恒溫PCR技術檢測轉基因有哪些優點
恒溫PCR一種新式恒溫核酸擴增方法,其原理是采用能特異識別靶序列上6個位點的4條引物及一種具有鏈置換活性的DNA聚合酶,反應全過程恒定63℃,不到1h的時間里進行核酸的指數級擴增,其擴增效率可達到109個~ 1010個拷貝數量級。在擴增反應中產生莖-環結構,保證引物與其雜交啟動新一輪核酸合成。配合恒溫熒光檢測設備可實時監測擴增情況。該擴增法具有簡單、快速、準確、易檢測、適用面廣等優點。迪澳轉基因快速檢測箱,配置了高通量恒溫熒光檢測儀DEAOU-308C、轉基因快速檢測試劑、植物基因組核酸提取試劑及必備的實驗耗材。為客戶提供了精確高效、功能全面、經濟實用的轉基因檢測手段。......閱讀全文
恒溫擴增技術與PCR-區別
如果是恒溫的話怎么來完成變性、退火以及延伸過程呢下面是摘錄的:操作技術和普通PCR沒區別,反應溫度上不要高溫低溫中文三步,只要60度就可以。原理,在常規PCR基礎上增加了3對引物(普通1對)使得引物幾乎涵蓋了目的基因序列的三分之一以上。如果定量加熒光探針,定性就不必了。
恒溫核酸擴增技術與傳統PCR對比
和傳統的PCR技術相比,恒溫核酸擴增不僅僅是縮短了核酸擴增的時間,更重要的是核酸擴增擺脫了對硬件的束縛。PCR技術原理是利用94℃高溫使DNA雙鏈解開,并在耐高溫的DNA聚合酶的作用下擴增DNA片段。PCR反應至少需要2個不同的溫度使DNA片段得到特異性的擴增。恒溫核酸擴增是利用各種酶與DNA之
最簡單的恒溫擴增PCR——RCA/RCT
小背景滾環擴增技術,rolling circle amplification,RCA——基于DNA的擴增方法;滾環轉錄技術,rolling circle transcription,RCT——基于RNA的擴增方法。?滾環擴增/轉錄技術是基于借鑒了自然界中環狀DNA/RNA復制和轉錄方式開發的一種恒溫
恒溫PCR技術檢測轉基因有哪些優點
恒溫PCR一種新式恒溫核酸擴增方法,其原理是采用能特異識別靶序列上6個位點的4條引物及一種具有鏈置換活性的DNA聚合酶,反應全過程恒定63℃,不到1h的時間里進行核酸的指數級擴增,其擴增效率可達到109個~ 1010個拷貝數量級。在擴增反應中產生莖-環結構,保證引物與其雜交啟動新一輪核酸合成。配合恒
恒溫PCR技術于食品中致病菌檢測的應用
可以用于檢測致病菌特定基因序列,從而檢測是否有致病菌污染。另外也可以通過PCR技術對致病菌的類型進行檢測,檢測是否是新的致病菌品種
石磊:恒溫PCR技術在食品安全檢測領域的應用
2014年7月31日,第二屆國際檢驗檢測技術與裝備博覽會在北京國家會議中心隆重召開(以下簡稱檢博會)。本屆博覽會以“高端技術,服務民生”為主題,以“質檢、科技、國際”為特色,秉著“搭建國際平臺,服務檢測市場”的宗旨,為科技服務水平提升、檢驗檢測行業和諧發展、科技成果交流與合作、檢驗檢測儀器拓展市
熒光定量PCR-vs.-恒溫擴增,誰才是分子診斷的未來?
熒光定量PCR 和恒溫擴增在分子診斷方面的應用日漸受關注,兩種技術孰優孰劣,且聽作者娓娓道來。基于核酸擴增的分子診斷,是通過引物介導特異性擴增目的基因,以檢測內源性(遺傳或變異)或外源性(病原體)目的基因的存在與否,從而對疾病的診斷和治療提供信息和決策依據。其主要應用場景有傳染病的診斷,血篩,腫瘤早
恒溫水槽/恒溫水箱/恒溫槽/恒溫搖床
HW-101A低溫水槽產品詳細介紹 :??1.風冷式全封閉壓縮機組制冷?2.HW-101A低溫水槽設有外循環泵,可建立機外第二恒溫場?3.HW-101A低溫水槽槽內冷液可外引,冷卻機外實驗容器?4.HW-101A低溫水槽采用XTT-7微機智能控制系統?5.觸摸軟鍵可快速設定溫度,操作方便。?6.上窗
恒溫水槽/恒溫水箱/恒溫槽/恒溫搖床
HW-101A低溫水槽產品詳細介紹 :??1.風冷式全封閉壓縮機組制冷?2.HW-101A低溫水槽設有外循環泵,可建立機外第二恒溫場?3.HW-101A低溫水槽槽內冷液可外引,冷卻機外實驗容器?4.HW-101A低溫水槽采用XTT-7微機智能控制系統?5.觸摸軟鍵可快速設定溫度,操作方便。?6.上窗
多重PCR(Multiplex-PCR)
一般PCR僅應用一對引物,通過PCR擴增產生一個核酸片段,主要用于單一致病因子等的鑒定.多重PCR(multiplex PCR),又稱多重引物PCR或復合PCR,它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物,同時擴增出多個核酸片段的PCR反應,其反應原理,反應試劑和操作過程與一般PCR相同.??? 多
PCR簡介/PCR儀
PCR的要素基本的PCR須具備PCR儀圖冊1.要被復制的DNA模板 Template2.界定復制范圍兩端的引物Primers.3.DNA聚合酶Taq. Polymearse4.合成的原料(四種脫氧核苷酸)及水。 PCR儀工作原理利用升溫使DNA變性,在聚合酶的作用下使單鏈復制成雙鏈,進而達到基因復制
多重PCR(Multiplex-PCR)
一般PCR僅應用一對引物,通過PCR擴增產生一個核酸片段,主要用于單一致病因子等的鑒定.多重PCR(multiplex PCR),又稱多重引物PCR或復合PCR,它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物,同時擴增出多個核酸片段的PCR反應,其反應原理,反應試劑和操作過程與一般PCR相同.??? 多
Troubleshooting-for-PCR-and-multiplex-PCR
Troubleshooting discussion is based on the PCR protocol as described in the table below. All reactions are run for 30 cycles.COMPONENTVOLUMEFINALCONCE
重疊PCR—overlap-PCR
1、簡介?重疊PCR也是基本的PCR原理:變性-退火-延伸。不同的是在重疊PCR過程是兩個或者幾個片段重疊延伸之后,再進行指數擴增的PCR過程。 ?2、基本原理*步:PCR產生兩個或者幾個片段,這幾個片段之間必須有重疊區。?第二步:以兩個片段為例,見上圖,*步產生的兩個片段,A D鏈之間有互補,B
恒溫搖床恒溫搖床
KY-C全溫搖床/振蕩器又為空氣全溫恒溫搖床是一種溫度可控的培養箱和振蕩器相結合的生化儀器,是植物、生物、微生物、遺傳、病毒、環保、醫學等科研、教育和生產部門作精密培養制備不可缺少的實驗室設備。其主要特點:①溫控,數字顯示。②開設有補氧孔,恒溫工作腔補氧充分。③設有機械定時,溫控部分有智能定時。④彈
普通PCR梯度PCR-原位PCR-熒光定量PCR儀的區別
普通PCR儀: 一般把一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀,稱之為普通PCR儀,也就是傳統的PCR儀。如果要用它做不同的退火溫度則需要多次運行。如;(ABI 2720) 梯度PCR儀: 一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱
反轉錄PCR(RTPCR,-Reversed-Transcript-PCR)
1 原理 RT—PCR是一種將cDNA合成與PCR技術結合分析基因表達的快速靈敏的方法,主要用于對表達信息進行檢測或定量分析,還可以用來檢測基因表達差異而不必構建cDNA文庫克隆cDNA。RT-PCR的模板可以為總RNA或poly(A)+選擇性RNA。逆轉錄反應可以使用逆轉錄酶,以隨機引物、ol
反向PCR-(inversePCR)
利用反向PCR可對未知序列擴增后進行分析,探索鄰接已知DNA片段的序列,并可將僅知部分序列的全長cDNA進行分子克隆,建立全長的DNA探針。可用于:(1)基因游走研究;(2)轉位因子研究;(3)已知序列DNA旁側病毒整合位點分析等研究。實驗方法原理反向PCR可用于研究與已知DNA區段相連接的未知染色
直接原位PCR(In-situ-PCR)
原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術,使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞(爬片、甩片或涂片)或組織(石蠟、冰凍切片)上直接對靶基因片段進行擴增,通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。一、組織切片和細胞樣品的制備試劑與配置10%福爾馬林;二甲苯;PBS操
直接原位PCR(In-situ-PCR)
原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術,使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞(爬片、甩片或涂片)或組織(石蠟、冰凍切片)上直接對靶基因片段進行擴增,通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。一、組織切片和細胞樣品的制備試劑與配置10%福爾馬林;二甲苯;PBS操
反向PCR-(inversePCR)
實驗方法原理 反向PCR是克隆T-DNA插入位點側翼DNA序列非常有效的方法。?1. ?選擇合適的限制性內切酶位點。并在T-DNA的邊界(左邊界、右邊界均可)和酶切位點附近設計引物P1、P2;2. ?回收DNA,T4連接酶連接,使酶切后的DNA片段環化;3. ?回收連接后的DNA,用引物P1、P2做
反向PCR(inverse-PCR)簡介
反向PCR是一種多聚合酶鏈式反應(PCR)應用的方法,可使已知序列的核心區邊側的未知DNA成幾何級數擴增。用適當的限制性內切裂解含核心區的DNA,以產生適合于PCR擴增大小的片段,然后片段的末端再連接形成環狀分子。PCR的引物同源于環上核心區的末端序列,但其方向可使鏈的延長經過環上的未知區而不是分開
菌落PCR(Colony-PCR)方法
菌落PCR(Colony PCR)可不必提取基因組DNA,不必酶切鑒定,而是直接以菌體熱解后暴露的DNA為模板進行PCR擴增,省時少力。建議使用載體上的通用引物。通常利用此方法進行重組體的篩選或者DNA測序分析。最后的PCR產物大小是載體通用引物之間的插入片斷大小。具體方法:1、PCR混合物的制備T
反向PCR-(inversePCR)
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 反向PCR可用于研究與已知DNA區段相連接的未知染色體序列,因此又可稱為染色體緩移或染色體步移。這時選擇的引物雖然與核心DNA區兩末端序列互補,但兩引物3’端是相互反向的。擴增前先用限制性內切酶酶切樣品DNA,然后用DNA連接
PCR技術(十四):反向PCR
描述一種大聚合酶鏈反應(PCR)應用的方法,使在已知序列的核心區邊側的未知 DNA成幾何級數擴增。用適當的限制性內切裂解含核心區的DNA,以產生適合于PCR擴 增大小的片段,然后片段的末端再連接形成環狀分子。PCR的引物同源于環上核心區 的末端序列,但其方向性,使鏈的延長經過環上的未知區而不是分開引
PCR
實驗概要protocal for PCR實驗步驟PCR?1) Add the following to a microfuge tube:? ? ? ? 10 ul reaction buffer? ? ? ? 1 ul 15 uM forward primer? ? ? ? 1 ul 15 uM
PCR
PCRPolymerase Chain Reaction1) Add the following to a microfuge tube:10 ul reaction buffer1 ul 15 uM forward primer1 ul 15 uM reverse primer1 ul templ
恒溫
恒溫恒濕實驗室簡單來說是生產企業對產品質量檢驗與控制的基礎設施,也是流通領域里的商品質量檢驗把關的基礎設施。恒溫恒濕實驗室的應用非常廣泛,比如棉紡織廠,毛紡廠,化纖廠,紙張廠等等,這些企業都會用到這種實驗室,那么,恒溫恒濕實驗室方案設計要點有哪些? 恒溫恒濕實驗室 一、設計目的
降落PCR(Touchdown-PCR)的原理?
Touchdown PCR是指每隔一個循環降低1°C反應退火溫度,直至達到“Touchdown”退火溫度,然后以此退火溫度進行10個左右的循環。該方法最初出現是為了避開確定最佳退火溫度而進行的復雜的反應優化過程。正確和非正確退火溫度之間的任何差異將造成每個循環PCR產物量的兩倍差異(每攝氏度造成
實時熒光定量PCR(realtime-PCR)
實驗材料 細胞樣品試劑、試劑盒 RNA提取試劑盒熒光定量PCR MixTRIZOLdNTP氯仿逆轉錄酶MMLV異丙醇Taq酶DEPC水ddH2OTEMgCl2瓊脂糖溴化乙錠MOPS甲醛乙酸鈉EDTAEB溴酚蘭儀器、耗材 離心管離心機風光光度計電泳槽凝膠板Realtime PCR儀實驗步驟 一、 樣品