液相色譜的峰形異常怎么辦
1、色譜柱污染或劣化。用洗脫力強的溶劑長時間清洗色譜柱或更換色譜柱。 2、流路污染。使用清洗液清洗流路。 3、流路死體積大。檢查管路連接處，正確連接管路，消除死體積。......閱讀全文
液相色譜流動相的特征
流動相要求液相色譜的流動相必須符合下列要求：（1）能溶解樣品，但不能與樣品發生反應。（2）與固定相不互溶，也不發生不可逆反應。（3）粘度要盡可能小，這樣才能有較高的滲透性和柱效。（4）應與所用檢測器相匹配。例如利用紫外檢測器時，溶劑要不吸收紫外光。（5）容易精制、純化、毒性小，不易著火，價格盡量低等
液相色譜流動相的脫氣
HPLC所用流動相必須預先脫氣，否則容易在系統內逸出氣泡，影響泵的工作。氣泡還會影響柱的分離效率，影響檢測器的靈敏度、基線穩定性，甚至使無法檢測。（噪聲增大，基線不穩，突然跳動）。此外，溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相（如烷基胺）反應。溶解氣體還會引起溶劑pH的變化，對分離或分析結果
液相色譜流動相的選擇
在化學鍵合相色譜法中，溶劑的洗脫能力直接與它的極性相關。在正相色譜中，溶劑的強度隨極性的增強而增加；在反相色譜中，溶劑的強度婕緣腦鑾慷躒酢?BR>正相色譜的流動相通常采用烷烴加適量極性調整劑。反相色譜的流動相通常以水作基礎溶劑，再加入一定量的能與水互溶的極性調整劑，如甲醇、乙腈、四氫呋喃等。極性
液相色譜流動相的濾過
流動相的濾過所有溶劑使用前都必須經0.45μｍ（或0.22μｍ）濾過，以除去雜質微粒，色譜純試劑也不例外（除非在標簽上標明“已濾過”）。用濾膜過濾時，特別要注意分清有機相（脂溶性）濾膜和水相（水溶性）濾膜。有機相濾膜一般用于過濾有機溶劑，過濾水溶液時流速低或濾不動。水相濾膜只能用于過濾水溶液，嚴禁用
高效液相色譜流動相選擇
?????? 流動相的性質要求 ?????? 一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。?????? 流動相選擇 ?????? 1：由強到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗，這樣可以很快地得到分離結果，然后根據出峰情況
高壓液相色譜簡述
Martin 和Synge在1941年就提出高效相色譜的設想，然而直到六十年代后期，由于各種技術的發展，高效液相色譜才付諸實現。這種色譜技術曾被稱為高速液相色譜（HighSpeed Liquid Chromatography），高壓液相色譜（High Parss-ure Lipuid C
高效液相色譜原理
液相色譜儀是一款以用戶為核心的智能化的色譜儀，具有常規HPLC的基本性能，并擴展了更多智能化的功能，能很好的滿足用戶的各類不同的應用要求，使用戶能更加輕松的使用，并獲得準確的分析數據。一、原理：高效液相色譜法的原理是在原始的經典色譜法基礎上面引用氣象色諧的理論，色譜柱則是用特殊的方式用小顆粒裝填而成
簡述液相色譜理論
液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相，稱為經典液相色譜法，此方法柱效低、時間長（常有幾個小時）。高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在經典液相色譜法的基礎上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而
waters液相色譜學校
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高效液相色譜分類
按照分離原理分類，大概可以分為：1.吸附色譜：基于各組分對固定相的吸附能力不同而實現分離的方法。比較常見的色譜柱是火星硅膠、氧化鋁、活性炭、聚乙烯、聚酰胺等。用于測定結構異構體。2.分配色譜：基于樣品在流動相和固定相之間溶解度不同的原理實現分離。比較常見的正相氰基柱（正相）和極為普遍的C18色譜柱（
液相色譜柱通論
選擇液相色譜柱簡單思路1. 確定分離目的 ? ? ?確定你的應用是否要求高分離度、短分析時間、高靈敏度、長柱壽命，低的操作成本等等。2. 評估分析物的化學性質 ? ? ?評估分析物的化學性質. . 諸如化學結構、溶解性、穩定性等等。3. 選擇合適的色譜柱 ? ? ?了解色譜填料的物理和化學性
液相色譜維護誤區
?? 關于標示 1、色譜柱的流向不能改變 在我們常規思維中，色譜柱上標示的流向是不可改變的，每次使用都要遵循。可是，大家有沒有想過這個方向的作用是什么呢？為什么要標示一個使用方向呢？ 其實色譜柱前后端的填料及填裝工藝都是一樣的，標示方向的目的就是讓我們在使用中記住流動相從哪個方向流入色譜柱，那
高效反相液相色譜
實驗方法原理反相色譜（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高，在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式，在生物大分子的反
高效液相色譜柱
一、怎樣選擇色譜柱現代高效液相色譜中，分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬，要做合適的選擇，必須對此有一定的認識和了解。（1）硅膠基質填料：1、正相色譜正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica），以及其他具有極性官能團，如胺基團（NH2，APS）和氰基團（CN，C
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
高效液相色譜原理
色譜法是一種分離技術，試樣混合物的分離過程也就是試樣中各組分在稱之為色譜分離柱中的兩相間不斷進行著的分配過程。 其中的一相固定不動，稱為固定相； 另一相是攜帶試樣混合物流過此固定相的流體（氣體或液體），稱為流動相。 當流動相中攜帶的混合物流經固定相時，其與固定相發生相互作用。由于混合物中各組分在性質
液相色譜基線噪音
對的，雖然理論上分析純試劑可以上HPLC的，但很多國產的達不到要求，會使儀器噪音高很多但，你可以分析一下噪音的來源1，換100%純水，不接柱子，當基線平穩時，進空針（就是什么都不進，走一次方法）。如果這時基線同樣出現之前的情況，那么應該是儀器本身的問題，聯系工程師解決吧（如果用的等度洗脫，這步省略）
液相色譜的用途
高效液相色譜應用很廣泛，基本能對有機化合物中百分之七十到百分之八十的化合物進行分離與檢測，下面以安捷倫液相色譜技術做為舉例：應用液相色譜用途廣泛，已經成為大多數化學行業和生命科學行業中的標準配置。安捷倫液相色譜和液－質聯用系統正為各種客戶群服務，如藥物研制和生產、蛋白質、食品安全、環境、國土安全和石
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
液相色譜串聯質譜法
實驗方法原理尿樣經葡萄糖醛酸甙酶酶解后進行液-液提取,以甲醇-0.1%甲酸緩沖液(含0.02mol/L乙酸銨)(體積比為68∶32)為流動相,采用CosmosilC18色譜柱分離,并以三重四極桿串聯質譜多反應監測掃描方式對尿樣中的脫氫表雄酮(DHEA)、睪酮、表睪酮、雄酮和苯膽烷醇酮等5種激素進行檢
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
液相色譜保養知識
1、? 色譜柱長時間不用，存放時，柱內應充滿溶劑，兩端封死(如ACN適于反相色譜柱，正相色譜柱用相應的有機相)2、? 對于手動進樣器，當使用緩沖溶液時，要用水沖洗進樣口，同時搬動進樣閥數次，每次數毫升。3、流動相使用前必須過濾，不要使用多日存放的蒸餾水(易長菌)。4、帶seal-wash的1100，
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
高效液相色譜基線
高效液相色譜基線色譜基線也常被稱作背景噪音，是在無樣品組分通過色譜檢測器時，檢測器響應信號的隨機分布。基線噪音的大小直接影響色譜分析方法的檢測靈敏度以及對雜質的檢出能力，如純度測試以及痕量物質殘留檢測方法等。對于液相色譜而言，等度洗脫模式下，由于流動相的組成保持一致，其折光率不變，因而基線比較平坦，
制備型液相色譜
制備型液相色譜是一種用于生物學、化學工程領域的物理性能測試儀器，于2017年10月20日啟用。 技術指標 1.流量范圍：0.001-3200 ml/min 2.泵頭最高耐壓：8700 psi 3.紫外-可見檢測器波長范圍：190-700 nm 4.紫外-可見檢測器噪音：+5x10-6 AU。
液相色譜的應用
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液，不受樣品揮發性的限制，流動相可選擇的范圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。與試樣預處理技術相配合，HPLC所達到的高分辨率和高靈敏度，使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能，能夠分離復雜相體中的
現代液相色譜進展
? 色譜法最初僅僅是作為一種分離手段，是根據混合物中不同組分在流動相和固定相間具有不同的分配系數，當兩相作相對運動時，這些組分在兩相間進行反復多次的分配，從而得到分離。直到五十年代，人們才開始把這種分離手段與檢測系統連接起來，成為一種獨特的分析方法，是幾十年來分析化學中最富活力的領域之一，也是生命科
高效反相液相色譜
反相色譜（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高，在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式，在生物大分子的反相液
高效液相色譜原理
以高壓下的液體為流動相，并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。構造可分為高壓輸液泵，色譜柱，進樣器，檢測器以及數據獲取與處理系統等部分。與氣相色譜法相比，液相色譜法不受樣品揮發性和熱穩定性及相對分子質量的限制，只要求把樣品制成溶液即可，非常適合于分離生物大分子、離子型化合物，不穩定的天然產物以
液相色譜小知識
高效液相經常使用粒徑5um?的色譜柱，用過一段時間后，柱壓會略有升高，尤其是做中藥。常用來洗色譜柱的溶劑為甲醇，當色譜柱用甲醇洗過之后，再用含乙腈的流動相平衡，會使柱壓迅速升高，色譜柱滴漏，這是由于甲醇和乙腈匯合產生局部高壓。因此，這種情況下，應慢慢升高流速，可以從0.6ml/min開始，一步步的平