高效液相色譜自動進樣器的相關介紹
樣品在進樣前必須經過適當的預先處理,需要經過亞微米濾膜的過濾或者離心,防止樣品中的微小顆粒堵塞管路,最好使用流動相作為溶劑配制樣品,所用溶劑應該對樣品有較好的溶解性。 針座是喇叭口朝上暴露在空氣中的,有時空氣中的較大灰塵顆粒可能恰好落在針座的流路內而引起針座的堵塞。這時候可以嘗試卸下針座,將它接在泵的出口上反沖,一般能解決問題。 如果經常使用緩沖溶液,除了泵頭之外,ALS計量泵的柱塞及密封圈,六通閥的轉子密封圈和定子密封圈應該定期清洗,防止有鹽的顆粒磨損ALS一定要使用Agilent的樣品瓶及瓶蓋;使用不兼容的或者加工精度差的樣品瓶及瓶蓋會引起ALS故障率的增加及性能的降低。......閱讀全文
高效液相色譜自動進樣器的相關介紹
●體積可變的自動進樣器 這種體積可變的自動進樣器提供了一個表現出色的,高度靈活的可變體積LC樣品處 理系統。標準單元有120 個采樣管,可提供多種進樣模式,可隨機抽取樣品管,可再利 用標準曲線,可長期保存4個進樣方法。 ●惰性自動進樣器 惰性自動進樣器具備了可變體積進樣器所有的特征。但
高效液相色譜自動進樣器的相關介紹
樣品在進樣前必須經過適當的預先處理,需要經過亞微米濾膜的過濾或者離心,防止樣品中的微小顆粒堵塞管路,最好使用流動相作為溶劑配制樣品,所用溶劑應該對樣品有較好的溶解性。 針座是喇叭口朝上暴露在空氣中的,有時空氣中的較大灰塵顆粒可能恰好落在針座的流路內而引起針座的堵塞。這時候可以嘗試卸下針座,將它
高效液相色譜的液液分配的相關介紹
流動相和固定相都是液體。流動相與固定相之間應互不相溶(極性不同,避免固定液流失),有一個明顯的分界面。當試樣進入色譜柱,溶質在兩相間進行分配。達到平衡時,服從于高效液相色譜計算公式: 式中,cs—溶質在固定相中濃度;cm—溶質在流動相中的濃度; Vs—固定相的體積;Vm—流動相的體積。LLPC
高效液相色譜的內標法的相關介紹
采用不加校正因子的峰面積法。取供試品,按各品種項下規定的方法配制不含內標物質的供試品溶液,注入儀器,記錄色譜圖Ⅰ;再配制含有內標物質的供試品溶液,在同樣的條件下注樣,記錄色譜圖Ⅱ。記錄的時間除另有規定外,應為該品種項下規定的內標峰保留時間的倍數,色譜圖上內標峰高應為記錄儀滿標度的30%以上,否則
高效液相色譜的外標法的相關介紹
按各品種項下的規定,精密稱(量)取對照品和供試品,配制成溶液,分別精密取一定量,注入儀器,記錄色譜圖,測量對照品和供試品待測成分的峰面積(或峰高),按下式計算含量: A 含量(mx)=mr×-Ar式中各符號意義同上 由于微量注射器不易精確控制進樣量,當采用外標法測定供試品中某雜質或主成分含量
有關高效液相色譜分析的相關介紹
系統適用性 按各品種項下要求對儀器進行適用性試驗,即用規定的對照品對儀器進行試驗和調整,應達到規定的要求;或規定分析狀態下色譜柱的最小理論板數、分離度和拖尾因子. 色譜柱 在選定的條件下,注入供試品溶液或各品種項下規定的內標物質溶液,記錄色譜圖,量出供試品主成分或內標物質峰的保留時間t(R
高效液相層析的相關介紹
高效液相層析(又名高壓液相色譜),70年代新發展的層析法。其特點是:用高壓輸液泵,壓強最高可達5000psi(相當于34個標準大氣壓)。高效液相色譜法是在經典色譜法的基礎上,引用了氣相色譜的理論,在技術上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達3.5萬KPa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填
高效液相色譜的性質介紹
高效液相色譜(High Performance Liquid Chromatography簡稱HPLC)又稱高速或高壓液相色譜。該方法是吸收了普通液相層析和氣相色譜的優點,經過適當改進發展起來的。它既有普通液相層析的功能(可在常溫下分離制備水溶性的物質),又有氣相色譜的特點(即高壓,高速,高分辨
高效液相色譜的應用介紹
高效液相色譜應用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領域。 (1)分離混合物 高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。 通過與試樣預處理技術相配合,高效液相
關于高效液相色譜的過濾器的相關介紹
?檢查溶劑過濾器 查看過濾器是否變色(尤其是盛放水相的溶劑瓶)–擰開脫氣機出口或比例閥入口管線,此時溶劑會因為重力流出。當脫氣機或溶劑過濾頭堵塞時,溶劑會流出不暢或不流出–臨時取下過濾器,檢查柱前壓力是否正常。 ?清潔溶劑過濾器 將堵塞的溶劑過濾器從瓶頭組件中拿下,用水沖洗殘留之溶劑,然后
高效液相色譜之高效反相液相色譜(一)
反相色譜(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式,任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分,這部分越大,一般保留值越高,在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式,在生物大分子的反相液相色
高效液相色譜之高效排阻液相色譜
高效液相色譜(High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC)又叫高壓、高速、近代液相色譜,通常叫做高效液相色譜。它是60年代中期才建立的一種高效快速分離化合物的方法,到了70年代后期才廣泛用于蛋白質的分離純化方面,現已成為分離純化蛋白質非常有效的方
高效液相色譜之高效反相液相色譜(二)
附:色譜柱操作說明,(以迪馬公司Diamonsil(TM)柱為例)1. 色譜柱常規參數訂貨號:Catalog.No. ? ? ? ? ? ? 產品ZL號 Serial No.出廠日期 ?Date填料 ?Column Paking ? ? 如,Diamonsil(TM)鉆石C18 5цm柱規格 Col
高效液相色譜自動進樣器的性能參數
性能參數 進樣瓶容量:3個可移動托盤120個進樣瓶 ★可變體積 進樣精確度:
高效液相色譜的歷史起源介紹
1960年代,為了分離蛋白質、核酸等不易汽化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭、哈伯、荷瓦斯、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。高效液相色譜使用粒徑更細的固定相填充色譜柱,提高色譜柱的塔板數,以高壓驅動流動
關于高效液相色譜的歷史介紹
1903年俄國植物化學家茨維特(Tswett)首次提出“色譜法”(Chromatography)和“色譜圖”(Chromatogram)的概念。茨維特使用色譜法 chromatography (來自希臘字, chroma 意思是顏色, graphy 意思是記錄 ?-直譯為顏色記錄)來描述他的彩色
關于高效液相色譜的特點介紹
高效液相色譜法有“四高一廣”的特點: ①高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。 ②高速:分析速度快、載液流速快,較經典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小于1小時。 ③高效:分離效
關于高效液相色譜的液液分配原理介紹
(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化學鍵合相色譜(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流動相和固定相都是液體。流動相與固定相之間應互不相溶(極性不同,避免固定液流失),有一個明顯的分界面。當試樣進入色譜
液相色譜的分類和高效液相色譜用途
制備型加壓液相色譜,按照色譜柱和樣品量的大小,分為:(1)低壓液相色譜;(2)中壓液相色譜;(3)高壓液相色譜;(4)快速色譜。低壓、中壓與高壓液相色譜的壓力范圍之間會存在一定交疊,沒有統一、明確的標準。 1、快速色譜 柱壓通常為2bar(或30psi)左右,對于那些容易分離的簡單混
高效液相色譜的色譜柱
填料和流動相的組分應按各品種項下的規定,常用的色譜柱填料有硅膠和化學鍵合硅膠。后者以十八烷基硅烷鍵合硅膠最為常用辛基鍵合硅膠次之,氰基或氨基鍵合硅膠也有使用;離子交換填料用于離子交換色譜;凝膠或玻璃微球等,用于分子排阻色譜等。注樣量一般為數微升。除另有規定外,柱溫為室溫,檢測器為紫外吸收檢測器。在用
高效液相層析的分離系統相關介紹
該系統包括色譜柱、連接管和恒溫器等。色譜柱一般長度為10~50cm(需要兩根連用時,可在二者之間加一連接管),內徑為2~5mm,由"優質不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成,住內裝有直徑為5~10μm粒度的固定相(由基質和固定液構成).固定相中的基質是由機械強度高的樹脂或硅膠構成,它們都有惰性(
高效液相色譜分析的檢測器的相關介紹
⑴紫外光度檢測器 它的作用原理是基于被分析試樣組分對特定波長紫外光的選擇性吸收,組分濃度與吸光度的關系遵守比爾定律。最常用的檢測器,應用最廣,對大部分有機化合物有響應。 特點: a.靈敏度高:其最小檢測量10-9g·mL-1,故即使對紫外光吸收很弱的物質,也可以檢測; b. 線性范圍寬;
高效液相色譜分類
按照分離原理分類,大概可以分為:1.吸附色譜:基于各組分對固定相的吸附能力不同而實現分離的方法。比較常見的色譜柱是火星硅膠、氧化鋁、活性炭、聚乙烯、聚酰胺等。用于測定結構異構體。2.分配色譜:基于樣品在流動相和固定相之間溶解度不同的原理實現分離。比較常見的正相氰基柱(正相)和極為普遍的C18色譜柱(
高效液相色譜原理
以高壓下的液體為流動相,并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。構造可分為高壓輸液泵,色譜柱,進樣器,檢測器以及數據獲取與處理系統等部分。與氣相色譜法相比,液相色譜法不受樣品揮發性和熱穩定性及相對分子質量的限制,只要求把樣品制成溶液即可,非常適合于分離生物大分子、離子型化合物,不穩定的天然產物以
高效液相色譜積分
正常操作不建議手工積分,手工積分會人為的帶來誤差,同一次測定的對照品和樣品的色譜圖最好是在設定一個固定的積分條件進行積分計算,積分參數一致的情況下進行可減少人為主觀意識上的誤差。
高效液相色譜原理
液相色譜儀是一款以用戶為核心的智能化的色譜儀,具有常規HPLC的基本性能,并擴展了更多智能化的功能,能很好的滿足用戶的各類不同的應用要求,使用戶能更加輕松的使用,并獲得準確的分析數據。一、原理:高效液相色譜法的原理是在原始的經典色譜法基礎上面引用氣象色諧的理論,色譜柱則是用特殊的方式用小顆粒裝填而成
高效液相色譜原理
液相色譜儀是一款以用戶為核心的智能化的色譜儀,具有常規HPLC的基本性能,并擴展了更多智能化的功能,能很好的滿足用戶的各類不同的應用要求,使用戶能更加輕松的使用,并獲得準確的分析數據。一、原理:高效液相色譜法的原理是在原始的經典色譜法基礎上面引用氣象色諧的理論,色譜柱則是用特殊的方式用小顆粒裝填而成
高效液相色譜技術
高效液相色譜(HPLC:High Performance Liquid Chromatography )是化學、生物化學與分子生物學、醫藥學、農業、環保、商檢、藥檢、法檢等學科領域與專業最為重要的分離分析技術,是分析化學家、生物化學家等用以解決他們面臨的各種實際分離分析課題必不可缺少的工具。國際市場
高效液相色譜柱
一、怎樣選擇色譜柱?現代高效液相色譜中,分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬,要做合適的選擇,必須對此有一定的認識和了解。?(1)硅膠基質填料:?1、正相色譜?正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團,如胺基團(NH2,APS)和氰基團(
高效反相液相色譜
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 反相色譜(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式,任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分,這部分越大,一般保留值越高