單層培養細胞更換培養液實驗
實驗方法原理以肉眼和倒置顯微鏡觀察培養物,若有指征,如PH降低,則去除舊培養基加如新鮮培養基,再重新放入溫箱培養。實驗步驟材料無菌培養的細胞:A549細胞,以2×10^4ml接種到25cm2培養瓶后4天……4瓶生長培養液……………………………………………………100ml例如:Eagle1×MEM含Hanks鹽類和4mmol/L H2CO3,無抗生素如果培訓程序能接上,用聯系3配制的兩種培養基,1瓶保存在4℃一周,1瓶保存在37℃一周移液管,各種刻度,清洗好,塞了棉花。如果是玻璃的,按照大小1ml、5ml、10ml、25ml,分類裝在方形吸管盒中。如果是塑料的,單個包裝并分類放在架子上如果具備真空泵或真空管線,則用不塞棉花的吸除培養液的吸管非無菌吸液器或吸耳球(圖5.5、圖6.6)連接廢液瓶與真空管線的管子,或連接廢液瓶與蠕動泵的管子(見圖5.1~圖5.3)裝了70%乙醇的噴壺無短絨的拭干子或抹布吸水紙巾帶水和消毒劑的吸管筒防乙醇......閱讀全文
培養液的用途
中文名稱培養液英文名稱culture medium定 義用于進行組織或細胞培養的介質之統稱。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞培養與細胞工程(二級學科)
Rustigian氏尿素培養液
成分 尿素 20.0g 酵母浸膏 0.1g 磷酸二氫鉀(KH2PO4) 0.091g 磷酸氫二鈉(Na2HPO4) 0.095g 酚紅 0.01g 蒸餾水 1000mL制法 將上述成分于蒸餾水中溶解,校
細胞培養液-(一)
現代生物技術均通過細胞作為載體來進行,無論是基因治療、干細胞、克隆技術都在細胞內進行的。細胞的生長需要一定的營養環境,用于維持細胞生長的營養基質稱為培養基,即指所有用于各種目的的體外培養、保存細胞用的物質,就其本意上講為人工模擬體內生長的營養環境,使細胞在此環境中有生長和繁殖的能力。它是提供細胞營養
什么是HAT培養液?
中文名稱HAT培養液英文名稱HAT medium定 義內含次黃嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)的培養液。在此培養液中,次黃嘌呤-鳥嘌呤核苷磷酸核糖基轉移酶(HGPRT)或胸腺嘧啶核苷激酶(TK)缺陷型細胞不能生長。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞培養與細胞工程(二級學科)
細胞培養液(二)
第四節 合成細胞培養基合成培養基是根據天然培養基的成分,用化學物質模擬合成、人工設計、配制的培養基。它有一定的配方,是一種理想的培養基。目前合成培養基多達10多余種,有的培養基仍在不斷進行改良。早期組織培養是利用天然培養基,目前合成培養基已經成為一種標準化的商品,從zui初的基本培養基發展到無血清培
細胞培養液的構成
細胞培養液指細胞生長的液體環境,一般指完全培養液,添加了血清、水解乳蛋白、各種添加劑等可以直接使用的培養液。 1.細胞培養基&血清模式 血清對于在傳統培養基配方中生長和增殖的大多數細胞系來說是需要的,因為大多數單獨的培養基并不能提供細胞生長所需要的全部營養,如MEM培養基,較為常用的量為5%
無蛋白培養液的定義
中文名稱無蛋白培養液英文名稱protein-free medium定 義含有支持細胞增殖和生物反應的不含大分子蛋白質成分的培養液。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞培養與細胞工程(二級學科)
確定成分培養液的定義
中文名稱確定成分培養液英文名稱defined medium定 義所有化學成分和濃度都明確限定的培養液。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞培養與細胞工程(二級學科)
無血清培養液的定義
中文名稱無血清培養液英文名稱serum-free medium定 義不含血清而含有支持細胞增殖和生物反應的多種營養成分(如生長因子、組織提取物等)的細胞培養液。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞培養與細胞工程(二級學科)
細胞培養液的儲存
細胞培養液的儲存條件一般為2~8℃、密閉、避光保存,但要注意如下幾點: (1)過濾后的完全培養液,即添加了血清、谷氨酰胺、抗生素等的培養液要盡快使用,一般在2~3周內使用完。 (2)滅菌后的未加L-谷氨酰胺等添加劑的培養基溶液,一般可在4℃保存6~9個月,也可冷凍保存,用時解凍。 (3)高
細胞培養液的儲存
細胞培養液的儲存條件一般為2~8℃、密閉、避光保存,但要注意如下幾點: (1)過濾后的完全培養液,即添加了血清、谷氨酰胺、抗生素等的培養液要盡快使用,一般在2~3周內使用完。 (2)滅菌后的未加L-谷氨酰胺等添加劑的培養基溶液,一般可在4℃保存6~9個月,也可冷凍保存,用時解凍。 (3)高
液體培養液中裂解感染實驗
實驗材料 λgtll 重組噬菌體大腸桿菌 Y1090 hsdR 菌株試劑、試劑盒 細胞裂解液IPTGMgS04?7 H20苯甲基磺酰氯SMLB 培養液儀器、耗材 SorvallSS-34 轉子或同等產品沸水水浴液氮實驗步驟 材料緩沖液劑及溶液貯存液,緩沖液及試劑的組分見附錄 1。將貯存液稀釋至合適濃
液體培養液中裂解感染實驗
本方法適用于對可免疫檢測的融合蛋白進行快速篩選λgtll 重組噬菌體。但在其他條件下(如:對感染率的優化,42°C λ噬菌體基因的失活及裂解前收集),此方法亦可用于產生制備量的融合蛋白 (Runge1992)。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)下冊,作者:〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾
條件培養液的概念和用途
在細胞培養過程中,該細胞可能會分泌活性物質到培養液中,其中細胞因子是主要的活性物質之一,這種培養過某種細胞或組織以后,含有細胞分泌物的培養液就叫做條件培養液。利用條件培養液可有效提高細胞或組織體外培養的成功率,而且不同來源的條件培養液對不同細胞、組織有不同的促進或抑制作用。
單層培養細胞更換培養液實驗
實驗方法原理以肉眼和倒置顯微鏡觀察培養物,若有指征,如PH降低,則去除舊培養基加如新鮮培養基,再重新放入溫箱培養。實驗步驟材料無菌培養的細胞:A549細胞,以2×10^4ml接種到25cm2培養瓶后4天……4瓶生長培養液……………………………………………………100ml例如:Eagle1×MEM含H
培養液pH對細胞的影響?
由于大多數細胞適宜pH為7.2-7.4,偏離此范圍可能對細胞生長將產生有害的影響。但各種細胞對pH的要求也不完全相同,原代培養細胞一般對pH變動耐受差,無限細胞系耐受力強。但總體來說,細胞耐酸性比耐堿性強一些。在配制培養用液時,需要注意一點:培新配的培養基在經過0.10um或0.22um濾膜過濾時,
單層培養細胞更換培養液實驗
實驗方法原理以肉眼和倒置顯微鏡觀察培養物,若有指征,如PH降低,則去除舊培養基加如新鮮培養基,再重新放入溫箱培養。實驗步驟材料無菌培養的細胞:A549細胞,以2×10^4ml接種到25cm2培養瓶后4天……4瓶生長培養液……………………………………………………100ml例如:Eagle1×MEM含H
完全培養液的相關定義
問:“完全培養液一詞”,是指加了血清的培養液嗎?我在做含藥血清的實驗,涉及到血清添加量的問題。所以想弄明白文中所指的“完全培養液”是否是含藥血清。 答:原液是指配置后過濾除菌。不完全培養液是指不含有血清,例如Gibco北美胎牛血清的原液,其他成分已補充。完全培養液是指不完全培養液加入血清(例如Gib
液體培養液中裂解感染實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 λgtll 重組噬菌體 大腸桿菌 Y1090 hsdR 菌株 試劑、試劑盒 細胞裂解液
動物細胞培養培養液成分
體外細胞培養所需營養物質與體內基本相同,例如,需要糖、氨基酸、無機鹽、促生長因子、微量元素等。將細胞所需的上述物質按其種類和所需數量嚴格配制而成的培養基,稱為合成培養基。由于動物細胞生活的內環境還有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入動物血清以提供一個類似生物體內的環境,因此在使用合成培養基時,通
細胞培養液選配關注點
培養液是人工模擬細胞體內生長的生存環境,對于細胞培養起著關鍵性作用。?1.? ?選擇培養基沒有一定的標準,某種培養基可以適合多種細胞,某種細胞也可以在不同培養液中生長。但是,建立某種細胞株所用的培養基應該是培養這種細胞優選的培養基。可以查閱參考文獻,或在購買細胞株時咨詢。??2.? ?1640的確是
細胞培養液的配制與消毒
器材與試劑:干粉型培養基、胰蛋白酶,青霉素、鏈霉素.?純凈水系統、電子天平、PH計、磁力攪拌器。具體步驟:一.??水的制備:細胞培養用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):1.溶
培養液pH對細胞生長的影響?
由于大多數細胞適宜pH為7.2-7.4,偏離此范圍可能對細胞生長將產生有害的影響。但各種細胞對pH的要求也不完全相同,原代培養細胞一般對pH變動耐受差,無限細胞系耐受力強。但總體來說,細胞耐酸性比耐堿性強一些。在配制培養用液時,需要注意一點:培新配的培養基在經過0.10um或0.22um濾膜過濾時,
怎么去除培養液中的細胞碎片
3000轉/分 離心5分鐘 可使碎片沉淀下來 取上清即可。
細胞培養液選配注意事項
培養液是人工模擬細胞體內生長的生存環境,對于細胞培養起著關鍵性作用。1.選擇培養基沒有一定的標準,某種培養基可以適合多種細胞,某種細胞也可以在不同培養液中生長。但是,建立某種細胞株所用的培養基應該是培養這種細胞首選的培養基。可以查閱參考文獻,或在購買細胞株時咨詢。2.1640的確是非常便宜的培養基,
12板培養細胞加培養液多少
6孔板底面積9.6cm2,加培養液的量2.5ml。12孔板底面積4.5cm2,加培養液的量2ml。24孔板底面積2cm2,加培養液的量1ml。96孔板底面積0.32cm2,加培養液的量0.1ml。無毒和無菌是體外培養細胞的首要條件。細胞在活體內,解毒系統和免疫系統可抵抗微生物或其他有害物質的入侵,但
48孔板加多少培養液
孔直徑15.6mm,生長面積1.9m2,工作體積0.38-0.57ml 。
培養液pH下降很快可能原因有哪些?
通常細胞生長得非常快時,pH值通常下降得很快。此時可以及時傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進行解決。此外,培養瓶蓋擰得太緊、NaHCO3 緩沖系統緩沖能力不夠、培養液中鹽濃度不正確、細菌、酵母或真菌污染等也能導致pH值通常下降得很快。(1)按培養液中NaHCO3 濃度增加或減少培養箱內CO2 濃
方案-13.1-單層培養細胞更換培養液實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 以肉眼和倒置顯微鏡觀察培養物,若有指征,如PH降低,則去除舊培養基加如新鮮培養基,再重新放入溫箱培養。 實驗步驟 材料無菌培養的細胞:A549
OD值與細菌培養液濃度的關系
一般OD600=1時對應的細菌濃度為2*10^9cfu/ml,