方案13.1單層培養細胞更換培養液實驗
實驗方法原理 以肉眼和倒置顯微鏡觀察培養物,若有指征,如PH降低,則去除舊培養基加如新鮮培養基,再重新放入溫箱培養。 實驗步驟 材料無菌培養的細胞:A549細胞,以2×10^4ml接種到25cm2培養瓶后4天……4瓶生長培養液……………………………………………………100ml例如:Eagle1×MEM含Hanks鹽類和4mmol/L H2CO3,無抗生素如果培訓程序能接上,用聯系3配制的兩種培養基,1瓶保存在4℃一周,1瓶保存在37℃一周移液管,各種刻度,清洗好,塞了棉花。如果是玻璃的,按照大小1ml、5ml、10ml、25ml,分類裝在方形吸管盒中。如果是塑料的,單個包裝并分類放在架子上如果具備真空泵或真空管線,則用不塞棉花的......閱讀全文
單層細胞培養的概念
在動物培養中,一經貼壁就迅速鋪展并開始有絲分裂,逐漸形成致密的細胞單層,這種培養方法稱為單層細胞培養(single layer cell culture)。
動物細胞培養——單層細胞的換液
實驗方法原理目的給單層細胞換新鮮培養纂。應用用于給快速生長的培養物在傳代之間更換培養基,或從一種類型培養基換成另一種培養幕,訓練目標加強無菌操作技巧.介紹細胞維持的一個基本原理,即在持續培養周期中更換培養基。讓實習生觀察培養基并明白耗竭培養基的特征.例如細胞密度和(或)pH降低,并觀察有沒有污染.r
單層培養細胞更換培養液實驗
實驗方法原理以肉眼和倒置顯微鏡觀察培養物,若有指征,如PH降低,則去除舊培養基加如新鮮培養基,再重新放入溫箱培養。實驗步驟材料無菌培養的細胞:A549細胞,以2×10^4ml接種到25cm2培養瓶后4天……4瓶生長培養液……………………………………………………100ml例如:Eagle1×MEM含H
單層培養細胞更換培養液實驗
實驗方法原理以肉眼和倒置顯微鏡觀察培養物,若有指征,如PH降低,則去除舊培養基加如新鮮培養基,再重新放入溫箱培養。實驗步驟材料無菌培養的細胞:A549細胞,以2×10^4ml接種到25cm2培養瓶后4天……4瓶生長培養液……………………………………………………100ml例如:Eagle1×MEM含H
細胞培養實驗——懸浮細胞培養
實驗材料凍存 HeLa S3 細胞試劑、試劑盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶/EDTA儀器、耗材旋轉瓶完全培養基-525 cm2 組織培養瓶C02 培養箱Sorvall H-6000A 轉子100 ml 或 200 ml 通氣旋轉瓶和帶濾膜的瓶蓋實驗步驟1. 將含有凍存 HeLa S3 細胞的安
多孔培養板中單層培養細胞生長曲線
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 以三種不同的細胞濃度在多孔板中培養三組細胞,在達到平臺期之前,每天計數一個板中的細胞。 實驗步驟 材料 無菌 單層細胞培養:A549、V
細胞培養實驗——貼壁細胞培養
實驗材料凍存細胞試劑、試劑盒70% 乙醇PBS胰酶/EDTA儀器、耗材25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒,打開安瓿,用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起始培養基的 25 cm
動物細胞培養——細胞培養介紹
實驗方法原理目的細胞培養的評判性檢查。應用檢查常規維持的一致性;在復蘇、傳代、凍存前培養狀況的評估;對新的或實驗性情形反應的評估;確認明顯的污染物。訓練目標熟悉不同類型和不同密度的細胞培養的外觀;數碼或膠片相機的使用;滅菌物品和污染物間的區別,健康的和不健康的培養物間的區別;培養物生長階段的評估。監
細胞培養技術的細胞培養方式
高等生物是由多細胞構成的整體,在整體條件下要研究單個細胞或某一群細胞在體內(in vivo)的功能活動是十分困難的。但是如果把活細胞拿到體外(in vitro)培養進行觀察和研究,則要方便得多。活細胞離體后要在一定的生理條件下才能存活和進行生理活動,特別是高等動植物細胞要求的生存條件極其嚴格,稍有不
細胞培養
細胞培養是一種常用的實驗室技術,其中原核或真核細胞在受控條件下生長。大規模哺乳動物細胞培養被廣泛用于生物技術中,特別是用于生產疫苗,蛋白質,酶,抗體和激素。細胞培養還用于許多研究**域,特別是在制藥**域,其中將細胞用作研究許多疾病(例如癌癥或心臟病)的模型。細胞用于靶標鑒定和驗證,基于細胞的測定法
方案-13.1-單層培養細胞更換培養液實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 以肉眼和倒置顯微鏡觀察培養物,若有指征,如PH降低,則去除舊培養基加如新鮮培養基,再重新放入溫箱培養。 實驗步驟 材料無菌培養的細胞:A549
培養瓶中單層培養細胞生長曲線的繪制
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 開始一系列的培養,每天在一定的時間計數細胞直至它們到達平臺期。 實驗步驟 材料 無菌 單層細胞培養,A549,Vem 或 HeLa-S3,
小鼠肝細胞培養實驗——細胞培養技術
實驗方法原理直接從生物體內獲取組織細胞進行的首次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步,是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基本的技術。根據培養方法不同分為組織塊培養法和單層細胞培養法。實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEMDMEM胰酶PBS儀器、耗材飯盒紗布小剪子小鑷子大鑷子大燒杯平皿研
細胞培養細胞培養的具體步驟
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中,加入10ml預熱的DMEM完全培養基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗,棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5
巨噬細胞培養常用細胞培養器皿介紹
常用細胞培養器皿有培養瓶、培養板、培養皿等。常準備量是使用量的三倍。器皿應選擇透明度好,無毒,利于細胞粘附和生長的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面幾種。巨噬細胞1、液體儲存瓶:用于儲存各種配制好的培養液、血清等液體,常用規格有500ml、250ml、100ml等幾
病毒的培養方法實驗—組織培養法原代細胞單層培養
實驗方法原理組織培養是目前培養病毒應用最廣的一種培養方法,其優點是①經濟適用,結果正確且敏感;②較實驗動物易于控制。原代細胞單層培養法,是指動物(包括脊椎動物和無脊椎動物)的組織自機體取出后,經胰酶或其他細胞分散劑消化處理,得到單個細胞懸液。以一定量接種到特定容器中,加入細胞生長所必需的營養液,置合
培養瓶中單層培養細胞生長曲線的繪制實驗
實驗方法原理開始一系列的培養,每天在一定的時間計數細胞直至它們到達平臺期。實驗步驟材料無菌單層細胞培養,A549,Vem 或 HeLa-S3, 75 cm2?培養瓶,晚對數期 1 瓶0.25% 粗制胰蛋白酶,混合有 lOmmol/L EDTA 5 ml生長液,含 2 mmol/LNaHC03?200
骨骼肌細胞培養和肌細胞培養
骨骼肌細胞培養 1.殺死動物,無菌取大腿肌組織,切成0.3~0.5厘米小塊。 2.用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,無菌紗網或紗布濾過,合成培養基加10%小牛血清培養,為促進分化可加1%的胎汁。 3.細胞接種量為2×106/皿,接種在膠原或明膠的底物上能促進細胞分化
大鼠肝星狀細胞培養實驗——細胞培養技術
大鼠肝星狀細胞原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料雄性 SD 大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM
豬甲狀腺細胞培養實驗_細胞培養技術
實驗方法原理由于甲狀腺富含纖維性組織,所以甲狀腺的消化分離一般采用膠原酶與胰蛋白酶聯合消化法,用單一的胰蛋白酶消化效果一般;促甲狀腺激素(TSH)是培養甲狀腺細胞必備的,它能夠起到促進甲狀腺細胞生長的作用。實驗材料豬甲狀腺試劑、試劑盒F-12培養基胎牛血清胰蛋白酶膠原酶Ⅳ牛 TSH儀器、耗材眼科剪滴
特殊細胞培養實驗_球體細胞培養實驗
實驗方法原理大多數培養細胞都具有貼附在底物上生長成單層細胞的性質,如細胞長成片之后,讓細胞片與底物脫離,更換到使細胞不易貼附的底物上繼續生長時,則細胞片能卷聚成球體形,成為球體培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶儀器、耗材吸管實驗步驟1. ?瓊脂鋪底的培養瓶30 ml無菌培養瓶,每
細胞培養細胞培養的一般過程
一、準備工作準備工作對開展細胞培養異常重要,工作量也較大,應給予足夠的重視,準備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養箱及其他儀器的檢查與調試,具體內容可參閱有關文獻。二、取材在無菌
細胞培養培養基
絕大多數培養基是建立在平衡鹽溶液(BSS)基礎上,添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養物質。最廣泛應用的培養基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`s F12 也包括非必須氨基酸,維生素的范圍亦很廣,另外常規含有無機鹽和代謝添加劑(例如
LSCM細胞培養
細胞培養上述生化介導的質粒轉染方法是瞬時導入。這種方法使細胞能暫時但高水平表達目的蛋白。一般在轉染后?1 ~ 4d?內可獲得大量的表達蛋白。此外還有物理方法(電轉方法和顯微注射)和病毒介導的方法。當細胞用常規方法很難轉染(如原代細胞),或轉染試劑的毒性較大,這時可使用顯微注射?(microinjec
腫瘤細胞培養
腫瘤細胞在組織培養中占有核心的位置,首先癌細胞是比較容易培養的細胞。當前建立的細胞系中癌細胞系是最多的。另外腫瘤對人類是威脅最大的疾病。腫瘤細胞培養是研究癌變機理、抗癌藥檢測、癌分子生物學極其重要的手段。腫瘤細胞培養對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用。一、組織培養腫瘤細胞生物學特性腫瘤細胞與體內正
細胞培養FAQ
1 冷凍管應如何解凍??取出冷凍管后, 須立即放入37 °C 水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。2 細胞冷凍管解凍培養時, 是否應馬上去除DMSO??除少數特別
細胞培養實驗
貼壁細胞培養 懸浮細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞
腫瘤細胞培養
食管癌細胞株表達MMP-2:1.細胞種類:食管癌細胞株;2.培養的天數:2d;細胞倍增時間--24h左右;3.放大倍速:倒置熒光顯微鏡,100倍;4.培養基種類:1640+10%胎牛血清;5.細胞狀態與特征簡述:細胞貼壁生長;6.圖片目的:鑒定食管癌細胞表達MMP-2,胞漿中綠色熒光為MMP-2,細
細胞培養方法
一、準備工作 準備工作對開展細胞培養異常重要,工作量也較大,應給予足夠的重視,推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養箱及其他儀器的檢查與調試,具體內容可參閱有關文獻。 二、取材
細胞培養資料
第一章 細胞培養的基本原理與技術現代生物技術一般認為包括基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發酵工程技術,而這些技術的發展幾乎都與細胞培養有密切關系,特別是在醫藥領域的發展,細胞培養更具有特殊的作用和價值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產過程中很多是通過細胞培養來實現的。基因工程乙肝疫苗很多是以