植物體細胞雜交的過程介紹
將植物細胞A與植物細胞B用纖維素酶和果膠酶處理,得到不含細胞壁的原生質體A和原生質體B,運用物理方法或是化學方法誘導融合,形成雜種細胞,再利用植物細胞培養技術將雜種細胞培養成雜種植物體。 ①雜交時間:植物細胞雜交是從細胞融合開始,到培育成的新植物體結束。 a.原生質體制備:用酶解法去除細胞壁(纖維素酶和果膠酶) b.原生質體融合:膜融合(高鈣、高pH誘導融合)、核融合(雜種細胞第一次有絲分裂時融合) PEG誘導融合的特點:其優點是融合成本低,勿需特殊設備;融合子產生的異核率較 高;融合過程不受物種限制。其缺點是融合過程繁瑣,PEG可能對細胞有毒害。 PEG的作用機理: Kao等認為,由于PEG分子具有輕微的負極性,故可以與具有正極 性基團的水、蛋白質和碳水化合物等形成H鍵,從而在原生質體之間形成分子橋,其 結果是使原生質體發生粘連進而促使原生質體的融合;另外,PEG能增加類脂膜的流動 性,也使原生質體的核、......閱讀全文
植物體細胞雜交的過程介紹
將植物細胞A與植物細胞B用纖維素酶和果膠酶處理,得到不含細胞壁的原生質體A和原生質體B,運用物理方法或是化學方法誘導融合,形成雜種細胞,再利用植物細胞培養技術將雜種細胞培養成雜種植物體。 ①雜交時間:植物細胞雜交是從細胞融合開始,到培育成的新植物體結束。 a.原生質體制備:用酶解法去除細胞壁
植物體細胞雜交的過程
將植物細胞A與植物細胞B用纖維素酶和果膠酶處理,得到不含細胞壁的原生質體A和原生質體B,運用物理方法或是化學方法誘導融合,形成雜種細胞,再利用植物細胞培養技術將雜種細胞培養成雜種植物體。①雜交時間:植物細胞雜交是從細胞融合開始,到培育成的新植物體結束。a.原生質體制備:用酶解法去除細胞壁(纖維素酶和
植物體細胞雜交的分類介紹
根據融合時細胞的完整程度,原生質體融合可分為兩大類: 對稱融合(symmetric fusion)-即兩個完整的細胞原生質體融合。 非對稱融合(asymmetric fusion)-利用物理或化學方法使某親本的核或細胞質失活后再進行融合,它可以分為幾種: 用于細胞核或細胞質失活的方法分為物
植物體細胞雜交的相關介紹
植物體細胞雜交(plant somatic hybridization),又稱原生質體融合(Protoplast fusion )是指將植物不同種、屬,甚至科間的原生質體通過人工方法誘導融合,然后進行離體培養,使其再生雜種植株的技術。植物細胞具有細胞壁,未脫壁的兩個細胞是很難融合的,植物細胞只有
植物體細胞雜交的融合方法介紹
1.PEG誘導融合法? PEG誘導融合的特點:其優點是融合成本低,勿需特殊設備;融合子產生的異核率較高;融合過程不受物種限制。其缺點是融合過程繁瑣,PEG可能對細胞有毒害。? PEG的作用機理: Kao等認為,由于PEG分子具有輕微的負極性,故可以與具有正極性基團的水、蛋白質和碳水化合物等形成H鍵,
植物體細胞雜交
植物體細胞雜交是指用兩個來自不同植物的體細胞融合成一個雜種細胞,并且把雜種細胞培育成新的植物體的方法。植物體細胞雜交的第一步是去掉細胞壁,分離出有活力的原生質體。去除細胞壁的常用方法是酶解法,即用纖維素酶和果膠酶等分解植物細胞的細胞壁。第二步是將兩個具有活力的原生質體放在一起,通過一定的技術手段進行
植物體細胞雜交的概念
植物體細胞雜交(plant somatic hybridization),又稱原生質體融合(Protoplast fusion )是指將植物不同種、屬,甚至科間的原生質體通過人工方法誘導融合,然后進行離體培養,使其再生雜種植株的技術。植物細胞具有細胞壁,未脫壁的兩個細胞是很難融合的,植物細胞只有在脫
植物體細胞雜交的技術分類
根據融合時細胞的完整程度,原生質體融合可分為兩大類:?對稱融合(symmetric fusion)-即兩個完整的細胞原生質體融合。?非對稱融合(asymmetric fusion)-利用物理或化學方法使某親本的核或細胞質失活后再進行融合,它可以分為幾種:用于細胞核或細胞質失活的方法分為物理和化學兩大
植物體細胞雜交技術的步驟
①原生質體的分離。植物細胞之間有果膠質粘連,每個細胞之外還有一層纖維素組成的壁,因此,在分離原生質體時,首先要在一定濃度的酶液(果膠酶與纖維素酶)中保溫,消去果膠質與纖維素后才能使原生質體分離出來。②原生質體的融合。不同種之間原生質體的融合,須選用一種融合誘導劑(聚乙二醇,或高鈣CaCl2.2啹O,
植物體細胞雜交的研究與發展
1960年,Cocking用酶法制備高等植物原生質體首次獲得成功;1970年,Power首次用硝酸鈉進行為誘導劑進行了較大規模的原生質體誘導融合;1971年,Nagata和Takebe首次從離體煙草原生質體培養中獲得再生完整植株;1972年,Carlson首次獲得粉藍煙草和郎氏煙草的細胞雜種,這也是
植物體細胞雜交技術現在的應用
?植物體細胞雜交又稱原生質體融合,就是將不同種的植物體細胞,在一定條件下融合成雜種細胞,并把雜種細胞培育成新的植物體的技術。體細胞雜交在轉移優良性狀、改良作物、創造新型物種上顯現了重要的應用前景。在農業上,科學家們利用這項技術,培育出了胡蘿卜——羊角芹、白菜——甘藍等種間或屬間雜種,在生產具有較高的
輻射性雜交產生體細胞雜交的過程
G3嵌板的產生→確定STSs→PCR體系及反應條件→構建RH圖譜.
體細胞雜交的方法介紹
所用方法是:①根據雙親細胞的形態特征,用不同熒光染料標記,人工挑選或用熒光激活細胞分揀機分離。或通過顯微操作直接挑選。②在合適的選擇壓下,只允許雜種細胞生長,淘汰雙親和同源融合細胞。如生長激素自主選擇、代謝互補選擇、白化互補選擇、營養缺陷型互補選擇、藥物抗性互補選擇等。
影響植物體細胞雜交的因素有哪些?
首先,原生質體質量對細胞的融合起著至關重要的作用,高質量的原生質體是細胞融合的首要條件。其次,融合方法其三是融合參數,包括各種融合液都應選擇適當。c.方法:物理方法(離心、振動、電激)、化學方法(聚乙二醇)d.雜種細胞的篩選和培養:機械法、生理法、遺傳法e.雜種細胞的再生和鑒定:由愈傷組織再培養出雜
植物體細胞雜交的技術原理和特點
植物體細胞雜交(plant somatic hybridization),又稱原生質體融合(Protoplast fusion )是指將植物不同種、屬,甚至科間的原生質體通過人工方法誘導融合,然后進行離體培養,使其再生雜種植株的技術。植物細胞具有細胞壁,未脫壁的兩個細胞是很難融合的,植物細胞只有在脫
體細胞雜交的實驗原理介紹
不同種植物的原生質體可在人工誘導條件下融合,所產生的雜種細胞,即異核體經過培養可再生新壁,分裂形成愈傷組織,進而分化產生雜種植株。由于進行融合的原生質體來自體細胞,故該項技術也叫體細胞雜交。原生質體融合能使有性雜交不親合的植物種間進行廣泛的遺傳重組,因而在農業育種上具有巨大的潛力。在植物遺傳操作研究
體細胞雜交實驗的原理介紹
不同種植物的原生質體可在人工誘導條件下融合,所產生的雜種細胞,即異核體經過培養可再生新壁,分裂形成愈傷組織,進而分化產生雜種植株。由于進行融合的原生質體來自體細胞,故該項技術也叫體細胞雜交。原生質體融合能使有性雜交不親合的植物種間進行廣泛的遺傳重組,因而在農業育種上具有巨大的潛力。在植物遺傳操作
體細胞雜交實驗的方法介紹
實驗目的了解用聚乙二醇PEG方法誘異同種植物原生質體融合的技術,并能根據新本原生質體的形態樗來鑒別雜種細胞。實驗原理不同種植物的原生質體可在人工誘導條件下融合,所產生的雜種細胞,即異核體經過培養可再生新壁,分裂形成愈傷組織,進而分化產生雜種植株。由于進行融合的原生質體來自體細胞,故該項技術也叫體細胞
關于體細胞雜交的相關介紹
體細胞是生物體除生殖細胞外的所有細胞。將從身體分離的體細胞做組織培養進行遺傳學研究的學科稱為體細胞遺傳學(somaticgenetics)。體外培養細胞可人為控制或改變環境條件,并可建立細胞株,長期保存,進行各種正常和病理研究。與基因定位有關的是體細胞雜交(somaticcellhybridiz
體細胞雜交的實驗原理介紹
不同種植物的原生質體可在人工誘導條件下融合,所產生的雜種細胞,即異核體經過培養可再生新壁,分裂形成愈傷組織,進而分化產生雜種植株。由于進行融合的原生質體來自體細胞,故該項技術也叫體細胞雜交。原生質體融合能使有性雜交不親合的植物種間進行廣泛的遺傳重組,因而在農業育種上具有巨大的潛力。在植物遺傳操作
體細胞雜交的雜種細胞的介紹
新產生的融合細胞稱為雜種細胞(hybridcell),含有雙親不同的染色體。雜種細胞有一個重要的特點是在其繁殖傳代過程中出現保留嚙齒類一方染色體而人類染色體則逐漸丟失,最后只剩一條或幾條,其原因至今不明。這種僅保留少數甚至一條人染色體的雜種細胞正是進行基因連鎖分析和基因定位的有用材料。由于人和鼠
關于體細胞雜交實驗的方法介紹
所有操作均在超凈工作臺上進行。 1.原生質體的分離和收集。 2.將收集的兩種不同材料的原生質體分別懸浮在0.16mol/L的CaCl2·2H2O(pH5.8~6.2)原生質體密度調整為2×105/ml左右(用血細胞計數板統計原生質體密度)。 3.將兩種原生質體懸液等量混合。 4.用刻度吸
體細胞雜交的實驗方法介紹
所有操作均在超凈工作臺上進行。1.原生質體的分離和收集。2.將收集的兩種不同材料的原生質體分別懸浮在0.16mol/L的CaCl2·2H2O(pH5.8~6.2)原生質體密度調整為2×105/ml左右(用血細胞計數板統計原生質體密度)。3.將兩種原生質體懸液等量混合。4.用刻度吸管將混合的原生質體懸
關于體細胞雜交的基本內容介紹
植物體細胞雜交是在原生質體培養技術的基礎上,借用動物細胞融合方法發展起來的一門新型生物技術。植物體細胞雜交的過程包括原生質體的制備,原生質體融合的誘導,雜種細胞的篩選和培養,以及雜種植株的再生與鑒定等環節。下面以煙草和大豆的體細胞雜交為例,簡要介紹植物體細胞雜交的過程。 原生質體制備選取煙草植
植物總RNA提取方法及過程介紹
目的:用于 Northern 雜交、純化 mRNA、RT-PCR 及 DDRT-PCR 等。材料:植物油嫩組織器官或種子萌發的幼苗。1、異硫氰酸胍法(1)試劑①異硫氰酸胍溶液:4mol/L 二異硫氰酸胍,25mmol/L 檸檬酸鈉(pH7.0),0.5%十二烷基肌氨酸鈉,0.1mol/L 巰基乙醇。
體細胞雜交所需實驗材料儀器介紹
1.實驗材料:煙草或其它植物無菌苗的葉片。胡蘿卜肉質根誘導的松軟愈傷組織或懸浮培養細胞。2.試劑2.1酶液及洗滌液,同植物原生質體的分離和培養實驗。2.2PEG溶液2.3高pH高鈣稀釋液2.4DPD培養基同植物原生質體的分離和培養實驗。
體細胞雜交的定義
體細胞雜交又稱體細胞融合,指將兩個原生質體不同的體細胞融合成一個體細胞的過程。融合形成的雜種細胞,兼有兩個細胞的染色體。
體細胞雜交的概念
體細胞雜交又稱體細胞融合,指將兩個原生質體不同的體細胞融合成一個體細胞的過程。融合形成的雜種細胞,兼有兩個細胞的染色體。
體細胞雜交的簡介
體細胞是生物體除生殖細胞外的所有細胞。將從身體分離的體細胞做組織培養進行遺傳學研究的學科稱為體細胞遺傳學(somaticgenetics)。體外培養細胞可人為控制或改變環境條件,并可建立細胞株,長期保存,進行各種正常和病理研究。與基因定位有關的是體細胞雜交(somaticcellhybridiz
體細胞雜交實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 匯合至一定程度的受體細胞 試劑、試劑盒 受體細胞適合生存的培養基 合適的選擇性試劑 含感