從新鮮和冰凍血液中提取RNA
試劑、試劑盒 磷酸鹽緩沖液 淋巴細胞分離液 RNAzol B( Biogencsis UK) 氯仿異丙醇乙醇 氯化鈉 DFPC 處理的水 離心管1.5X 溶 液 D: 6 mol L 硫氰酸胍檸檬酸鈉十二烷基肌氨酸鈉 2-巰基乙醇 酚 乙酸鈉儀器、耗材 離心管實驗步驟 一 材料與設備1. 鮮血中 RNA 提取1)磷酸鹽緩沖液 (PBS)2)淋巴細胞分離液3)RNAzolB (Biogencsis,UK)4)氯仿5)異丙醇7)乙醇8)5mol/L 氯化鈉9)DFPC 處理的水10)10 ml 離心管2. 冰凍血液中 RNA 提取1)1.5X 溶液 D:6mol/L 硫氰酸胍,37.5 mmol/L 檸檬酸鈉 pH7.0,0.75% 十二烷基肌氨酸鈉 H0.15mol/L2-巰基乙醇2) 酚:氯仿(5:I,pH 約 4.0)3)4,2mol/L 乙酸鈉 pH4-0.4) 異丙醇。5) 乙醇。6)30 ml 離心管二 操作方法1. 鮮......閱讀全文
從新鮮和冰凍血液中提取RNA
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 磷酸鹽緩沖液 淋巴細胞分離液 ?RNAzol B( Biogencsis UK) 氯仿 異丙醇 乙
從新鮮和冰凍血液中提取RNA
試劑、試劑盒 磷酸鹽緩沖液 淋巴細胞分離液 RNAzol B( Biogencsis UK) 氯仿異丙醇乙醇 氯化鈉 DFPC 處理的水 離心管1.5X 溶 液 D: 6 mol L 硫氰酸胍檸檬酸鈉十二烷基肌氨酸鈉 2-巰基乙醇 酚 乙酸鈉儀器、耗材 離心管實驗步驟 一 材料與設備1. 鮮血中 R
2.1.7-從新鮮和冰凍血液中提取RNA
全血中含有有核白細胞,因此從血液中抽提 RNA 比較方便,但是紅細胞富含核糖核酸酶,所以從血液中分離 RNA 奮其持殊的難度。因此若能先將有核白細胞與紅細胞分離開來,從血液中抽提 RNA 更易成功。下述方法是酸-酚. 胍法?硫氰酸胍吋裂解細胞,并有效地滅活核糖核酸酶。試劑、試劑盒磷酸鹽緩沖液淋巴細胞
冰凍血漿和新鮮冰凍血漿區別
新鮮冷凍血液與一般冷凍血液的差別取決于規定的標準不一樣。新鮮冷凍血液在有限的時間與溫度下產生,而一般冷凍血液在保存期內當然沉定而成。抗凝全血于6-8鐘頭以內在4℃標準下抽濾將血液分離出來,并快速在-30℃下列冷凍成塊,即是新鮮冷凍血液,冷凍情況一直持續到應用以前,有效期限為1年,產品內帶有所有的凝血
用于提取RNA新鮮組織如何保存
市場上有一種非冰型RNA樣品保存液.有些公司叫RNAwait,或者還有別的名稱,你可以了解一下.很多公司都有的.非凍型組織細胞RNA保存液(RNAwait)是一種在較高溫度下保存動物組織及細胞RNA樣品的非凍型無毒溶液,它能迅速滲入細胞內,通過高效抑制RNase的活性而保存RNA的完整性。產品特點1
新鮮冰凍血漿中凝血因子檢測結果與分析
【關鍵詞】? 新鮮冰凍血漿; 凝血因子; 活性 根據衛生部臨床輸血技術規范要求,新鮮冰凍血漿(fresh frozen plasma,FFP)自血液采集后6~8 h之內經分離放入-50℃速凍成塊,在-30℃保存1年內幾乎含有全部凝血因子,包括不穩定因子Ⅴ和Ⅷ[12]。而血液凝血因子易受血漿制備、儲
RNA提取心得(組織RNA提取和培養細胞的RNA提取)
一.組織RNA提取 1.最好新鮮組織,這樣RNA提取的效果比較好,這是肯定的。 2. 如果不是新鮮的(最好在半年之內,-80℃或者液氮中凍存的)組織,注意不要反復凍融,從冰凍狀態拿到0-4℃,注意不要拿到常溫,待組織解凍后,用 DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織,稱重后,放到預冷的勻漿器中,然后
怎樣從總RNA中提取mRNA
大多數真核細胞mRNA的3’端通常具有由20-30個腺苷酸組成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脫氧核糖核苷(OligoT)可以與之配對結合,這就是提取mRNA最基本的原理。具體到實驗手段上,現在磁珠法、纖維素柱層析法都有在用。磁珠法一般是用生物素標記OligoT,親和素標記磁珠(生物素和親和素間具有高
CsCl法從組織中提取RNA
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 液氮 組織胍溶液 十二烷基肌氨酸鈉 CsCl 組織重懸液 ? 乙酸鈉 酚 氯仿
怎樣從總RNA中提取mRNA
大多數真核細胞mRNA的3’端通常具有由20-30個腺苷酸組成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脫氧核糖核苷(OligoT)可以與之配對結合,這就是提取mRNA最基本的原理。具體到實驗手段上,現在磁珠法、纖維素柱層析法都有在用。磁珠法一般是用生物素標記OligoT,親和素標記磁珠(生物素和親和素間具有高
CsCl法從組織中提取RNA
試劑、試劑盒 液氮 組織胍溶液 十二烷基肌氨酸鈉 CsCl 組織重懸液 乙酸鈉酚 氯仿 異戊醇 異戊醇 無水乙醇儀器、耗材 組織搗碎機 離心機實驗步驟 一 材料與設備1)液氮2)組織胍溶液:590.8 g 異硫氰酸胍溶于 400ulDEPC 處理的水中,加入 25 mmol/LTris-Cl(p
從富含多糖的植物組織中提取和純化-RNA
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 硫氰酸胍能溶解細胞并使蛋白變性. 當用于抽提緩沖液時,可產生無 RNase 的環境□組織抽提后,以中等轉速離心勻漿液,以除去小溶性多搪。用苯酚:氯仿將上清液抽提出,RNA 位于水相,DNA 和蛋白質位于苯酚相和兩相交界面
從富含多糖的植物組織中提取和純化-RNA
實驗方法原理 硫氰酸胍能溶解細胞并使蛋白變性. 當用于抽提緩沖液時,可產生無 RNase 的環境□組織抽提后,以中等轉速離心勻漿液,以除去小溶性多搪。用苯酚:氯仿將上清液抽提出,RNA 位于水相,DNA 和蛋白質位于苯酚相和兩相交界面。用乙酸鉀將位于水相的多糖選擇件的沉淀出來,然后用氯化鋰選
從果蠅胚胎中提取總-RNA-或-poIy(A)-+RNA
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 0.lmol LNaOH ?乙醇 ?3mol L 乙酸鈉 ? 苯酚 ?無 SDS 的結合緩沖液 含 SDS 的結合緩沖
從果蠅胚胎中提取總-RNA-或-poIy(A)-+RNA
試劑、試劑盒 0.lmol LNaOH 乙醇 3mol L 乙酸鈉 苯酚 無 SDS 的結合緩沖液 含 SDS 的結合緩沖液 TE 緩沖液 SEVAG 漂白劑(Bleach) 含 MgCl2 的 PBS(pH7.2) 果蠅勻漿緩沖液實驗步驟 一 材料與設備1)0.lmol/LNaOH2)70%(V/
多位專家指導:如何提取和研究血液DNA,RNA與蛋白
血液是唯一與所有器官都有接觸的組織,攜帶著有關機體的大量寶貴信息。在理論上,檢測血液攜帶的 DNA、RNA、囊泡和細胞殘骸可以幫助人們診斷和監控各種疾病。 產前基因篩查是血液檢測的一個重要應用,通過分析孕婦血液中的胎兒DNA來鑒定染色體異常(比如唐氏綜合癥)。此外,越來越多的研究者開始關注血液
2.2.2-從富含多糖的植物組織中提取和純化-RNA
實驗方法原理硫氰酸胍能溶解細胞并使蛋白變性. 當用于抽提緩沖液時,可產生無 RNase 的環境□組織抽提后,以中等轉速離心勻漿液,以除去小溶性多搪。用苯酚:氯仿將上清液抽提出,RNA 位于水相,DNA 和蛋白質位于苯酚相和兩相交界面。用乙酸鉀將位于水相的多糖選擇件的沉淀出來,然后用氯化鋰選擇性地將
2.3.1-從果蠅胚胎中提取總-RNA-或-poIy(A)-+RNA
試劑、試劑盒0.lmol LNaOH乙醇3mol L 乙酸鈉苯酚無 SDS 的結合緩沖液含 SDS 的結合緩沖液TE 緩沖液SEVAG漂白劑(Bleach)含 MgCl2 的 PBS(pH7.2)果蠅勻漿緩沖液實驗步驟一 材料與設備1)0.lmol/LNaOH2)70%(V/V) 乙醇3)3mol/
CsCl法從培養細胞中提取RNA
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 磷酸鹽緩沖溶液 硫氰酸胍溶液 CsCl TES 緩沖液 乙酸鈉緩沖液 無水乙醇 經 DEFC 處理的水
CsCl法從培養細胞中提取RNA
試劑、試劑盒 磷酸鹽緩沖溶液 硫氰酸胍溶液CsClTES 緩沖液 乙酸鈉緩沖液無水乙醇 經 DEFC 處理的水。儀器、耗材 離心機 注射器及20W針頭實驗步驟 一 材料與設備1) 磷酸鹽緩沖溶液 (PBS)2) 硫氰酸胍溶液:4mol/L 硫氰酸胍,0.lmmol/LTris-HClpH7.5,1%
從有限的細胞中提取-RNA-實驗
實驗材料 LCM 帽子試劑、試劑盒 乙醇 糖原RNA 提取試劑盒 超純水儀器、耗材 移液器實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、試劑和溶液75% 乙醇 (超純水配制)糖原,5 mg/ml(Ambion,Austin,TX)StratageneRNA 提取試劑盒(200345,StratageneCloni
2.1.6-CsCl法從組織中提取RNA
由于一些組織(如胰臟和睥臟)含有高濃度的內源性 RNA 酶,因此純化源于組織的 RNA 須更加小心。試劑、試劑盒液氮組織胍溶液十二烷基肌氨酸鈉CsCl組織重懸液乙酸鈉酚氯仿異戊醇異戊醇無水乙醇儀器、耗材組織搗碎機離心機實驗步驟一 材料與設備1)液氮2)組織胍溶液:590.8 g 異硫氰酸胍溶于 40
從有限的細胞中提取-RNA-實驗
RNA 樣品可以在-80°C 中保存 6 個月。總細胞 RNA 采用 StratageneRNA 提取試劑盒,按照說明書進行。另外,也可選用 PicoPureRNA 提取試劑盒,尤其是細胞較少時。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。實驗材料LCM 帽子試劑、試劑盒乙醇糖原R
從有限的細胞中提取-RNA-實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 LCM 帽子 試劑、試劑盒 乙醇 糖原 RNA 提取試劑盒 ?超純
從外周血淋巴細胞中提取RNA
實驗概要本實驗從外周血淋巴細胞(PBls)中分離得到RNA樣品。主要試劑1. Ficoll(Amersham Biosciences)2.?冰冷磷酸鹽緩沖液(PBS),pH 7.43. 裂解緩沖液:5mol/L單巰基氰酸胍,10mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA),50mmol/L Tris—HCl
如何從凍存的細胞提取RNA
1). 將凍存管從液氮或冰箱中取出;2). 不待細胞溶解,將Trizol500ul-1ml直接放入凍存管中,此時Trizol會凍成冰狀;3). 將凍存管緩慢融化,并用加樣器吹打混勻;4). 將細胞裂解液移至Eppendorf管中,16000′g離心1min,吸出管底絮狀沉淀;注釋:該步驟并非必要,多
從RNA中提取mRNA的方法步驟
從總RNA中分離mRNA采用Promega公司的PolyATract? mRNA Isolation System III。 使用該試劑盒,mRNA產量極低,因此下述方法是以Promega公司試劑盒操作手冊為基礎,并采用儲昭暉碩士(作物遺傳改良國家重點實驗室植物分子生物學水稻分室)所建議的改進方
2.1.5-CsCl法從培養細胞中提取RNA
通過硫氰酸胍提取和氯化銫離心法制備 RNA,適于分離細胞質和細胞核難分開的細胞以及富含 RNase 的細胞中的 RNA。試劑、試劑盒磷酸鹽緩沖溶液硫氰酸胍溶液CsClTES 緩沖液乙酸鈉緩沖液無水乙醇經 DEFC 處理的水。儀器、耗材離心機注射器及20W針頭實驗步驟一 材料與設備1) 磷酸鹽緩沖溶液
如何從脂肪組織中高效提取RNA?
前言RNA 的提取是腫瘤研究的重要內容。在乳腺癌的研究中,乳腺癌樣品通常含有較高含量的脂肪組織和結締組織,而脂肪組織由于密度小,通常漂浮于液面,使樣品難以被充分研磨。若研磨不充分,會導致樣品離心后不能得到明確清晰的分層,多數老師都會選擇犧牲提取量以保證提取效果。深圳大學醫學院的老師們正是遇到了上述的
從微量樣本中同時提取mRNA和天然蛋白
有時,細胞就是那么少,但又要開展多項分析,著實讓人為難。丹麥哥本哈根大學的研究人員開發出一種新方法,能從微量的樣本中同時提取mRNA和天然蛋白。這項成果發表在《BioTechniques》5月刊上。 在生物學研究的許多領域,樣本量往往很有限,特別是人體細胞和組織,如卵泡和胚胎干細胞。但是,研究