抗結合,加入生物素化的抗人SMAC,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧
Science揭示細胞凋亡期間,mtDNA逃離線粒體機制
在一項新的研究中,由澳大利亞莫納什大學生物醫學發現研究所的Benjamin Kile教授領導的一個國際研究團隊發現并拍攝了在細胞死亡期間線粒體DNA(mtDNA)逃離線粒體(細胞內產生能量的細胞器)的確切時刻。相關研究結果發表在2018年2月23日的Science期刊上,論文標題為“BAK/BA
Gasdermin蛋白增強線粒體凋亡信號,抑制癌細胞生長
半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)可以剪切Gasdermin E (GSDME/DFNA5)釋放出GSDME-N結構域,從而通過在細胞膜上形成孔洞介導細胞焦亡。圖片來源:《Nature Communications》 近日來自托馬斯杰斐遜大學(Thomas Jefferson Un
細胞凋亡的檢測—早期(細胞線粒體膜蛋白法)
實驗步驟展開
細胞凋亡過程中線粒體的通透性轉變
在細胞凋亡過程中線粒體跨膜電位的耗散主要是由于線粒體內膜的通透性轉變,這是由于生成了動態的由多個蛋白質組成的位于線粒體內膜與外膜接觸位點的通透性轉變孔道(PT孔道)。PT孔道由線粒體各部分的蛋白質與細胞質中蛋白質聯合構成。這包括細胞液蛋白:己糖激酶,線粒體外膜蛋白:外周苯并二嗪(benzodia
線粒體的結構與功能
In an attempt to be concise and understandable, introductory level courses and textbooks frequently present concepts that are technically correc
線粒體內膜的功能
粒體內膜含有比外膜更多的蛋白質,所以承擔著更復雜的生化反應。存在于線粒體內膜中的蛋白質主要可分為如下幾類,它們分別負責不同的生理過程: 運輸酶與載體蛋白:運輸酶可進行各種代謝產物和中間產物的運輸。此外,內膜中還有一些特異性載體蛋白,運輸鈣離子、磷酸、谷氨酸、鳥氨酸及核苷酸等。 生物大分子合成
線粒體的5個功能
線粒體的5個功能:能量轉化、三羧酸循環、氧化磷酸化、儲存鈣離子、調節膜電位并控制細胞程序性死亡。能量轉化線粒體是真核生物進行氧化代謝的部位,是糖類、脂肪和氨基酸最終氧化釋放能量的場所。線粒體負責的最終氧化的共同途徑是三羧酸循環與氧化磷酸化,分別對應有氧呼吸的第二、三階段。細胞質基質中完成的糖酵解和在
線粒體的結構和功能
線粒體(mitochondrion) ——主要協助細胞呼吸,并且產生細胞使用能量最直接的形式,三磷酸腺苷。特別的是線粒體有自己的遺傳分子,與細胞核的遺傳物質不同,只遺傳到這個細胞器的子代細胞器,而不是子代細胞,能夠讓線粒體自我分裂增殖,制造本身需要的一些蛋白質,但是仍有一些調節控制的過程受到細胞核的
水貂腸炎病毒可通過線粒體信號通路誘導細胞凋亡
近日,中國農業科學院特產研究所特種動物病原與免疫創新團隊首次證明水貂腸炎病毒及其非結構蛋白1通過線粒體信號通路誘導細胞凋亡,該發現為進一步解釋該病毒的致病機制提供了理論基礎。相關研究成果在線發表于《病毒學雜志(Journal of Virology)》。 水貂腸炎病毒屬于細小病毒科成員,該科病
線粒體膜上的Bcl2抑制凋亡的過程介紹
(1)Bcl-2能改變線粒體巰基的氧化還原狀態來控制其膜電位從而調控細胞凋亡。在細胞凋亡中,線粒體的巰基可能組成了胞內氧化還原電位的傳感器,Bcl-2可能是通過抑制谷胱甘肽(GSH)的外泄,降低胞內的氧化還原電位,來抑制細胞凋亡的;(2)Bcl-2能調節粒體膜對一些凋亡蛋白前體的通透性。Bcl-2蛋
線粒體的主要功能
線粒體的作用:1、細胞有氧呼吸的主要場所線粒體是一種存在于大多數細胞中的用兩層膜包被的細胞器,是細胞有氧呼吸的主要場所,被稱為“power house”,其直徑在0.5到1.0微米左右。大多數真核細胞或多或少都擁有線粒體,但它們各自擁有的線粒體在大小數量以及外觀等方面上都有所不同。線粒體是一些大小不
胚胎線粒體功能檢測重要么
隨著三代試管嬰兒在我國的不斷普及,越來越多的人開始認識這個新技術,很多“久經失敗”的生育困難夫婦也開始嘗試這種新的試管嬰兒技術,我們常說的PGS,中文名字叫“胚胎植入前染色體病篩查”,它是在胚胎移植入子宮前,對胚胎進行全面的染色體檢查,然后挑選染色體正常的胚胎植入子宮。PGS技術在國內外很多生殖
線粒體的基本結構與功能
線粒體由外至內可劃分為線粒體外膜(OMM)、線粒體膜間隙、線粒體內膜(IMM)和線粒體基質四個功能區。處于線粒體外側的膜彼此平行,都是典型的單位膜。其中,線粒體外膜較光滑,起細胞器界膜的作用;線粒體內膜則向內皺褶形成線粒體嵴,負擔更多的生化反應。這兩層膜將線粒體分出兩個區室,位于兩層線粒體膜之間的是