靶細胞殺傷實驗：Cr51法
一、原理 用Na2 51 CrO 4 標記靶細胞，若待檢效應細胞能殺傷靶細胞，則51 Cr( 鉻) 從靶細胞內釋出。以γ計數儀測定釋出的51 Cr 放射活性，靶細胞溶解破壞越多，51 Cr 釋放就越多，上清液的放射活性也就越高，應用公式可計算出待檢效應細胞的殺傷活性。 二、步驟 （以CTL殺傷腫瘤細胞為例）： 1、效應細胞 將分離的外周血T細胞, 培養7d后按照DC:T = 1:10的比例分別加入自身細胞致敏DC,細胞系致敏DC及未致敏DC, 繼續培養3-4d后收集T細胞, 此即為效應細胞CTL. 2、靶細胞 分別收集1×106 Panc1以及從6例腫瘤組織中分離獲得的胰腺癌細胞(編號S1-S6), 重懸于0.5mL不含碳酸氫鈉的完全培養液. 加入3.7 MBq 51Cr鉻酸鈉, 37℃水浴中標記1 h, 洗滌細胞三次, 調整細胞濃度為5×104/mL.&......閱讀全文
靶細胞殺傷實驗：Cr51法
一、原理?用Na2 51 CrO 4 標記靶細胞，若待檢效應細胞能殺傷靶細胞，則51 Cr( 鉻) 從靶細胞內釋出。以γ計數儀測定釋出的51 Cr 放射活性，靶細胞溶解破壞越多，51 Cr 釋放就越多，上清液的放射活性也就越高，應用公式可計算出待檢效應細胞的殺傷活性。?二、步驟?（以CTL殺傷腫
法測效靶細胞殺傷——用流式細胞術
做免疫學特別是腫瘤學實驗，總免不了要測淋巴細胞或其他細胞對腫瘤細胞的殺傷，國外最常用的是Cr51放射實驗，但這個方法在國內的不少地方都不能做，而MTT這個方法又太老，而且也不準確，那么替代方法就用流式細胞術，又方便，又準確。 具體參照如下：1、計數靶細胞，并加入CFSE，使CFSE終濃度達到2uM,
靶細胞殺傷實驗：CFSE/PI法
做免疫學特別是腫瘤學實驗，總免不了要測淋巴細胞或其他細胞對腫瘤細胞的殺傷，老外最常用的是Cr51放射實驗，但這個方法在國內的不少地方都不能做，而MTT這個方法又太老了，而且也不準確，那么替代方法就用流式細胞術，又方便，又準確。1、計數靶細胞，并加入CFSE，使CFSE終濃度達到2uM，37度30分鐘
靶細胞殺傷實驗：CFSE/PI法
做免疫學特別是腫瘤學實驗，總免不了要測淋巴細胞或其他細胞對腫瘤細胞的殺傷，老外最常用的是Cr51放射實驗，但這個方法在國內的不少地方都不能做，而MTT這個方法又太老了，而且也不準確，那么替代方法就用流式細胞術，又方便，又準確。 1、計數靶細胞，并加入CFSE，使CFSE終濃度達到2u
免疫學細胞因子的定量檢測，Elispot酶聯斑點分析技術－四
ELISPOT?分析使單細胞分泌產物可視化。這些分析異常敏感，因為它是在直接在分泌細胞的周圍進行捕捉，而且是在表面被沖淡，或者被臨近的細胞上的受體捕獲，或降解之前。最低至1：100萬細胞精度的活體外頻率測量。這種分辨率已經遠遠超過使用細胞內細胞因子的四聚物染色和ELISA法測量的精度。這種高敏感度是
流式細胞術測效靶細胞殺傷實驗
做免疫學特別是腫瘤學實驗，總免不了要測淋巴細胞或其他細胞對腫瘤細胞的殺傷，老外最常用的是Cr51放射實驗，但這個方法在國內的不少地方都不能做，而MTT這個方法又太老了，而且也不準確，那么替代方法就用流式細胞術，又方便，又準確，這也是偶參照老外的方法吧。1 計數靶細胞，并加入CFSE，使CFSE終濃度
從鼠弓形蟲抗原致敏誘導抗弓形蟲感染的保護免疫應答
實驗概要通過注射在體外用TAg致敏過的來自于DC細胞的外質體，在體內誘導了弓形蟲屬特異性Th1分子免疫應答并獲得了抗弓形蟲感染的保護效應。研究證實致敏的DC衍生外質體能夠對鼠弓形蟲感染和其它某些病原感染產生免疫保護。這種無細胞疫苗對于人類疫苗策略是一種很有吸引力的保護工具。實驗材料動物：8-10周齡
從鼠弓形蟲抗原致敏的樹突狀細胞中分離的...
實驗概要通過注射在體外用TAg致敏過的來自于DC細胞的外質體，在體內誘導了弓形蟲屬特異性Th1分子免疫應答并獲得了抗弓形蟲感染的保護效應。研究證實致敏的DC衍生外質體能夠對鼠弓形蟲感染和其它某些病原感染產生免疫保護。這種無細胞疫苗對于人類疫苗策略是一種很有吸引力的保護工具。實驗材料動物：8-10周齡
bradford法和lowry法是什么法
bradford和lowry兩者都是生物檢驗的化學試劑。 bradford法，也稱考馬斯藍染色法（coomassie blue staining）。考馬斯亮藍G-250測定蛋白質含量屬于染料結合法的一種。考馬斯亮藍G-250在游離態下呈紅色，當它與蛋白質的疏水區結合后變為青色，前者最大光吸收在
bradford法和lowry法是什么法
bradford和lowry兩者都是生物檢驗的化學試劑。 bradford法，也稱考馬斯藍染色法（coomassie blue staining）。考馬斯亮藍G-250測定蛋白質含量屬于染料結合法的一種。考馬斯亮藍G-250在游離態下呈紅色，當它與蛋白質的疏水區結合后變為青色，前者最大光吸收在
四聚體——抗原特異性T細胞檢測金標準
實驗概要 抗原特異性T細胞在細胞免疫應答中發揮著核心作用，因此定量測定抗原特異性T細胞數量在判定機體細胞免疫功能方面提供重要的信息。傳統的抗原特異性T細胞功能檢測方法有經典的Cr51釋放試驗、有限稀釋法（LDA）、酶聯免疫斑點試驗（ELISPOT）等，但是這些方法或多或少都存在操作繁瑣、檢測結果誤差
沉淀法、過濾法、蒸餾法的區別
一沉淀法：固液分離。有時為了加速沉淀，可以加入一些凝聚劑，如明礬、活性炭等。二過濾法：固液分離。但是固體必須是不溶于水的才行。三蒸餾法：液液分離。利用沸點不同，沸點低的先蒸餾出來，沸點高的后蒸餾出來。
Folin—酚試劑法（Lowry法）
實驗概要本文介紹了Folin—酚試劑法（Lowry法）測定蛋白質的實驗原理、操作步驟及注意事項等。實驗原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法，由于其試劑乙的配制較為困難，近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的，只是加入了第二種試劑，即Fol
外標法與內標法
? 一、內標法 什么叫內標法？怎樣選擇內標物？ 內標法是一種間接或相對的校準方法。在分析測定樣品中某組分含量時，加入一種內標物質以校誰和消除出于操作條件的波動而對分析結果產生的影響，以提高分析結果的準確度。 內標法在氣相色譜定量分析中是一種重要的技術。使用內標法時，在樣品中加入一定量的標準物質
內標法與外標法
一、內標法 什么叫內標法?怎樣選擇內標物? 內標法是一種間接或相對的校準方法。在分析測定樣品中某組分含量時，加入一種內標物質以校誰和消除出于操作條件的波動而對分析結果產生的影響，以提高分析結果的準確度。 內標法在氣相色譜定量分析中是一種重要的技術。使用內標法時，在樣品中加入一定量的標準物質，它可被
氣相法液相法固相法優缺點
氣相法液相法固相法優點：分離效率高，分析速度快，樣品用量少和檢測靈敏度高。選擇性好，可分離、分析恒沸混合物，沸點相近的物質，某些同位素，順式與反式異構體鄰、間、對位異構體，旋光異構體等。氣相法液相法固相法缺點：分析成本高，液相色譜儀價格及日常維護費用貴，分析時間一般比氣相長。檢測器氣相色譜法中可以使
色譜定量方法：標準加入法內標法外標法
色譜分析的重要作用之一是對樣品定量。而色譜法定量的依據是：組分的重量或在載氣中的濃度與檢測器的響應信號成正比。常見定量分析方法分為面積歸一化法、內標法、外標法等。大家常常容易傻傻分不清楚的莫過于內標法、外標法了。 以內標法為例，選一與欲測組分相近但能完全分離的組分做內標物（當然是樣品中沒有的組
可見異物檢查法第一法(燈檢法)
取規定量供試品,除去容器標簽,擦凈容器外壁,必要時將藥液轉移至潔凈透明的適宜容器內,將供試品置遮光板邊緣處,在明視距離(指供試品至人眼的清晰觀測距離,通常為25cm),手持容器頸部,輕輕旋轉和翻轉容器(但應避免產生氣泡),使藥液中可能存在的可見異物懸浮,分別在黑色和白色背景下目視檢查,重復觀察,總檢
峰面積歸一法、內標法、外標法區別
色譜定量分析方法可以分為外標法、內標法、歸一化法三大類。當能夠精確進樣量的時候，通常采用外標法進行定量。這種方法標準物質單獨進樣分析，從而確定待測組分的校正因子；實際樣品進樣分析后依據此校正因子對待測組分色譜峰進行計算得出含量。其特點是標準物質和未知樣品分開進樣，雖然看上去是二次進樣，但實際上未知樣
各顯神通！淺談歸一化法、內標法、外標法及標準加入法
面積歸一法、內標法、外標法、標準加入法。這么多定量法，用哪一種呢？每一種的適用范圍是什么呢？其優缺點又是什么？其標準物又有什么要求呢？看完你就都知道了。 1、歸一化法 把所有出峰的組分含量之和按100%計的定量方法，稱為歸一化法，各成分校正因子一致時可用該法。 歸一化法的優點： 該法簡便
四聚體——抗原特異性T細胞檢測金標準
實驗概要 ?? ? ?抗原特異性T細胞在細胞免疫應答中發揮著核心作用，因此定量測定抗原特異性T細胞數量在判定機體細胞免疫功能方面提供重要的信息。傳統的抗原特異性T細胞功能檢測方法有經典的Cr51釋放試驗、有限稀釋法（LDA）、酶聯免疫斑點試驗（ELISPOT）等，但是這些方法或多或少都存在操作繁瑣、
淺談歸一化法、內標法、外標法及標準加入法區別很重要！
1.歸一化法 把所有出峰的組分含量之和按100%計的定量方法，稱為歸一化法。 各成分校正因子一致時可用該法，該法簡便、準確，特別是進樣量不容易準確控制時，進樣濃度及進樣量的變化的影響很小。 其他操作條件，如流速、柱溫等變化對定量結果的影響也很小。GC應用廣于HPLC。
消化道接種法、鼻腔接種法及角膜接種法
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒病毒試劑儀器、耗材注射器實驗步驟消化道接種。在分離腹瀉病毒或經由消化道病毒感染的研究中，可采用灌胃接種法將所接種的臨床標本或病毒用灌胃器灌到動物胃內。抓取固定小鼠，用灌胃器吸取接種物，將灌胃針從鼠的口腔插入，使口腔與食道成一條直線，再將灌胃針沿咽后壁慢慢插入食道，可感到輕
動態色譜法和靜態法
動態色譜法是將待測粉體樣品裝在U型的樣品管內，使含有一定比例吸附質的混合氣體流過樣品，根據吸附前后氣體濃度變化來確定被測樣品對吸附質分子準確度差、對設備要求很高等缺陷已很少使用。另一種可行的方法是采用CO2作吸附質在室溫進行吸附，可以無需分子渦輪泵級的真空度。可以很方便的得到比表面積、微孔孔徑、微孔
藥物鑒別法薄層色譜鑒別法
薄層色譜鑒別法薄層色譜法鑒別原理為同一種藥物在同樣條件下的薄層色行為相同。一般采用對照品(或標準品)比較法,將供試品和對照品(或標準品)按藥典規定,用同種溶劑配成同樣濃度的溶液。在同一層板上點樣、展開、顯色,要求供試品斑點應與對照品(或標準品)斑點的位置(Rf)和顏色一致。薄層色譜法簡單易行,適用于
氣相色譜法—內標法
1）什么叫內標法?內標法是一種間接或相對的校準方法。在分析測定樣品中某組分含量時，加入一種內標物質以校誰和消除出于操作條件的波動而對分析結果產生的影響，以提高分析結果的準確度。2）怎樣選擇內標物?內標法在氣相色譜定量分析中是一種重要的技術。使用內標法時，在樣品中加入一定量的標準物質，它可被色譜拄所分
藥物鑒別法呈色反應鑒別法
呈色反應鑒別法是指供試品溶液中加入適當的試劑溶液,在一定條件下進行反應,生成易于觀測的有色產物。在鑒別試驗中最為常用的呈色反應類型有以下幾個。(1)三氯化鐵呈色反應:應用于含有酚羥基或水解后產生酚羥基的藥物,如水楊酸及其鹽。(2)異羥肟酸鐵反應:應用于含有芳酸、芳酸酯或酰胺的藥物,如β-內酰胺類。(
氣相色譜法—內標法
什么叫內標法?怎樣選擇內標物?內標法是一種間接或相對的校準方法。在分析測定樣品中某組分含量時，加入一種內標物質以校誰和消除出于操作條件的波動而對分析結果產生的影響，以提高分析結果的準確度。內標法在氣相色譜定量分析中是一種重要的技術。使用內標法時，在樣品中加入一定量的標準物質，它可被色譜拄所分離，又不
足跡法
High Resolution Genetic Footprinting?(Stanford)Genetic footprinting is a technique for high-resolution mapping of the functional organization of a clo
重量法
一、定義 ????根據單質或化合物的重量，計算出在供試品中的含量的定量方法稱為重量法 二、原理 ????采用不同方法分離出供試品中的被測成分，稱取重量，以計算其含量。按分離方法不同，重量分析分為沉淀重量法、揮發重量法和提取重量法。 三、沉淀重量法 （一）原理 ????被測成分與試劑作用，生成組成固定