GFP與YFP有哪些區別
YFP和GFP其實是序列基本相同的兩種蛋白，YFP就是把Thr203以Tyr取代，GFP則不發出綠色熒光，而發出較長波長的黃色熒光，也就是YFP。因此兩者最大的區別則是發射波長了。我覺得這兩種蛋白標記應該都沒有問題，只是有幾個問題應該考慮：1. 應該標記在C端，一般的核定位序列均位于蛋白N端，如果將GFP或者YFP標記在N端很可能影響核定位；2. 取決于你的核探針，如果是紅色的探針，選用GFP比較經典，兩者疊合的橙色也是很多文獻上常采用的。但如果是藍色的探針，則選用黃色比較容易區分一點，比較好看，不過做這個的好像也不太多。最后還有一點就是GFP的質粒比較多，很多還有EGFP序列，比如我們實驗室的EGFP熒光就非常好看，所以我還是建議你選經典的GFP\EGFP。祝實驗順利。......閱讀全文
yfp激發光波長和YFP的發射波長是多少？
YFP激發波長為510nm，更大發射波長為527 nm黃色熒光蛋白（Yellow Fluorescent Protein ，YFP）可以看做GFP.html' target='_blank' title='綠色熒光蛋白' >綠色熒光蛋白的一種突變體，最初來源于
GFP與YFP有哪些區別
YFP和GFP其實是序列基本相同的兩種蛋白，YFP就是把Thr203以Tyr取代，GFP則不發出綠色熒光，而發出較長波長的黃色熒光，也就是YFP。因此兩者最大的區別則是發射波長了。我覺得這兩種蛋白標記應該都沒有問題，只是有幾個問題應該考慮：1. 應該標記在C端，一般的核定位序列均位于蛋白N端，如果將
GFP與YFP有哪些區別
YFP和GFP其實是序列基本相同的兩種蛋白，YFP就是把Thr203以Tyr取代，GFP則不發出綠色熒光，而發出較長波長的黃色熒光，也就是YFP。因此兩者最大的區別則是發射波長了。我覺得這兩種蛋白標記應該都沒有問題，只是有幾個問題應該考慮：1. 應該標記在C端，一般的核定位序列均位于蛋白N端，如果將
GFP抗體|GFP抗體檢測GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP抗體
檢測GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP的GFP抗體GFP是綠色螢光蛋白（Green Fluorescent Protein）的簡稱，由238個氨基酸殘基組成。GFP蛋白質最早是由下村脩等人在1962年在一種學名Aequorea victoria的水母中發現。其基因所產生的蛋白質，在藍色波長范
熒光共振能量轉移（FRET）
一、活細胞研究遇到的問題：蛋白質或其他分子在活細胞內互相結合的時間和地點是了解它們功能的關鍵問題。要回答這一問題，需將蛋白質標上不同的熒光團。但是，光學顯微鏡的分辨率將蛋白質檢測精度限制在大約0.2μm左右。要研究蛋白質成分的相互物理作用，需要高的分辨率。二、什么是FRET？FRET就是采用非放射方
細胞共定位
實驗概要本實驗子在構建了中間載體pA7-CFP和pA7-YFP的基礎上，構建了pA7- CFP- AtCOP1，pA7-AtCRY1-YFP，pA7- CFP-OsCOPl和pA7-OsCRY1b-YFP載體。利用基因槍將重組質粒轟擊入洋蔥內表皮。主要試劑高保真聚合酶(pfu ultra)，限制性內
細胞共定位
實驗試劑?高保真聚合酶(pfu ultra)，限制性內切酶(XhoI、SpeI、BamHI、SpeI、SacI)，金粉，無水乙醇，2.5MCaCl2?，20ul 0.1M亞精胺實驗設備?PCR擴增儀，PDS-1000/He型基因槍，激光共聚焦顯微鏡(Carl Zeiss LSM 510 )實驗材料?
生物大分子相互作用檢測技術新進展
熒光共振能量轉移 (fluorescence resonance energy transfer，FRET)，是指能量從一種受激發的熒光基團 (fluorophore)以非輻射的方式轉移到另一種熒光基團的物理現象。FRET的能量轉移效率是兩個熒光基團間距離的函數，并對此距離十分敏感，它的有效
方案8－用－FRET－法分析體內蛋白質的相互作用實驗
實驗材料a-GFP 抗體編碼 CFP 和 YFP 的 DNA酵母細胞株系試劑、試劑盒分子生物學試劑合成的完全液體培養基酵母操作試劑編碼目標內源蛋白的 DNA 片段儀器、耗材濾光鏡裝置圖像分析軟件顯微鏡設備分子生物學和酵母操作用的標準設備實驗步驟一、實驗設計因為體內 FRET 實驗的復雜性，要獲得有效
何為熒光共振能量轉移技術
一、FRET技術基本原理熒光共振能量轉移是指兩個熒光發色基團在足夠靠近時，當供體分子吸收一定頻率的光子后被激發到更高的電子能態，在該電子回到基態前，通過偶極子相互作用，實現了能量向鄰近的受體分子轉移（即發生能量共振轉移）。FRET是一種非輻射能量躍遷，通過分子間的電偶極相互作用，將供體激發態能量轉移
exFoxp3－Th17細胞對自身免疫關節炎的作用機制研究（一）
“我是誰?我從哪里來?我要到哪里去？” 是柏拉圖提出的經典哲學三大問，小編每天早上起床前都要用這個問題叫醒我沉睡的靈魂。在本期帶來的經典文獻回顧中，請跟隨本文作者一起聽一聽ex Foxp3 TH17細胞的深刻哲學獨白吧！一、故事背景自身免疫性疾病通常由調節性T細胞（Treg細胞）和產生干擾素17的輔
采用PCR技術插人表位標記物
? ?許多表達載體可能沒有能夠克隆標記物的合適的限制性酶切位點。在這種情況下，采用PCR技術將多肽標記物插入到已經克隆化的開放閱讀框。在設計PCR正向和反向引物時，可引入較長的片段以在蛋白的氨基或羧基末端引入多肽標記物。，選擇用于編碼標記物特定氨基酸的密碼子，使其能夠用于表達標記蛋白的生物系統中。引
關于黃色熒光蛋白的基本介紹
黃色熒光蛋白（Yellow Fluorescent Protein ，YFP）可以看做綠色熒光蛋白的一種突變體，最初來源于維多利亞多管水母（ Aequorea victoria）。相對于綠色熒光蛋白，其熒光向紅色光譜偏移，而這主要是由于蛋白203位蘇氨酸變為酪氨酸。其最大激發波長為514 nm，
正置熒光顯微鏡的技術指標
1全電動正置熒光顯微鏡。具有明場,暗場,熒光,DIC觀察附件2鹵素燈透射光照明,長效熒光光源3物鏡5個,熒光物鏡5X,平場復消色差10X0.45，20X0.8，40X1.2水鏡，100X1.4油鏡,目鏡10X234濾光片8套dapi，CFP YFP GFP RFP cy3 cy5,cfp-yfp
雙色同步成像在熒光共定位等成像實驗中的應用（二）
雙色同步成像——一臺Flash 4.0?LT相機作兩臺用?采用W-View?GEMINI這樣的雙色分光附件將兩種顏色的信號成像到一臺相機的一個感光芯片上很好地解決了同步成像的時間問題，但對于絕大多數的相機，整個感光芯片只能設置一個曝光時間，當兩個顏色的信號強度相差較大時將很難同時將兩個顏色的成像信噪
基于鈣調素與熒光蛋白融合的鈣指示劑實驗
基于鈣調素與熒光蛋白融合的鈣指示劑 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 PRSETB 細菌表達質粒 HeLa 細胞株
基于鈣調素與熒光蛋白融合的鈣指示劑實驗
實驗材料?PRSETB 細菌表達質粒HeLa 細胞株試劑、試劑盒?苯甲基橫酰基氟化物EGTA 緩沖液氯化鈣緩沖液儀器、耗材?超聲發生器熒光光譜儀實驗步驟?本文中描述的方法涵蓋了變色子在細菌及真核細胞里的克隆與表達（見 4.3.1 )，變色子的生物化學和生物物理特征鑒定（見 4.3.2 )，以及通過
基于鈣調素與熒光蛋白融合的鈣指示劑實驗
鈣調素（CaM) 是普遍分布的蛋白質，參與鈣介入的信號轉導。當 Ca2+ 流入時，CaM 獲得強親和力，結合各種帶有一個或多個CaM 識別序列的胞內蛋白，啟動或終止 Ca2+ 調控的信號串聯。本實驗來源「現代蛋白質工程實驗指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒編著。實驗材料PRSETB 細菌表達質
競爭性分析Epitope－Mapping實驗方法
ABSTRACTThe simplest way to determine whether two monoclonal antibodies bind to distinct sites on a protein antigen is to carry out a competition assa
黃色熒光蛋白的結構和功能特點
黃色熒光蛋白（Yellow Fluorescent Protein ，YFP）可以看做綠色熒光蛋白的一種突變體，最初來源于維多利亞多管水母（ Aequorea victoria）。相對于綠色熒光蛋白，其熒光向紅色光譜偏移，而這主要是由于蛋白203位蘇氨酸變為酪氨酸。其最大激發波長為514 nm，最大
黃色熒光蛋白的概念
黃色熒光蛋白（Yellow Fluorescent Protein ，YFP）可以看做綠色熒光蛋白的一種突變體，最初來源于維多利亞多管水母（ Aequorea victoria）。相對于綠色熒光蛋白，其熒光向紅色光譜偏移，而這主要是由于蛋白203位蘇氨酸變為酪氨酸。其最大激發波長為514 nm，最大
研究發現小鼠卵巢內存在雌性生殖干細胞
中科院昆明動物研究所鄭萍課題組采用了體內細胞示蹤技術，提供了支持生理條件下哺乳動物卵巢中存在生殖干細胞的活動及卵細胞再生的首個體內證據。研究成果近日在線發表于《分子人類生殖學》。 經典理論認為哺乳動物出生時卵巢已形成了終生所需的原始卵泡，出生后沒有卵細胞的再生。然而，近來一些研究對經典理論提出
黃色熒光蛋白的應用
像綠色熒光蛋白一樣，YFP是細胞生物學和分子生物學中一種非常常用的報告基因。目前，有三種改良的黃色熒光蛋白： Citrine, Venus, and Ypet。這三種改良的蛋白熒光更亮，更穩定，而且成熟更快，因此應用廣泛。黃色熒光蛋白最常用于熒光共振能量轉移，作為熒光能量的接受體（acceptor）
植物多光譜熒光成像系統的廣泛應用
植物多光譜熒光成像系統可用于葉綠素熒光動態成像分析、多激發光光合效率成像分析、紫外光激發多光譜熒光成像分析、PAR吸收與NDVI（植物光譜反射指數）成像分析、GFP/YFP穩態熒光成像等，全面、非接觸、高靈敏度反映植物生理生態、脅迫生理與抗性、光合效率等。Fluorcam植物多光譜熒光成像系統廣
植物多光譜熒光成像系統多激發光、多光譜熒光成像技術
多激發光、多光譜熒光成像技術：通過光學濾波器技術，僅使特定波長的光（激發光）到達樣品以激發熒光，同時僅使特定波長的激發熒光到達檢測器。不同的熒光發色團（如葉綠素或GFP綠色熒光蛋白等）對不同波長的激發光“敏感”并吸收后激發出不同波長的熒光，根據此原理可以選配2個或2個以上的激發光源、濾波輪及相應
LVF光柵在FRET和BRET分析中的優異表現
在多功能酶標儀中，為了分離某一特定波長的單色光我們有兩種技術選擇——濾光片或者光柵。與光柵相比，濾光片系統往往具有更好的靈敏度，因為濾光片具有更好的透光率和更寬的帶寬。而光柵系統的好處是可以提供波長選擇的靈活性，不需要購買或安裝特定波長的濾光片。盡管如此，很多用戶都發現許多應用在光柵系統上達不到理想
exFoxp3－Th17細胞對自身免疫關節炎的作用機制研究
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FluorCam多光譜熒光成像技術介紹
FluorCam多光譜熒光成像系統作為FluorCam葉綠素熒光成像系統的最高級型號，是目前唯一有能力實現了一臺儀器上同時完成葉綠素熒光、UV-MCF多光譜熒光、NDVI歸一化植被指數以及GFP、YFP、BFP、RFP、CFP、DAPI等熒光蛋白與熒光染料的成像分析功能。同時也可以加裝RGB真彩成像
亞細胞定位用熒光顯微鏡能看到嗎
目前進行亞細胞定位研究，提取擬南芥(Arabidopsis thaliana)(Arabidopsis thaliana)葉肉原生質體進行PEG轉化。研究目標采用GFP/YFP融合蛋白，但是在LSM710觀察時，葉綠體有很明顯的背景，盡管有些細胞是明顯看到了GFP熒光，遠遠強于葉綠體背景，但是拍的照
Yeast基因文庫的分類和選擇
文庫種類Dharmacon酵母資源包括多個酵母基因組文庫，包括ORF文庫、基因敲除（Knock Out）菌株、蛋白質相互作用文庫、突變菌株和各種篩選文庫等。除此之外，Dharmacon 針對Saccharomyces cerevisiae 研究領域提供了Zoonome siRNA 文庫。酵母