液相色譜儀器使用小貼士
貯液瓶的日常維護 清潔是保持流動相貯液瓶正常使用的關鍵,使用LCMS級的溶劑和試劑。陳舊的流動相和用久了的試劑應定期廢棄,防止生長微生物和組分改變。貯液瓶內壁定期清洗,流動相濾頭定期清洗或更換。 液相泵的日常維護 泵的密封圈是最易磨損的部件,密封圈的損壞可能引發漏液或劇烈壓力波動;單向閥的正常工作至關重要,它若發生故障,將直接影響流速的穩定性。 日常維護應注意以下幾點: ①使用LCMS級的溶劑和試劑; ②確保系統壓力在正常范圍; ③使用完緩沖液體系后用純水沖洗干凈,防止鹽沉積,系統不運行時應存儲在無緩沖液的溶液或有機溶劑中; ④密封圈按照各個生產廠商的建議定期更換。 進樣器的日常維護 樣品預處理對于防止進樣針和進樣閥堵塞至關重要。 預處理常用方法: ①超濾; ②溶劑萃取/去鹽; ③固相萃取; ④灌注凈化/去鹽;......閱讀全文
液相色譜流動相的貯存
流動相的貯存流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內,不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑,導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統,可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴,防止溶劑揮發引起組成變化,也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液
高效液相色譜流動相選擇
?????? 流動相的性質要求 ?????? 一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。?????? 流動相選擇 ?????? 1:由強到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗,這樣可以很快地得到分離結果,然后根據出峰情況
液相色譜流動相的濾過
流動相的濾過所有溶劑使用前都必須經0.45μm(或0.22μm)濾過,以除去雜質微粒,色譜純試劑也不例外(除非在標簽上標明“已濾過”)。用濾膜過濾時,特別要注意分清有機相(脂溶性)濾膜和水相(水溶性)濾膜。有機相濾膜一般用于過濾有機溶劑,過濾水溶液時流速低或濾不動。水相濾膜只能用于過濾水溶液,嚴禁用
液相色譜流動相的選擇
在化學鍵合相色譜法中,溶劑的洗脫能力直接與它的極性相關。在正相色譜中,溶劑的強度隨極性的增強而增加;在反相色譜中,溶劑的強度婕緣腦鑾慷躒酢?BR>正相色譜的流動相通常采用烷烴加適量極性調整劑。反相色譜的流動相通常以水作基礎溶劑,再加入一定量的能與水互溶的極性調整劑,如甲醇、乙腈、四氫呋喃等。極性
液相色譜流動相的貯存
流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內,不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑,導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統,可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴,防止溶劑揮發引起組成變化,也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長霉,應
液相色譜流動相的特點
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的,因此要求流動相具備以下的特點: (1)流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。 (2)流動相與樣品不產生化學反應 (3)流動相的黏度要盡量小,以便得到好的分離效果;降低柱壓降,延長泵的
高效液相色譜和氣相色譜的異同點
不同點:一、流動相不同:HPLC為液體流動相,GC為永久性氣體作流動相(通常叫做載氣)二、進樣器不同:高效液相為平頭進樣針,氣相色譜為尖頭進樣針三、色譜柱長不同:(1)氣相色譜柱通常幾米到幾十米(氣相色譜由于載氣的相對分析量較低,分子間隙大,故粘度低,流動性好,組分在氣相中流動速度快,因此可以增加柱
氣相色譜液相色譜主要調節哪些參數
液相的主要參數1 泵:流速,比例閥或梯度洗脫表的時間和比例2 自動進樣器:進樣量,洗針程序,進樣序列表等等3 柱溫箱:柱溫4 檢測器:根據不同檢測器來設定。一般紫外設波長氣相的主要參數1 自動進樣器:進樣量,洗針程序,進樣序列表2 頂空進樣器:氣壓,加熱爐溫度和時間,進樣序列表,導管溫度3 進樣口:
氣相色譜與液相色譜的異同點
1、流動相?氣相色譜法的流動相是氣體(又稱載氣),液相色譜法的流動相為液相(又稱淋洗液)。2、分類(按固定相不同) 氣相色譜法中,按固定相不同可分為:氣---固色譜法;氣---液色譜法。高效液相色譜法中,按固定相不同可分為:液---固色譜法;液---液色譜法。3、固定相 氣固(液固)色譜的固定相:多
高效液相色譜和氣相色譜的異同點
不同點:一、流動相不同:hplc為液體流動相,gc為永久性氣體作流動相(通常叫做載氣)二、進樣器不同:高效液相為平頭進樣針,氣相色譜為尖頭進樣針三、色譜柱長不同:(1)氣相色譜柱通常幾米到幾十米(氣相色譜由于載氣的相對分析量較低,分子間隙大,故粘度低,流動性好,組分在氣相中流動速度快,因此可以增加柱
氣相色譜與液相色譜的異同點
不同點:一、流動相不同:HPLC為液體流動相,GC為永久性氣體作流動相(通常叫做載氣)二、進樣器不同:高效液相為平頭進樣針,氣相色譜為尖頭進樣針三、色譜柱長不同:(1)氣相色譜柱通常幾米到幾十米(氣相色譜由于載氣的相對分析量較低,分子間隙大,故粘度低,流動性好,組分在氣相中流動速度快,因此可以增加柱
氣相色譜與液相色譜的異同點
不同點:一、流動相不同:HPLC為液體流動相,GC為永久性氣體作流動相(通常叫做載氣)二、進樣器不同:高效液相為平頭進樣針,氣相色譜為尖頭進樣針三、色譜柱長不同:(1)氣相色譜柱通常幾米到幾十米(氣相色譜由于載氣的相對分析量較低,分子間隙大,故粘度低,流動性好,組分在氣相中流動速度快,因此可以增加柱
氣相色譜與液相色譜的異同點
不同點:一、流動相不同:HPLC為液體流動相,GC為永久性氣體作流動相(通常叫做載氣)二、進樣器不同:高效液相為平頭進樣針,氣相色譜為尖頭進樣針三、色譜柱長不同:(1)氣相色譜柱通常幾米到幾十米(氣相色譜由于載氣的相對分析量較低,分子間隙大,故粘度低,流動性好,組分在氣相中流動速度快,因此可以增加柱
液相色譜色譜柱的保養
??? 液相色譜是一類分離與分析技術,其特點是以液體作為流動相,發展到今天已經成為了包括科學研究、工業生產、環境保護、食品安全在內多個領域常用的科研分析儀器之一。與此同時,隨著液相色譜的普及,因為儀器故障或者使用不規范導致的事故新聞也時有發生,因此,了解液相色譜相關的規范與使用方法,對于使用者來說尤
高效液相色譜的色譜柱
填料和流動相的組分應按各品種項下的規定,常用的色譜柱填料有硅膠和化學鍵合硅膠。后者以十八烷基硅烷鍵合硅膠最為常用辛基鍵合硅膠次之,氰基或氨基鍵合硅膠也有使用;離子交換填料用于離子交換色譜;凝膠或玻璃微球等,用于分子排阻色譜等。注樣量一般為數微升。除另有規定外,柱溫為室溫,檢測器為紫外吸收檢測器。在用
液相色譜質譜儀常見色譜故障
常見色譜故障壓力過高壓力過高的原因有很多,但總體來講就是一個原因,管路堵塞。所以當出現壓力高時候就要分段來檢查哪一段發生堵塞,檢查柱子進口過濾芯是否被污染;? PURGE閥過濾芯是否被污染或色譜柱被污染,檢查管路,尤其是針座毛細管,檢查進樣器旋轉密封閥或者進樣針及針座有否堵塞。壓力過低壓力過低總體來
色譜技術方法高效液相色譜
高效液相色譜 (HPLC)是目前應用最多的色譜分析方法,高效液相色譜系統由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩;進樣系統要求進樣便利切換嚴密;由于液體流動相粘度遠遠高于氣體,
高效反相液相色譜
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 反相色譜(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式,任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分,這部分越大,一般保留值越高
液相色譜保養知識
1、? 色譜柱長時間不用,存放時,柱內應充滿溶劑,兩端封死(如ACN適于反相色譜柱,正相色譜柱用相應的有機相)2、? 對于手動進樣器,當使用緩沖溶液時,要用水沖洗進樣口,同時搬動進樣閥數次,每次數毫升。3、流動相使用前必須過濾,不要使用多日存放的蒸餾水(易長菌)。4、帶seal-wash的1100,
Waters液相色譜教程
本資料來自于Waters中國有限公司培訓中心 包括4個文件: 液相色譜教程(一)液相色譜基礎知識A 液相色譜教程(一)液相色譜基礎知識B 液相色譜教程(三)液相色譜實驗操作 液相色譜教程(四)液相色譜柱基礎知識 ? 下載:Waters液相色譜教程
什么叫液相色譜
液相色譜的原理:利用物質在兩相中的差 速遷移來分離不同物質,由于流動相都是液體,所以是液相色譜。根據固定相不同液相色譜又分為液液色譜和液固色譜。
高效反相液相色譜
反相色譜(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式,任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分,這部分越大,一般保留值越高,在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式,在生物大分子的反相液
waters液相色譜學校
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高效液相色譜原理
采用高效液相色譜(HPLC)法分離單糖和寡糖,較多采用氨基柱,乙腈和水作為流動相,此法具有完全分離麥汁、發酵液和啤酒中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和麥芽三糖的優點。本文采用Hypersil NH2柱分析麥汁、發酵液和啤酒中三糖以內的可發酵糖。至今尚未見到采用反相高效液相色譜(RP-HPLC)法分離測
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類 ①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrow bore),內徑1~2mm,柱長10~20cm; ③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm; ④半制備柱,內徑>5mm; ⑤實驗室制備柱,內徑20~4
液相色譜的應用
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。與試樣預處理技術相配合,HPLC所達到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離復雜相體中的
液相色譜柱通論
選擇液相色譜柱簡單思路1. 確定分離目的 ? ? ?確定你的應用是否要求高分離度、短分析時間、高靈敏度、長柱壽命,低的操作成本等等。2. 評估分析物的化學性質 ? ? ?評估分析物的化學性質. . 諸如化學結構、溶解性、穩定性等等。3. 選擇合適的色譜柱 ? ? ?了解色譜填料的物理和化學性
液相色譜串聯質譜法
實驗方法原理尿樣經葡萄糖醛酸甙酶酶解后進行液-液提取,以甲醇-0.1%甲酸緩沖液(含0.02mol/L乙酸銨)(體積比為68∶32)為流動相,采用CosmosilC18色譜柱分離,并以三重四極桿串聯質譜多反應監測掃描方式對尿樣中的脫氫表雄酮(DHEA)、睪酮、表睪酮、雄酮和苯膽烷醇酮等5種激素進行檢
高效液相色譜分類
按照分離原理分類,大概可以分為:1.吸附色譜:基于各組分對固定相的吸附能力不同而實現分離的方法。比較常見的色譜柱是火星硅膠、氧化鋁、活性炭、聚乙烯、聚酰胺等。用于測定結構異構體。2.分配色譜:基于樣品在流動相和固定相之間溶解度不同的原理實現分離。比較常見的正相氰基柱(正相)和極為普遍的C18色譜柱(
液相色譜發展簡史
早在古代羅馬時期,人們已知道將一滴含有混合色素的溶液滴在一塊布或一片紙上,通過觀察溶液展開產生的同心圓環來分析染料與色素。實際上,這種簡單操作已經采用了現代色譜學的基本原理。19世紀中葉,德國化學家Runge對古羅馬人的這種方法作了重要的改進,使其具有良好的重現性與定量能力,使鹽溶液可在紙上分離;另