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  • 單抗糖基化調控之參數篇(二)

    關鍵質量參數是單抗仿制藥研發的標桿,包括糖基化修飾、聚體、電荷異質性等,其中如糖基化修飾對單抗的生物活性、免疫原性、藥物代謝動力學、構象、穩定性及溶解度具有重要的影響。細胞培養過程中細胞所處環境,如pH、溫度、滲透壓、溶氧等參數會影響到單抗糖基化表現,本文從pH著手就文獻中不同pH設置及調節pH時的pCO2水平和不同的堿液對糖基化影響的研究進行了簡要總結。 pH是細胞培養過程中重要的參數之一,其對細胞生長、蛋白生產及蛋白質量有不容忽視的作用,CO2作為pH調節控制的重要組成部分近年來也慢慢引起了研究人員的重視,血氣分析儀在細胞培養中的普遍使用也為研究CO2對細胞表現的影響帶來便利。 Brunner的團隊通過新型分離控制策略在CHO細胞中研究了單因素pH(6.8、7.0和7.2)、pCO2(37、94和150 mmHg)、pO2及其交互作用對細胞生長及蛋白質量的影響,在新型的分離控制策略中pH采用HCL和NaOH進行調節,......閱讀全文

    單抗糖基化調控之參數篇(二)

      關鍵質量參數是單抗仿制藥研發的標桿,包括糖基化修飾、聚體、電荷異質性等,其中如糖基化修飾對單抗的生物活性、免疫原性、藥物代謝動力學、構象、穩定性及溶解度具有重要的影響。細胞培養過程中細胞所處環境,如pH、溫度、滲透壓、溶氧等參數會影響到單抗糖基化表現,本文從pH著手就文獻中不同pH設置及調節pH

    單抗糖基化調控之控制參數篇

      關鍵質量參數是單抗仿制藥研發的標桿,包括糖基化修飾、聚體、電荷異質性等,其中如糖基化修飾對單抗的生物活性、免疫原性、藥物代謝動力學、構象、穩定性及溶解度具有重要的影響。細胞培養過程中細胞所處環境,如pH、溫度、滲透壓、溶氧等參數會影響到單抗糖基化表現,本文就文獻中對滲透壓、培養時間和溶氧等培養控

    單抗糖基化調控之參數篇(下)

       關鍵質量參數是單抗仿制藥研發的標桿,包括糖基化修飾、聚體、電荷異質性等,其中如糖基化修飾對單抗的生物活性、免疫原性、藥物代謝動力學、構象、穩定性及溶解度具有重要的影響。細胞培養過程中細胞所處環境,如pH、溫度、滲透壓、溶氧等參數會影響到單抗糖基化表現,本文從pH著手就文獻中不同pH設置及調節p

    單抗糖基化調控之控制參數篇(上)

       關鍵質量參數是單抗仿制藥研發的標桿,包括糖基化修飾、聚體、電荷異質性等,其中如糖基化修飾對單抗的生物活性、免疫原性、藥物代謝動力學、構象、穩定性及溶解度具有重要的影響。細胞培養過程中細胞所處環境,如pH、溫度、滲透壓、溶氧等參數會影響到單抗糖基化表現,本文就文獻中對滲透壓、培養時間和溶氧等培養

    研究抗體藥物的糖基化修飾為何重要?

      在眾多的蛋白質翻譯后修飾中,糖基化修飾是最重要和最復雜的修飾之一,也是評價抗體的關鍵質量屬性之一。單抗藥物功能的實現與其糖基化修飾密切相關,糖基化修飾會影響蛋白的性能,如構象、穩定性、溶解度、藥物代謝動力學、活性及免疫原性。本文中,筆者就糖基化及其對抗體藥物的穩定性/半衰期、安全性及生物活性進行

    為何要關注抗體藥物的糖基化修飾?

       在眾多的蛋白質翻譯后修飾中,糖基化修飾是最重要和最復雜的修飾之一,也是評價抗體的關鍵質量屬性之一。單抗藥物功能的實現與其糖基化修飾密切相關,糖基化修飾會影響蛋白的性能,如構象、穩定性、溶解度、藥物代謝動力學、活性及免疫原性。本文中,筆者就糖基化及其對抗體藥物的穩定性/半衰期、安全性及生物活性進

    種康院士團隊揭示植物糖基化修飾調控開花新機制

      蛋白質糖基化是一種重要的蛋白質翻譯后修飾方式,在復雜的生命活動中扮演重要角色。常見的糖基化,如N-糖基化和O-糖基化,蛋白質一般會被修飾上結構復雜的糖鏈。  然而,生物體中還存在一種常見但比較特殊的糖基化,它僅在蛋白質上修飾一個單糖。在此修飾中,N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)通過O-糖苷鍵連

    OGlcNAc糖基化修飾SNAP29調控自噬小體的成熟

      中科院生物物理所張宏研究組最近在《Nature Cell Biology》雜志上發表題為O-GlcNAc-modification of ?SNAP-29 regulates autophagosome maturation的文章介紹了他們關于O-GlcNAc糖基化修飾SNAP-29并調控自噬小

    我國揭示OGlcNAc糖基化介導表觀遺傳修飾調控發育新機制

      細胞內蛋白質翻譯后O-連N-乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)修飾,由O-GlcNAC糖基轉移酶催化完成,這種糖基化修飾參與調控細胞內多種重要的生物學過程,并在人類疾病與治療中得到應用。在植物中,這種動態的蛋白糖基化與磷酸化修飾調節植物春化作用介導的開花過程,而O-GlcNAc信號與組蛋白表觀遺

    糖基化調控MDH1酶活性促進胰腺癌生長的分子機理

    2022年7月25日,生命科學學院周如鴻教授團隊和易文教授團隊合作在生物化學及分子生物學高影響力期刊Nature Chemical Biology上發表了題為“O-GlcNAcylation promotes pancreatic tumor growth by regulating malate

    揭示糖基化修飾調控阿爾茨海默beta淀粉樣蛋白聚集機制

      在阿爾茨海默病(AD)進展中,存在beta淀粉樣蛋白(β-Amyloid,Aβ)的積累。Aβ在受影響的腦組織區域形成病理性聚集,被認為與AD的發生、進展和表型密切相關。多種翻譯后修飾(如磷酸化、硝基化、糖基化等)對Aβ的病理性聚集及體內生物活性具有重要且不同的調控作用。在AD患者腦內,多種病理相

    N糖基化治療性抗體結構-表征方法和治療潛力的研究

      自20世紀80年代以來,單克隆抗體作為治療性藥物得到快速的發展。與小分子藥物相比,單克隆抗體的優勢在于具有較高的靶向特異性、毒副作用小和半衰期長的優勢。而不足之處包含復雜的生產、純化過程,以及翻譯后修飾(PTM)導致單克隆抗體結構和功能的異質性。  在這些翻譯后修飾的情況中,Fc區域的糖基化是導

    從羅氏無N糖基化的PDL1抗體說起

      Fc融合蛋白一般通過Fc的FcRn 介導的循環提高目標蛋白藥物的半衰期,改善藥代動力學特征,作用機制不依賴于ADCC/CDC活性。一些非癌適應癥抗體藥物,以及腫瘤免疫療法抗體藥物如PD-1/PD-L1抗體,其作用機制同樣不依賴于ADCC、CDC活性。這時Fc的細胞毒性作用ADCC、CDC可能帶來

    N糖基化治療性抗體—結構、表征方法和治療潛力的研究

      自20世紀80年代以來,單克隆抗體作為治療性藥物得到快速的發展。與小分子藥物相比,單克隆抗體的優勢在于具有較高的靶向特異性、毒副作用小和半衰期長的優勢。而不足之處包含復雜的生產、純化過程,以及翻譯后修飾(PTM)導致單克隆抗體結構和功能的異質性。  在這些翻譯后修飾的情況中,Fc區域的糖基化是導

    研究人員揭示O糖基化修飾調控生物鐘周期的分子機制

      生物鐘是植物細胞中感知并預測光照和溫度等環境因子晝夜周期性變化的精細時間機制,它通過協調代謝與能量狀態以適應環境因子的晝夜動態變化,從而為植物的生長發育提供適應性優勢。生物鐘周期紊亂會嚴重影響植物多種生理和發育關鍵過程,如開花時間和脅迫應答等。生物鐘核心因子的翻譯后修飾如磷酸化和泛素化等,可以精

    科學家揭示O糖基化修飾調控生物鐘周期的分子機制

      生物鐘是植物細胞中感知并預測光照和溫度等環境因子晝夜周期性變化的精細時間機制,它通過協調代謝與能量狀態以適應環境因子的晝夜動態變化,從而為植物的生長發育提供適應性優勢。生物鐘周期紊亂會嚴重影響植物多種生理和發育關鍵過程,如開花時間和脅迫應答等。生物鐘核心因子的翻譯后修飾如磷酸化和泛素化等,可以精

    糖基化修飾調控阿爾茨海默病淀粉樣蛋白病理性聚集機制

    在阿爾茨海默病(AD)進展中,存在beta淀粉樣蛋白(β-Amyloid,Aβ)的積累。Aβ在受影響的腦組織區域形成病理性聚集,被認為與AD的發生、進展和表型密切相關。多種翻譯后修飾(如磷酸化、硝基化、糖基化等)對Aβ的病理性聚集及體內生物活性具有重要且不同的調控作用。在AD患者腦內,多種病理相關蛋

    糖基化修飾調控阿爾茨海默病beta淀粉樣蛋白病理性聚集

      在阿爾茨海默病(AD)進展中,存在beta淀粉樣蛋白(β-Amyloid,Aβ)的積累。Aβ在受影響的腦組織區域形成病理性聚集,被認為與AD的發生、進展和表型密切相關。多種翻譯后修飾(如磷酸化、硝基化、糖基化等)對Aβ的病理性聚集及體內生物活性具有重要且不同的調控作用。在AD患者腦內,多種病理相

    種子發芽室主要的幾個調控參數是什么?

    ??? 種子發芽室主要是為種子發芽試驗而準備的大型實驗設備,因此其工作的過程都是圍繞種子發芽試驗而展開的,而我們知道,種子只有在合適的溫度、濕度和光照條件下,才能夠正常健康的發芽,因此種子發芽室主要的幾個調控參數就是溫度、濕度和光照度。? ? 1.種子發芽的重要參數之一就是溫度,因此溫度是種子發芽室

    什么是糖基化?

    糖基化是在酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,發生于內質網。在糖基轉移酶作用下將糖轉移至蛋白質,和蛋白質上的氨基酸殘基形成糖苷鍵。蛋白質經過糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調節蛋白質功能作用。

    糖基化與免疫

       蛋白糖基化是真核生物常見的蛋白質翻譯后修飾過程,合成后的或正在合成的蛋白質在糖基轉移酶的作用下,將活化的單糖加到肽鏈上。根據糖與肽鏈中氨基酸的連接方式不同,可將糖基化修飾分為三種形式:N-糖苷(N-glycan)、O-糖苷(O-gly-can)、糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphat

    蛋白質糖基化的檢測實驗——酶脫糖基化

    實驗方法原理用酶或化學脫糖基化、通過選擇性標記或通過凝集素親和層析法是檢測蛋白糖基化常用方法。實驗材料蛋白樣品試劑、試劑盒磷酸鈉緩沖液蛋白溶液β-巰基乙醇NP-40 溶液儀器、耗材SDS-PAGE玻璃器皿植物凝集素柱實驗步驟一、用 PNGaseF(N-多糖酶)處理1. 以 0.1 mol/L 磷酸鈉

    蛋白質糖基化的檢測實驗——化學脫糖基化

    實驗材料蛋白樣品試劑、試劑盒TFMS苯甲醚儀器、耗材玻璃器皿實驗步驟1. 在冰上預冷干凈、干燥的玻璃器皿。用帶有 Teflon-絲帽的玻璃試管混合試劑。2. 打開或混合試劑前,在冰上預冷所有的溶液。從冰冷的原液中,TFMS:苯甲醚 ( Sigma) 以 2:1 (v/v) 的比例混合。緩慢的向試管內

    微生物所在PD1糖基化修飾與抗體藥物作用機制中獲進展

      近年來,學界在以PD-1/PD-L1為靶點的單克隆抗體治療在腫瘤免疫治療中獲進展。PD-1是一個高度糖基化的免疫分子,腫瘤的發生發展常伴隨糖基化修飾的異常,且PD-1的N-糖基化位點在人群中存在一定多態性。因此,研究PD-1的糖基化修飾及其對抗體藥物作用的影響,對于理解以PD-1為靶點的抗體藥物

    糖基化的過程介紹

    N-連接的糖鏈合成起始于內質網,完成于高爾基體。在內質網形成的糖蛋白具有相似的 糖鏈,由Cis面進入高爾基體后,在各膜囊之間的轉運過程中,發生了一系列有序的加工和修飾,原來糖鏈中的大部分甘露糖被切除,但又被多種 糖基轉移酶依次加上了不同類型的糖分子,形成了結構各異的寡糖鏈。糖鏈的空間結構決定了它可以

    概述糖基化的過程

      N-連接的糖鏈合成起始于內質網,完成于高爾基體。在內質網形成的糖蛋白具有相似的糖鏈,由Cis面進入高爾基體后,在各膜囊之間的轉運過程中,發生了一系列有序的加工和修飾,原來糖鏈中的大部分甘露糖被切除,但又被多種糖基轉移酶依次加上了不同類型的糖分子,形成了結構各異的寡糖鏈。糖蛋白的空間結構決定了它可

    簡述糖基化的作用

      糖基化對膜蛋白功能影響常常是很重要的,對特異的生物學功能起介導作用:  1、對細胞具有保護、穩定、組織及屏障等多方面作用;  2、可作為外源性受體的特異性配體,某些糖鏈可作為各種病毒、細菌及寄生物的特異受體;  3、糖鏈也可作為內源性受體的特異性配體,參與介導清除、周轉及胞內穿行作用;  4、糖

    糖基化位點檢測

      經常聽到糖基化修飾,今天帶大家一探究竟。什么是糖基化修飾呢?糖基化是在糖基轉移酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,發生于內質網和高爾基體。糖基化修飾是一類非常重要的翻譯后修飾,大部分膜蛋白和分泌蛋白均為糖蛋白,糖基化修飾不僅影響蛋白質的空間構象、活性、運輸和定位,同時在信號轉導、分子識別,

    糖蛋白糖基化

      已上市的蛋白藥物中,治療性糖蛋白藥物數量眾多,糖基化是最常見的蛋白翻譯后修飾。2020版《中國藥典》第一增補版中,正式發布9405糖蛋白的糖基化分析指導原則。賽默飛能為糖基化分析提供業內最全方案,可根據糖蛋白的復雜性、與藥物安全有效的相關性以及生產監控策略的總體設計等,為糖基化提供完整糖蛋白、糖

    糖基化的分類介紹

    根據 糖苷鏈類型,哺乳動物的蛋白質糖基化可以分為三類,即以Ser、Thr、Hpy和Hly的羥基的氧原子為連接點,形成-0-糖苷鍵型。以Asn的酰胺基、N一末端氨基酸的 α - 氨基以及Lys或Arg的ω - 氨基為連接點,形成-N-糖苷鍵型。由乙醇胺磷酸鹽、三個甘露糖苷、葡萄糖胺以及纖維醇磷脂組成的

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