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  • 熒光分析法的特點

    熒光分析是一種先進的分析方法,它比電子探針法、質譜法、光譜法、極譜法等都應用的較廣泛和普及,這同熒光分析具有很多優點分不開的。熒光分析所用的設備較簡單,如目測熒光儀和熒光光度計構造非常簡單完全可以自己制造。比起質譜儀、極譜儀和電子探針儀來它在造價上要便宜很多倍,而且熒光分析的最大特點是:分析靈敏度高、選擇性強和使用簡便。同時具備這三大特點的儀器并不多 。 在紫外線照射下能直接發射熒光的化學元素并不很多,所以對一些元素進行熒光分析時大部分采用間接測定法,這就是用有機試劑與被測定的元素組成絡合物。這些絡合物在紫外線照射下能發射出不同波長的熒光素,然后由熒光強度測定出該元素的含量。由于有機熒光試劑的品種繁多,用熒光分析可測定的元素有六十多種 。例如對鉛的熒光分析:鉛離子Pb與Cl離子組成鉛氯絡合物,該絡合物在短波紫外光270毫微米激發下,它會發射出藍色熒光,熒光峰值波長在480毫微米,根據熒光強度在標準工作曲線上測定出Pb的含量。該法......閱讀全文

    激光熒光分析

    激光熒光分析采用發射光強度大,波長更純的激光作光源,該光源大大提高了熒光分析方法的靈敏度和選擇性。利用激光光源的相干性可以產生非常理想的輻射,以激光為光源可以使儀器僅僅使用一個單色器,加上利用可調諧激光器的可調功能獲取激發光譜發射光譜。目前,激光誘導熒光分析法已經成為分析超低濃度物質的靈敏而有效的方

    熒光免疫分析

    免疫分析是基于蛋白抗原和抗體之間、或者小分子半抗原與抗體之間的特異反應的分析方法,是生物分析化學的重要內容之一。其中,用熒光物質作為標記的免疫分析即為熒光免疫分析。作為熒光標記物,應具有高的熒光強度,其發射的熒光與背景熒光有明顯區別;它與抗原或抗體的結合不破壞其免疫活性,標記過程要簡單、快速;水溶性

    偏振熒光分析

    任何物質都處于不斷運動中,液體環境中的熒光分子也不例外。因此當受到偏振光激發時,熒光分子的運動狀態(如旋轉或翻轉)、熒光分子與其他因子相互作用(如相互結合或排斥)、其所處環境的性質(如溶液的黏度、溫度_等因素都可能對熒光分子受激發后發出的偏振光的性質產生影響。對此進行分析比較,就可能揭開物質活動的內

    熒光分析特點

    (1)分子熒光光譜分析的主要特點是靈敏度高、選擇性好,熒光分析的靈敏度要比吸收光譜測量高2-3個數量級。分光光度法通常在 10-7 級 ,而熒光的靈敏度達10-9。(2)強選擇性強,熒光物質具有兩種特征光譜:激發光譜和吸收光譜,相對于分光光度法單一的吸收光譜來說,熒光光譜可根據激發光譜和發射光譜來鑒

    低溫熒光分析

    通常熒光分析都在室溫下進行,熒光光譜為帶光譜,由于各種變寬因素,譜帶往往較寬。自然界有許多有機化合物,其化學結構頗為接近,而且各存在著多種同分異構體和衍生物,它們的光譜往往相互重疊,難以鑒別表征以及定量測定。環境因素對分子熒光會產生顯著的影響,溫度是其中一個主要因素。隨著溫度的降低,介質黏度增大,熒

    同步熒光分析

    同步熒光分析由Lloyd首先提出,它與常用熒光測定最大的區別是同時掃描激發和發射兩個單色器波長,由測得的熒光強度信號與對應的激發波長(或發射波長)構成光譜圖,即同步熒光光譜。按光譜掃描方式的不同,同步熒光分析可以分為恒(固定)波長法、恒能量法、可變角法和恒基體法。同步熒光分析具有光譜簡單,譜帶窄、分

    熒光造影分析

    1.臂一視網膜循環時間(arm-retina circulation time ,A-Rct )熒光素從肘前靜脈注射后,經右心→左心→主動脈→頸總動脈→頸內動脈→眼動脈而到眼底,為時7~12秒(但亦有長達15~30秒者),兩眼相差不能超過0.5~1秒。2.視網膜血循環的分期及熒光形態熒光素鈉經眼動脈

    熒光光譜儀的偏振熒光分析和時間分辨熒光分析

      1、偏振熒光分析。熒光體的熒光偏振與熒光各向異性值的測定,能夠提供與熒光體在激發態壽命期間動力學相關的信息,因此熒光偏振技術被廣泛應用于研究分子間的作用,例如蛋白質與核酸、抗原與抗體、蛋白質與多肽的結合作用等。  2、時間分辨熒光分析。由于不同分子的熒光壽命不同,可在激發與檢測之間延緩一段時間,

    概述熒光分析的分析方法

      直接測定法  利用物質自身發射的熒光進行測定分析。  間接測定法  不管是直接測定,還是間接測定,一般的采用標準工作曲線法,取各種已知量的熒光物質,配成一系列的標準溶液,測定出這些標準溶液的熒光強度,然后給出熒光強度對標準溶液的濃度的工作曲線。在同樣的儀器條件下,測定未知樣品的熒光強度,然后從標

    熒光分析的特點

      熒光分析是一種先進的分析方法,它比電子探針法、質譜法、光譜法、極譜法等都應用的較廣泛和普及,這同熒光分析具有很多優點分不開的。熒光分析所用的設備較簡單,如目測熒光儀和熒光光度計構造非常簡單完全可以自己制造。比起質譜儀、極譜儀和電子探針儀來它在造價上要便宜很多倍,而且熒光分析的最大特點是:分析靈敏

    時間分辨熒光分析

    由于不同分子的熒光壽命不同,可在激發與檢測之間延緩一段時間,使具有不同熒光壽命的物質得以分別檢測,即時間分辨熒光分析。采用帶時間延遲設備的脈沖光源和帶有門控時間電路的檢測器件,可以在固定延遲時間后和門控寬度內得到時間分辨熒光光譜。選擇合適的延遲時間,可以把待測組分的熒光和其他組分或雜質的熒光以及儀器

    什么是熒光分析

      熒光分析法是指利用某些物質被紫外光照射后處于激發態,激發態分子經歷一個碰撞及發射的去激發過程所發生的能反映出該物質特性的熒光,可以進行定性或定量分析的方法。由于有些物質本身不發射熒光(或熒光很弱),這就需要把不發射熒光的物質轉化成能發射熒光的物質。例如用某些試劑(如熒光染料),使其與不發射熒光的

    熒光分析的簡史

      早在1575年,就有人在陽光下觀察到菲律賓紫檀木切片的黃色水溶液呈現極為可愛的天藍色。1852年G. G. 斯托克斯用分光計觀察奎寧和葉綠素溶液時,發現它們所發出的光的波長比入射光的波長稍長,由此判明這種現象是由于這些物質吸收了光能并重新發出不同波長的光線,而不是由于光的漫射作用引起的。斯托克斯

    熒光分析的儀器

    進行熒光分析的儀器稱為熒光分光光度計。它由以下五部分組成。 是從復合光色散出窄波帶寬度光束的裝置,由狹縫、鏡子和色散元件組成。色散元件包括棱鏡和光柵。熒光分光光度計有兩個單色器:激發單色器和發射單色器。繪制三維熒光光譜(圖4 )時則采用正交多色器。所謂多色器系單色器去掉出射狹縫,正交指兩個多色器的入

    熒光分析新技術

    常規的熒光分析技術主要是直接或間接對無機化合物、有機化合物等進行定性和定量分析,因其高靈敏度和選擇性,得到了較為廣泛的應用。然而,在實際情況中由于分析物質的復雜性、所處環境的多樣性等,常規的熒光分析法收到了極大限制。許多新型的熒光技術,例如同步熒光分析、偏振熒光分析、三維熒光分析、時間分辨熒光分析、

    什么是熒光分析?

      熒光分析就是基于物質的光致發光現象而產生的熒光的特性及其強度進行物質的定性和定量的分析方法。目前,也廣泛地作為一種表征技術來研究體系的物理、化學性質及其變化情況,例如生物大分子構象及性質的研究。  熒光光譜適用于固體粉末、晶體、薄膜、液體等樣品的分析。根據樣品分別選配石英池(液體樣品)或固體樣品

    熒光免疫分析原理

      熒光免疫檢測技術具有專一性強、靈敏度高、實用性好等優點,因此它被用于測量含量很低的生物活性化合物,例如蛋白質(酶、接受體、抗體)、激素(甾族化合物、甲狀腺激素、酞激素)、藥物及微生物等  作為免疫分析法的一種,FIA同樣存在兩種模式,即競爭型和夾心型。其中競爭型(以標記抗原的競爭型為例)的測定原

    熒光分析的原理

    使激發光的波長和強度保持不變,而讓熒光物質所發生的熒光通過發射單色器照射于檢測器上,調節發射單色器至各種不同波長處,由檢測器測出相應的熒光強度,然后以熒光波長為橫坐標,以熒光強度為縱坐標作圖,即為熒光光譜,又稱熒光發射光譜。讓不同波長的激發光激發熒光物質使之發生熒光,而讓熒光以固定的發射波長照射到檢

    熒光光譜的熒光分析的特點

    靈敏度高:熒光分析的最大特點是靈敏度高,通常情況下要比分光光度計的靈敏度高出2-3個數量級。選擇性強:包括激發光譜和發射光譜,在鑒定物質時,通過選擇波長可以使分子熒光分析有多種選擇。試樣量少和方法簡便。能提供比較多的物理參數:如激發光譜、發射光譜、熒光強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振等參數。這些參

    熒光光譜的熒光分析的特點

    靈敏度高:熒光分析的最大特點是靈敏度高,通常情況下要比分光光度計的靈敏度高出2-3個數量級。選擇性強:包括激發光譜和發射光譜,在鑒定物質時,通過選擇波長可以使分子熒光分析有多種選擇。試樣量少和方法簡便。能提供比較多的物理參數:如激發光譜、發射光譜、熒光強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振等參數。這些參

    熒光分析法熒光相關術語概念

    根據波茲曼 (Boltzmann)分布,分子在室溫時基本上處于 電子能級的基態。當吸收了紫外-可見光后,基態分子中的電子只能躍遷到激發單重態的各個不同振動-轉動能級,根據自旋禁阻選律, 不能直接躍遷到激發三重態的各個振動-轉動能級。處于激發態的分子是不穩定的,通常以輻射躍遷和無輻射躍遷等方式釋放多余

    怎樣分析熒光定量pcr結果分析

    如果有標準曲線,按照標準曲線計算. 一般都是相對量.則用delta delta CT方法來計算.舉例如下:對照組基因A的CT值為20,內參(比如βactin)CT值15.實驗組基因A CT值18,內參CT值14. 首先算加樣量:delta CT=15-14=1.2的1次方是2.也就是說實驗組的加樣量

    怎樣分析熒光定量pcr結果分析

    如果有標準曲線,按照標準曲線計算. 一般都是相對量.則用delta delta CT方法來計算.舉例如下:對照組基因A的CT值為20,內參(比如βactin)CT值15.實驗組基因A CT值18,內參CT值14. 首先算加樣量:delta CT=15-14=1.2的1次方是2.也就是說實驗組的加樣量

    時間分辨熒光免疫分析分析原理

      在生物流體和血清中的許多復合物和蛋白本身就可以發熒光,因此使用傳統的發色團進而進行熒光檢測的靈敏度就會嚴重下降。大部分背景熒光信號是短時存在的,因此將長衰減壽命的標記物與時間分辨熒光技術相結合,就可以使瞬時熒光干擾減到最小化。  時間分辨熒光分析法(TRFIA)實際上是在熒光分析(FIA)的基礎

    熒光光譜儀的熒光分析特點

      (1)熒光分析的主要特點是靈敏度高、選擇性好,熒光分析的靈敏度要比吸收光譜測量高2-3個數量級。分光光度法通常在 10-7 級,而熒光的靈敏度達10-9。  (2)強選擇性強,熒光物質具有兩種特征光譜:激發光譜和吸收光譜,相對于分光光度法單一的吸收光譜來說,熒光光譜可根據激發光譜和發射光譜來鑒定

    關于熒光分析法熒光的產生介紹

      根據波茲曼(Boltzmann)分布,分子在室溫時基本上處于電子能級的基態。當吸收了紫外-可見光后,基態分子中的電子只能躍遷到激發單重態的各個不同振動-轉動能級,根據自旋禁阻選律, 不能直接躍遷到激發三重態的各個振動-轉動能級。  處于激發態的分子是不穩定的,通常以輻射躍遷和無輻射躍遷等方式釋放

    熒光光譜儀同步熒光分析簡介

      同步熒光分析。它與常用熒光測定最大的區別是同時掃描激發和發射兩個單色器波長,由測得的熒光強度信號與對應的激發波長(或發射波長)構成光譜圖,即同步熒光光譜。步熒光分析具有光譜簡單,譜帶窄、分辨率高、光譜重疊少等優點,可提高選擇性,減少散射光等的影響,非常適合多組分混合物的分析,在環境、藥物、臨床、

    自動化熒光免疫分析系統—熒光偏振免疫分析儀

      熒光偏振免疫分析儀  熒光偏振免疫測定(FPIA)為一種均相熒光免疫測定方法,熒光強度與熒光標志物質在溶液中旋轉的速度與分子大小成反比,分子大,轉動速度慢,熒光強度大;分子小,轉動速度快,熒光強度小。常采用抗原抗體競爭反應原理,適用于小分子半抗原(如藥物濃度)的檢測。  第四節  自動化酶聯免疫

    熒光免疫分析的原理

      作為免疫分析法的一種,FIA同樣存在兩種模式,即競爭型和夾心型。其中競爭型(以標記抗原的競爭型為例)的測定原理是基于未標記的抗原(Ag)和標記抗原(Ag-L)競爭結合有限的抗體(Ab)而實現的免疫分析法。檢測時,Ab和Ag-L的濃度是固定的。當未標記的Ag加到Ab和Ag-L的免疫混合物中后,Ag

    熒光分析的相關介紹

      特點:靈敏度更高g/ml,應用不如UV廣泛。  應用:  ①直接熒光光度法  ②作為HPLC的檢測器(用的多)  根據物質分子吸收光譜和熒光光譜能級躍遷機理,具有吸收光子能力的物質在特定波長光(如紫外光)照射下可在瞬間發射出比激發光波長長的光,即熒光。  分子受特定光照射后處于激發態的分子返回基

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